黄色视频不卡_午夜福利免费观看在线_亚洲国产精品999在线_欧美绝顶高潮抽搐喷水_久久精品成人免费网站_晚上一个人看的免费电影_国产又色又爽无遮挡免费看_成人国产av品久久久

    1. <dd id="lgp98"></dd>
      • <dd id="lgp98"></dd>
        1. 上海拜力生物科技有限公司

          免疫沉淀技術(shù)服務(wù)|實驗技術(shù)服務(wù)

          時間:2015-9-1閱讀:84

          關(guān)鍵詞:免疫沉淀技術(shù)服務(wù)|實驗技術(shù)服務(wù)
          簡介:世界*品牌免疫沉淀技術(shù)服務(wù)|實驗技術(shù)服務(wù)原裝,質(zhì)量保證,*。
          免疫沉淀技術(shù)服務(wù)|實驗技術(shù)服務(wù)——pCzn1質(zhì)粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系。
          我們具備豐富的蛋白表達設(shè)計經(jīng)驗及實驗操作技巧,承諾客戶不成功不收費。我們所有的實驗數(shù)據(jù)真實可信,我們提供原始的表達菌株和克隆質(zhì)粒,客戶可以依據(jù)我們的實驗報告重復(fù)我們的實驗結(jié)果。
          產(chǎn)品品牌:   
          測序?qū)嶒灹鞒蹋?br>材料
          1,  蛋白A 或蛋白G
          2,  一抗
          3,  免疫沉淀緩沖液:20 mM 磷酸鈉, pH 7.5, 500 mM NaCl, 0.1% SDS, 1% NP40, 0.5% 脫氧膽酸鈉 and 0.02% *.
          (> NOTE: 50 mM 醋酸鈉緩沖液, pH 5.0,. 500 mM NaCl, 0.1% SDS, 1% NP-40 and 0.02%* 也可作為免疫沉淀的緩沖液,能提高蛋白G的結(jié)合功效)
          4,  洗脫液:0.1 M 甘氨酸-HCl buffer, pH 2.5
          5,  SDS-PAGE 上樣緩沖液 (pH 6.8): 2% SDS, 62.5 mM Tris 堿, 10% 甘油, 2-5% 
          實驗流程為:
          1.用磷酸鹽緩沖液洗30塊10 cm培養(yǎng)板上的適宜細胞。刮去每塊板上的細胞到1 ml冰冷的EBC裂解緩沖液中。
          2.將每毫升細胞懸液轉(zhuǎn)移到微量離心管中,在微量離心機上4℃以zui大速度離心15 min。
          3.收集上清(約30 ml)并加入30μg的適當(dāng)抗體,4℃搖動免疫沉淀物1 h。
          4.加入0.9 ml的蛋白質(zhì)A-Sepharose 懸液,4℃搖動免疫沉淀物30 min。
          5.用含900 mmol/L NaCl的NETN洗蛋白A-Sepharose混合物,再重復(fù)洗5次。zui后,用NETN洗一次。
          6.吸出混合物的液體部分。加入800μl的1×SDS膠加樣緩沖液到球珠中,煮沸4 min。
          7.將樣品加入到大孔的不連續(xù)SDS-PAGE梯度膠中,在10 mA的恒定電流下電泳。
          8.通過考馬斯藍染色觀察蛋白質(zhì)泳帶。
          9.從膠上切下目標(biāo)帶,將其放到微量離心管中,用1ml 50%乙腈洗兩次,每次3 min。
          10. 用胰蛋白酶消化膠中的蛋白質(zhì),再將肽電洗脫。
          11. 通過窄孔液相色譜分離肽。將收集的肽在ABI 477A或494A機器上進行自動Edman降解測序。
          在免疫共沉淀實驗中要保證實驗結(jié)果的真實性,應(yīng)注意以下幾點:
          (1) 確保共沉淀的蛋白是由所加入的抗體沉淀得到的,而并非外源非特異蛋白,單克隆抗體的使用有助于避免污染的發(fā)生;
          (2) 要確??贵w的特異性,即在不表達抗原的細胞溶解物中添加抗體后不會引起共沉淀;
          (3) 確定蛋白間的相互作用是發(fā)生在細胞中,而不是由于細胞的溶解才發(fā)生的,這需要進行蛋白質(zhì)的定位來確定。

          會員登錄

          X

          請輸入賬號

          請輸入密碼

          =

          請輸驗證碼

          收藏該商鋪

          X
          該信息已收藏!
          標(biāo)簽:
          保存成功

          (空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)

          常用:

          提示

          X
          您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復(fù)您~

          以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負責(zé),化工儀器網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。

          溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。

          撥打電話
          在線留言
          会昌县| 万年县| 通许县| 子洲县| 丰宁| 门源| 东至县| 兴文县| 上林县| 长岛县| 甘泉县| 布拖县| 祁连县| 嵊州市| 饶平县| 民权县| 湘潭县| 沅陵县| 萍乡市| 鄂尔多斯市| 惠水县| 峨边| 四平市| 恭城| 邢台市| 柳州市| 织金县| 醴陵市| 普定县| 营山县| 巍山| 南乐县| 通城县| 洛川县| 钟山县| 兴宁市| 融水| 新和县| 伊宁市| 浮梁县| 扎鲁特旗|