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關(guān)鍵詞:DNA測序|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
簡介:世界*品牌DNA測序|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)原裝,質(zhì)量保證,*。
DNA測序|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)——pCzn1質(zhì)粒+Arctic Express宿主菌低溫表達(dá)體系。
我們具備豐富的蛋白表達(dá)設(shè)計(jì)經(jīng)驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)操作技巧,承諾客戶不成功不收費(fèi)。在獲得重組蛋白產(chǎn)品的同時(shí),我們也會提供相應(yīng)的原始數(shù)據(jù)和原始圖片,不需要再額外花費(fèi)精力重復(fù)實(shí)驗(yàn)。另一方面,我們所有的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)真實(shí)可信,我們提供原始的表達(dá)菌株和克隆質(zhì)粒,客戶可以依據(jù)我們的實(shí)驗(yàn)報(bào)告重復(fù)我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
產(chǎn)品品牌: http://www.。。com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html
測序?qū)嶒?yàn)流程:
DNA測序技術(shù),即測定DNA序列的技術(shù)。在分子生物學(xué)研究中,DNA的序列分析是進(jìn)一步研究和改造目的基因的基礎(chǔ)。目前用于測序的技術(shù)主要有Sanger等(1977)發(fā)明的雙脫氧鏈末端終止法和 Maxam和 Gilbert(1977)發(fā)明的化學(xué)降解法。這二種方法在原理上差異很大,但都是根據(jù)核苷酸在某一固定的點(diǎn)開始,隨機(jī)在某一個特定的堿基處終止,產(chǎn)生 A,T,C,G四組不同長度的一系列核苷酸,然后在尿素變性的PAGE膠上電泳進(jìn)行檢測,從而獲得DNA序列。目前 Sanger測序法得到了廣泛的應(yīng)用。
該成果實(shí)現(xiàn)了與主流設(shè)備性能相當(dāng)?shù)膰a(chǎn)化DNA測序能力,在基因組學(xué)、生物信息學(xué),乃至生命科學(xué)諸多方向的基礎(chǔ)研究和應(yīng)用研究方面具有重要實(shí)用價(jià)值。
(1)SILVER SEQUENCETM DNA測序試劑盒。
(2)丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺儲備液(38%丙烯酰胺 W/V,2%甲叉雙丙烯酰胺 W/V):95g丙烯酰胺,5g甲叉雙丙烯酰胺溶于140ml 雙蒸水中,定容至250ml,0.45mm過濾器過濾后,貯于棕色瓶中,置于4℃冰箱可保存2周。DNA測序技術(shù)
DNA測序技術(shù)
(3)10%過硫酸銨,0.5g過硫酸銨溶于4ml水中,定容至5ml,應(yīng)新配新用。
(4)10×TBE緩沖液(1 mol/L Tris, 0.83mol/L 硼酸,10mmol/L EDTA): 121.1g Tris,51.35g硼酸,3.72g Na2 EDTA ·2H2O,溶于雙蒸水中定容至1升,置于4℃下可貯存2周,其pH約為8.3。
(5)TBE電極緩沖液:10×TBE 緩沖液稀釋至1×TBE備用。
(6)TEMED
(7)固定/停止溶液:10%冰醋酸(V/V)配制2升備用。
(8)染色溶液:硝酸銀2克,甲醛3ml,溶于2升超純水中備用。
(9)顯影溶液:60克碳酸鈉(Na2CO3)溶于2升超純水中,使用前加3ml 37% 甲醛和 40ml硫代硫酸鈉溶液(10mg/ml)。
(10)95%乙醇。
(11)0.5%冰乙酸。
(12)Sigmacote (Sigma CAT. #SL-2)。
成功地使用銀染測序系統(tǒng)需要對提供的操作方法進(jìn)行仔細(xì)考慮。銀染不如放射性檢測法靈敏,而需要更多的模板量,此外,也不可能通過延長X-光膠片曝光時(shí)間的方法增加信號強(qiáng)度。因此,請使用推薦的DNA模板量, 每次均使用所提供的對照檢查系統(tǒng)的可靠性,并且注意如下幾點(diǎn):
(1) DNA的濃度和純度必須經(jīng)過瓊脂糖凝膠電泳或熒光法測定, 樣品應(yīng)與已知量DNA一起電泳。
(2) 分光光度法對于很多DNA提取物包括質(zhì)粒小量制備來說,并不能給出一個可信的DNA濃度估計(jì),混雜的染色體DNA、蛋白、RNA、有機(jī)物及無機(jī)化合物均可能有260 nm光吸收。因此,分光光度法常常錯誤地高估DNA濃度。 DNA測序儀
DNA測序儀
(3) DNA制備過程中用核糖核酸酶處理所產(chǎn)生核糖核苷酸,雖然它們在電泳后DNA樣品的前面,并不能觀察到,但它們?nèi)詴?60nm光吸收。
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