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          ES細(xì)胞?iPS細(xì)胞培養(yǎng)用血清代替品

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          • ES細(xì)胞?iPS細(xì)胞培養(yǎng)用血清代替品

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          更新時(shí)間:2020-09-28 12:23:38瀏覽次數(shù):1050

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 一個(gè)月以上 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)
          ES細(xì)胞?iPS細(xì)胞培養(yǎng)用血清代替品
          本產(chǎn)品是ES細(xì)胞和iPS細(xì)胞培養(yǎng)中使用的血清代替品。血清含有分化誘導(dǎo)因子,會(huì)導(dǎo)致干細(xì)胞分化。使用本產(chǎn)品代替血清,可在ES和iPS細(xì)胞培養(yǎng)的同時(shí),保持他們的未分化狀態(tài),達(dá)到穩(wěn)定培養(yǎng)。
          本產(chǎn)品不含劇毒物質(zhì),將其作為普通物質(zhì)處理。
          使用本產(chǎn)品配制培養(yǎng)基培養(yǎng)的小鼠ES細(xì)胞,可用于制備嵌合體小鼠,并確認(rèn)其種系傳遞。

          詳細(xì)介紹

          ES細(xì)胞?iPS細(xì)胞培養(yǎng)用血清代替品

           

          1714634726602401.jpg

            本產(chǎn)品是ES細(xì)胞和iPS細(xì)胞培養(yǎng)中使用的血清代替品。血清含有分化誘導(dǎo)因子,會(huì)導(dǎo)致干細(xì)胞分化。使用本產(chǎn)品代替血清,可在ES和iPS細(xì)胞培養(yǎng)的同時(shí),保持他們的未分化狀態(tài),達(dá)到穩(wěn)定培養(yǎng)。
            本產(chǎn)品不含劇毒物質(zhì),將其作為普通物質(zhì)處理。
            使用本產(chǎn)品配制培養(yǎng)基培養(yǎng)的小鼠ES細(xì)胞,可用于制備嵌合體小鼠,并確認(rèn)其種系傳遞。

           

          ◆特點(diǎn)•優(yōu)勢(shì)

          ● 可用于嵌合體小鼠制備,并確認(rèn)其種系傳遞。

          ● 作為血清替代品,用于小鼠ES細(xì)胞?人IPS細(xì)胞培養(yǎng)。

          ● 不含劇毒物質(zhì)。

           

          ◆案例•應(yīng)用

          1、嵌合體小鼠的制備與種系傳遞

            將組裝HaloTag® cDNA的目標(biāo)載體導(dǎo)入小鼠ES細(xì)胞,用含有StemSure® Serum Replacement(SSR)的培養(yǎng)基培養(yǎng)。確認(rèn)載體導(dǎo)入小鼠ES細(xì)胞后,將其注入至ICR小鼠的胚盤(pán)胞,并移植至ICR小鼠的子宮。得到的嵌合體小鼠與C57BL/6J小鼠交配,獲得F1小鼠。

           

          (1)  嵌合體小鼠

            收集嵌合體小鼠的血液,用TRITC(四甲基若丹明異硫氰酸鹽)對(duì)HaloTag® 蛋白質(zhì)染色。發(fā)現(xiàn)小鼠ES細(xì)胞源的HaloTag® 的血液被染色,可確認(rèn)為嵌合化。

              

                1714634731319530.jpg1714634731539575.jpg

           

          (2) F1小鼠

            F1小鼠的血液發(fā)現(xiàn)HaloTag® 存在,可確認(rèn)用SSR培養(yǎng)基培養(yǎng)的ES細(xì)胞嵌合小鼠能夠正常存活。

          1714634731836471.jpg 漢化-圖片2.jpg

           

          2、人iPS細(xì)胞201B7的培養(yǎng)

          (1) 克隆形態(tài)與ALP染色 

            已確認(rèn)可用StemSure® Serum Replacement(SSR)培養(yǎng)人iPS細(xì)胞201B7株。ALP染色呈陽(yáng)性。

          上傳圖片4.jpg

          <培養(yǎng)基組成>
          D-MEM/Ham's F-12 + 20% SSR + 2 mmol/L L-Glutamine +1×MEM Non-essential Amino Acids + 0.1 mmol/L StemSure® 2-Mercaptoethanol + 1×Penicillin-Streptomycin + 5 ng/mL bFGF

           

          (2) 未分化標(biāo)記的發(fā)現(xiàn)

            使用StemSure® Serum Replacement(SSR)培養(yǎng)的人iPS細(xì)胞201B7株,確認(rèn)各種未分化標(biāo)記(Sox2, Oct3/4, SSEA-3, SSEA-4, Tra-1-81)呈陽(yáng)性。

          1714634732637788.jpg

           

          3、小鼠ES細(xì)胞D3的培養(yǎng)

          (1) 細(xì)胞形態(tài)與ALP染色

            使用StemSure® Serum Replacement(SSR)培養(yǎng)小鼠ES細(xì)胞D3,能觀察到小鼠ES細(xì)胞群*的光澤,ALP染色呈陽(yáng)性。

          上傳圖片6.jpg 

           

          (2) 細(xì)胞增殖曲線

            用不同培養(yǎng)基培養(yǎng)小鼠ES細(xì)胞D3進(jìn)行14繼代培養(yǎng),比較細(xì)胞增殖。

            如下圖所示StemSure® 系列與A公司有同等的性能。

          1714634733441381.jpg

          < StemSure® 系列培養(yǎng)基組成>
          StemSure® D-MEM + 15% SSR + 2 mmol/L L-Glutamine + 1×MEM Non-essentialAmino Acids + 0.1 mmol/L StemSure® 2-Mercaptoethanol + 1×Penicillin-Streptomycin + 1,000 units/mL StemSure® LIF

          (使用膠原包被的12孔板)

           

          (3) 細(xì)胞群倍加數(shù)*

            使用不同培養(yǎng)基對(duì)小鼠ES細(xì)胞D3進(jìn)行繼代培養(yǎng),檢查培養(yǎng)天數(shù)與細(xì)胞群倍加數(shù)的關(guān)系。

            下圖顯示StemSure® 系列與A公司產(chǎn)品的細(xì)胞群倍加數(shù)相同。

          1714634733779030.jpg

            *細(xì)胞群倍加數(shù) cell population doubling level,縮寫(xiě)PDL,指從培養(yǎng)開(kāi)始至現(xiàn)在細(xì)胞群的倍增次數(shù)。

           

          <培養(yǎng)基組成>

          StemSure® D-MEM + 15% SSR + 2 mmol/l L-Glutamine + 1×MEM Non-essentialAmino Acids + 0.1 mmol/l StemSure® 2-Mercaptoethanol + 1×Penicillin-Streptomycin + 1,000 units/ml StemSure® LIF

          (使用膠原包被的12孔板)

           

          (4) 未分化標(biāo)記的檢測(cè)

            使用StemSure® 系列對(duì)小鼠ES細(xì)胞D3進(jìn)行5代繼代培養(yǎng),各種未分化標(biāo)記(Nanog, Oct3/4, Sox2, SSEA-1)呈陽(yáng)性。

          1714634734202899.jpg

          <培養(yǎng)基組成>
          StemSure® D-MEM + 15% SSR + 2 mmol/L L-Glutamine + 1×MEM Non-essential Amino Acids + 0.1 mmol/L StemSure® 2-Mercaptoethanol+ 1×Penicillin-Streptomycin + 1,000 units/mL StemSure® LIF

           

          4、畸形瘤的形成

            用StemSure® 系列對(duì)小鼠ES細(xì)胞D3進(jìn)行繼代培養(yǎng)。對(duì)免疫不全小鼠的皮下注射培養(yǎng)后細(xì)胞。在形成皮下畸形瘤,其內(nèi)部檢測(cè)出神經(jīng)組織(外胚葉源)、軟骨組織(中胚葉源)、管腔結(jié)構(gòu)纖毛上皮(內(nèi)胚葉源)。

          <培養(yǎng)基組成 >
          StemSure® D-MEM + 15% SSR + 2 mmol/L L-Glutamine + 1×MEM Non-essential Amino Acids + 0.1 mmol/L StemSure® 2-Mercaptoethanol+ 1×Penicillin-Streptomycin + 1,000 units/mL StemSure® LIF

           

          ◆產(chǎn)品列表

          產(chǎn)品編號(hào)產(chǎn)品名稱(chēng)規(guī)格包裝
          191-18375Stemsure® 血清替代品細(xì)胞培養(yǎng)用500 mL

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