黄色视频不卡_午夜福利免费观看在线_亚洲国产精品999在线_欧美绝顶高潮抽搐喷水_久久精品成人免费网站_晚上一个人看的免费电影_国产又色又爽无遮挡免费看_成人国产av品久久久

    1. <dd id="lgp98"></dd>
      • <dd id="lgp98"></dd>
        1. 青島捷世康生物科技有限公司
          中級(jí)會(huì)員 | 第11年

          15288986320

          厭氧培養(yǎng)系列
          elisa試劑盒
          兔ELISA試劑盒
          培養(yǎng)基
          標(biāo)準(zhǔn)品
          化學(xué)試劑
          實(shí)驗(yàn)室耗材
          透析袋
          層析柱
          凝膠過濾填料
          疏水層析填料
          親和層析填料
          離子交換填料
          溶液
          抗體
          測(cè)試盒
          人ELISA試劑盒
          大鼠ELISA試劑盒
          小鼠ELISA試劑盒
          染色試劑盒
          染液
          標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)
          載體菌株

          細(xì)胞蛋白磷酸化酶2A 活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)

          時(shí)間:2022/6/2閱讀:570
          分享:

          主要用途

          細(xì)胞蛋白磷酸化酶2APP2A)活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用特異性合成底物磷酸化肽,PP2A去磷酸化后,釋放出游離磷酸根,由硫酸亞鐵氨還原產(chǎn)鉬藍(lán)顯色反應(yīng)峰值的變化,采用比色法測(cè)定其峰值的變化,以此進(jìn)行測(cè)算單位酶活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種細(xì)胞裂解懸液樣品包括免疫沉淀復(fù)合物和粗提或部分純化酶樣品蛋白磷酸化酶2A活性及其抑制劑的檢測(cè)。廣泛應(yīng)用于細(xì)胞凋亡、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測(cè)敏感。

          保存方式

          保存裂解液(Reagent B)、緩沖液(Reagent C)、反應(yīng)液(Reagent E、顯色液(Reagent F和專性液(Reagent H在-20冰箱里,避免反復(fù)凍融;其余的保存在4℃冰箱里;顯色液(Reagent F)具有腐蝕性,避免直接用手接觸; 有效保證6

           用戶自備

          15毫升離心管:用于樣品處理的容器

          1.5毫升離心管:用于樣品處理和保存的容器

          細(xì)胞刮脫棒:用于貼壁細(xì)胞脫離

          (微型)臺(tái)式離心機(jī):用于樣品收集

          培養(yǎng)箱:用于孵育反應(yīng)物

          500微升1厘米光徑比色皿:用于比色的容器

          分光光度儀:用于比色分

          實(shí)驗(yàn)步驟

          實(shí)驗(yàn)開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液放進(jìn)冰槽里融化。然后進(jìn)行下列操作。

          一、 樣品準(zhǔn)備

          1. 準(zhǔn)備好75cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶或100mm細(xì)胞培養(yǎng)皿的待測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞(5 X 107細(xì)胞)

          2. 小心加入3毫升預(yù)冷的清理液(Reagent A,覆蓋生長(zhǎng)表面

          3. 小心抽去清理液

          4. 使用細(xì)胞刮脫棒輕柔刮脫細(xì)胞 

          5. 加入3毫升清理液(Reagent A,混勻細(xì)胞

          6. 移入到預(yù)冷的15毫升錐形離心管(注意:懸浮細(xì)胞從這一步驟開始

          7. 放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為300g

          8. 小心抽去上清液

          9. 加入500微升裂解液(Reagent B,充分混勻

          10. 轉(zhuǎn)移到預(yù)冷的1.5毫升離心管

          11. 強(qiáng)力渦旋震蕩15

          12. 置于冰槽里孵育30分鐘

          13. 放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為16000g(或13000RPM,例如eppendorf 5415

          14. 小心移取500微升上清液到新的預(yù)冷的1.5毫升離心管

          15. 移取2微升進(jìn)行蛋白定量測(cè)定(注意:建議使用 Bradford 蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒-GMS30030.1

          16. 即刻放進(jìn)-70℃保存或置于冰槽里繼續(xù)后續(xù)操作

          二、測(cè)定準(zhǔn)

          1. 準(zhǔn)備好待測(cè)樣品(例如細(xì)胞裂解萃取液等),置于冰槽里(注意:樣品須澄清

          2. 設(shè)定好分光光度儀(溫度為37):波長(zhǎng)為660nm,并置零  

          3. 準(zhǔn)備好5個(gè)1.5毫升離心管,標(biāo)記為15號(hào)管

          4. 按下表分別加入陰性液(Reagent D標(biāo)準(zhǔn)液(Reagent G到每個(gè)離心管混勻

          5. 15號(hào)管放進(jìn)冰槽里備用,避免光照;標(biāo)準(zhǔn)管濃度見下表

          三、 標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定

          1. 移取200微升上述配制的標(biāo)準(zhǔn)液到新的比色皿

          2. 30溫度下孵育20分鐘

          3. 加入200微升顯色液(Reagent F,混勻

          4. 37溫度下孵育10分鐘,避免光照

          5. 即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè):獲得吸光讀數(shù)

          6. 重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟16四次

          7. 構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線:縱座標(biāo)(Y軸)為吸光單位(A);橫座標(biāo)(X軸)為標(biāo)準(zhǔn)濃度(微摩爾/

          四、 (選擇步驟)樣品背景測(cè)定

          1. 移取120微升緩沖液(Reagent C到新的比色皿

          2. 加入20微升待測(cè)樣品(總量100微克細(xì)胞裂解萃取液蛋白) 

          3. 30溫度下孵育20分鐘

          4. 加入60微升陰性液(Reagent D,混勻

          5. 加入200微升顯色液(Reagent F,混勻

          6. 37溫度下孵育10分鐘,避免光照

          7. 即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè):獲得吸光讀數(shù)

          8. 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品背景對(duì)應(yīng)濃度(微摩爾/

          五、 樣品總活性測(cè)定

          1. 移取100微升緩沖液(Reagent C到新的比色皿

          2. 加入20微升待測(cè)樣品(總量100微克細(xì)胞裂解萃取液蛋白) 

          3. 30溫度下孵育2分鐘

          4. 加入20微升反應(yīng)液(Reagent E

          5. 30溫度下孵育20分鐘

          6. 加入60微升陰性液(Reagent D,混勻

          7. 加入200微升顯色液(Reagent F,混勻

          8. 37溫度下孵育10分鐘,避免光照

          9. 即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè):獲得吸光讀數(shù)

          10. 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品總活性對(duì)應(yīng)濃度(微摩爾/

          六、 樣品非特異性活性測(cè)定

          1. 移取90微升緩沖液(Reagent C到新的比色皿

          2. 加入10微升專性液(Reagent H

          3. 加入20微升待測(cè)樣品(總量100微克細(xì)胞裂解萃取液蛋白) 

          4. 30溫度下孵育5分鐘

          5. 加入20微升反應(yīng)液(Reagent E

          6. 30溫度下孵育20分鐘

          7. 加入60微升陰性液(Reagent D,混勻

          8. 加入200微升顯色液(Reagent F,混勻

          9. 37溫度下孵育10分鐘,避免光照

          10. 即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè):獲得吸光讀數(shù)

          11. 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品非特異活性對(duì)應(yīng)濃度(微摩爾/


          會(huì)員登錄

          ×

          請(qǐng)輸入賬號(hào)

          請(qǐng)輸入密碼

          =

          請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

          收藏該商鋪

          X
          該信息已收藏!
          標(biāo)簽:
          保存成功

          (空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

          常用:

          提示

          X
          您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~
          撥打電話
          在線留言
          万盛区| 海晏县| 都昌县| 临邑县| 三门峡市| 新绛县| 遵化市| 沅陵县| 葵青区| 醴陵市| 临武县| 汉源县| 惠州市| 潜江市| 铅山县| 台北县| 德保县| 鲜城| 蓬莱市| 白玉县| 满洲里市| 莱阳市| 曲水县| 和硕县| 连南| 柞水县| 遵义县| 桂林市| 渑池县| 新沂市| 阳原县| 本溪| 荆州市| 宽城| 桂阳县| 法库县| 金溪县| 柘荣县| 漯河市| 兴文县| 哈巴河县|