熒光分光光度計(jì)的基本結(jié)構(gòu):
1. 光源:
為高壓汞蒸氣燈或氙弧燈,后者能發(fā)射出強(qiáng)度較大的連續(xù)光譜,且在300nm~400nm 范圍內(nèi)強(qiáng)度幾乎相等,故較常用。
2.激發(fā)單色器:
置于光源和樣品室之間的為激發(fā)單色器或*單色器,篩選出特定的激發(fā)光譜。
3.發(fā)射單色器:
置于樣品室和檢測器之間的為發(fā)射單色器或第二單色器,常采用光柵為單色器。篩選出特定的發(fā)射光譜。
4. 樣品室:
通常由石英池(液體樣品用)或固體樣品架(粉末或片狀樣品)組成。測量液體時(shí),光源與檢測器成直角安排;測量固體時(shí),光源與檢測器成銳角安排。
5. 檢測器:
一般用光電管或光電倍增管作檢測器??蓪⒐庑盘柗糯蟛⑥D(zhuǎn)為電信號。
熒光分光光度計(jì)的優(yōu)點(diǎn):
靈敏度高,可以用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜,不但可以做一般的定量分析, 而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構(gòu)象變化, 從而闡明分子結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系。
熒光分光光度計(jì)的缺點(diǎn):
1、熒光的光強(qiáng)并不高,所以呈線性情況有時(shí)不很理想;
2、某些反應(yīng)熒光持續(xù)的時(shí)間較短;
3、熒光的發(fā)散方向不集中,不像透射光那樣集中,強(qiáng)度高;
4、受某些離子的干擾影響,熒光會(huì)湮滅,試驗(yàn)速度必須要快。