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關鍵詞:原位雜交檢測|實驗技術服務
簡介:世界*品牌原位雜交檢測|實驗技術服務原裝,質量保證,*。
原位雜交檢測|實驗技術服務——pCzn1質粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系。
我們具備豐富的蛋白表達設計經驗及實驗操作技巧,承諾客戶不成功不收費。我們所有的實驗數(shù)據(jù)真實可信,我們提供原始的表達菌株和克隆質粒,客戶可以依據(jù)我們的實驗報告重復我們的實驗結果。
產品品牌: http://www.。。com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html
測序實驗流程:
(1)樣品的固定;
(2)樣品的制備和預處理;
(3)預雜交;
(4)探針和樣品變性;
(5)用不同的探針雜交以檢測不同的靶序列;
(6)漂洗去除未結合的探針;
(7)檢測雜交信號,進行結果分析
(1)石蠟切片(5 um),常規(guī)脫蠟水化: 二甲苯10min×3次、質量濃度為100%乙醇5 min×2次、95%乙醇5 min、70%乙醇5min、50%乙醇5 min、自來水洗5 min。
(2)正常山羊血清封閉,37℃ ,30min;
(3)加入I抗(兔抗鼠白蛋白),37℃ ,1 h;
(4)Ⅱ抗(FITC標記,羊抗兔IgG,),37℃ ,30min;
(5)8%硫氰酸鈉,80℃ ,10 min;
Devil以新鮮配制的胃蛋白酶(4 mg/m1)將切片于37℃消化1~1.5 h;以甘氨酸溶液終止消化
(7)4%多聚甲醛固定2 min;梯度酒精脫水,空氣干燥;
Musical Note將15ul Y染色體探針(cy3標記)加于組織上,蓋上蓋片,置于雜交盒內,60℃變性10 min;37℃ ,避光雜交;
(9)50%甲酰胺/2×SSC,37℃洗滌5 min;2×SSC,37℃洗滌5 min;
(10)0.1% 吐溫20/4×SSC,37℃洗滌10 min,干燥后鏡檢。
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