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詳細介紹
EV-Up™ 間充質(zhì)干細胞專用外泌體生產(chǎn)用培養(yǎng)基
EV-Up™ 間充質(zhì)干細胞專用外泌體生產(chǎn)用培養(yǎng)基是一種間充質(zhì)干細胞（MSC）專用的外泌體（EVs）生產(chǎn)培養(yǎng)基。只要將EV-Up™ 間充質(zhì)干細胞外泌體生產(chǎn)用添加劑，無動物源成分添加至EV-Up™ 間充質(zhì)干細胞外泌體生產(chǎn)用基礎(chǔ)培養(yǎng)基，無動物源成分中配成*培養(yǎng)基即可使用。本品不含血清及動物源成分， 適用于多種組織來源的MSCs的培養(yǎng)。
◆特點
● 比血清培養(yǎng)基的外泌體分泌量高
● 培養(yǎng)的外泌體活性高
● 維持MSC的高存活率
◆適用細胞
適用于多種組織來源的MSC
細胞種類
骨髓來源的MSC，脂肪來源的MSC，臍帶基質(zhì)來源的MSC等
◆使用方法
*1：往EV-Up™ 間充質(zhì)干細胞外泌體生產(chǎn)用基礎(chǔ)培養(yǎng)基，無動物源成分（產(chǎn)品編號：053-09451）中添加了EV-Up™ 間充質(zhì)干細胞外泌體生產(chǎn)用添加劑，無動物源成分（產(chǎn)品編號：298-84001）即為EV-Up™ 完全培養(yǎng)基
6孔板培養(yǎng)
1. 將各種間充質(zhì)干細胞以5×103的密度來鋪板，然后用增殖培養(yǎng)基（血清培養(yǎng)基或無血清培養(yǎng)基）培養(yǎng)至80-90%匯合。
2. 去除增殖培養(yǎng)基后加入4 mL EV-UP™*培養(yǎng)基。培養(yǎng)3-5日。
3. 回收培養(yǎng)上清，2,000×g離心20分鐘，用干凈試管收集離心后的上清液，避免吸入沉淀。
※ 可在培養(yǎng)上清中添加1/100的EV-Save™ 細胞外囊泡吸附抑制劑來抑制試管或吸頭等對EV的吸附。
4. 用MagCapture™ 外泌體提取試劑盒PS提取培養(yǎng)上清中的外泌體。
◆應(yīng)用數(shù)據(jù)
外泌體粒子數(shù)
利用PS親和法*1從各種培養(yǎng)基的培養(yǎng)上清液中提取外泌體，使用NanoSight的Nano Tracking Analysis技術(shù)對外泌體的粒子數(shù)進行分析。
*1：在金屬離子的存在下，結(jié)合分子通過磷脂酰絲氨酸（PS）捕獲細胞外囊泡后，再使用螯合劑洗脫的方法。
*1：使用MagCapture™外泌體提取試劑盒PS時，可以通過本方法進行外泌體提取。
*2：Exosome-Depleted FBS
FUJIFILM Wako研發(fā)的EV-Up™ *培養(yǎng)基，在培養(yǎng)MSC時，釋放的外泌體粒子數(shù)是D-MEM+10% EV depleted FBS培養(yǎng)的2.6倍左右。另外，F(xiàn)UJIFILM Wako的EV-Up™ *培養(yǎng)基與血清培養(yǎng)基相比，可以分泌更多的EV。
抗纖維化活性
用TGFβ刺激培養(yǎng)人胎肺成纖維細胞（TIG3細胞），用PS親和法從不同培養(yǎng)基的培養(yǎng)上清中提取EV，取5×107 particles/mL提取出的EV，用RT-PCR對纖維化標(biāo)記物（Collagen III，αSMA）的基因表達水平進行定量，以比較抗纖維化活性。
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使用FUJIFILM Wako研發(fā)的EV-Up™ *培養(yǎng)基的EV，強力抑制了由TGFβ引起的纖維化相關(guān)基因的表達。由此可見，F(xiàn)UJIFILM Wako的EV-Up™ *培養(yǎng)基能培養(yǎng)出的外泌體活性更高。
細胞存活率
將在血清培養(yǎng)基中擴增培養(yǎng)的人骨髓來源的MSC用不同培養(yǎng)基培養(yǎng)5天，然后檢測產(chǎn)生外泌體后的細胞存活率。
FUJIFILM Wako 的EV-Up™ *培養(yǎng)基培養(yǎng)的MSC與D-MEM+10% EV-depleted FBS相比，具有同樣高的細胞存活率。
外泌體標(biāo)志物蛋白表達
用PS親和法從培養(yǎng)上清液中提取外泌體，并通過ELISA檢測標(biāo)記蛋白CD9、CD63和CD81的表達。
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FUJIFILM Wako的EV-Up™ *培養(yǎng)基與其他血清培養(yǎng)基相比，不同外泌體標(biāo)記分子的表達更好。
◆產(chǎn)品列表
EV-Up™MSC專用外泌體生產(chǎn)用培養(yǎng)基
產(chǎn)品列表 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 包裝 |
053-09451 | EV-Up™ EV Production Basal Medium for MSC, AF EV-Up™ 間充質(zhì)干細胞外泌體生產(chǎn)用基礎(chǔ)培養(yǎng)基， 無動物源成分 | for Cell Culture | 95 mL |
298-84001 | EV-Up™ MSC EV Production Supplement, AF EV-Up™ 間充質(zhì)干細胞外泌體生產(chǎn)用添加劑， 無動物源成分 | for Cell Culture | 100 mL |
外泌體防吸附&凍結(jié)保護試劑
產(chǎn)品列表 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 包裝 |
058-09261 | EV-Save™ Extracellular Vesicle Blocking Reagent EV-Save™ 細胞外囊泡保存穩(wěn)定劑（超濾用） | for Genetic Research | 1 mL |
050-09461 | EV-Save™ Extracellular Vesicle Blocking Reagent for 動物體內(nèi)實驗用 EV-Save™ 細胞外囊泡保存穩(wěn)定劑（動物體內(nèi)實驗用） | for Genetic Research | 1 mL |
外泌體粒提取和純化試劑
產(chǎn)品列表 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 包裝 |
299-77603 | MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS | for Genetic Research | 2 tests |
293-77601 | 10 tests | ||
290-80301 | PS Capture™ Exosome Isolation Resin Kit | for Genetic Research | 1 kit |
294-84101 | MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS Ver.2 | for Genetic Research | 2 tests |
290-84103 | 10 tests |
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