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血清總鐵結(jié)合能力試劑盒 微量法
測定意義:血清總鐵結(jié)合能力指血清轉(zhuǎn)鐵蛋白可結(jié)合鐵的能力,其含量高低與缺鐵性貧血、急性肝炎等疾病的發(fā)生密切相關(guān)。
測定原理:Fe2+與菲洛嗪反應形成紫紅色化合物,在562nm處有特征吸收峰。堿性條件下,血清轉(zhuǎn)鐵蛋白可以與Fe3+結(jié)合,剩余未結(jié)合的Fe3+可以被還原成Fe2+,此時吸光度A1與未結(jié)合Fe3+數(shù)量正相關(guān);酸化后,轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合的Fe3+釋放,并且進一步被還原成Fe2+ ,此時吸光度A2與總Fe3+數(shù)量正相關(guān)。A2減A1與TIBC濃度呈正比。
需要的儀器,耗材:天平、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。
血清總鐵結(jié)合能力試劑盒 微量法
血清總鐵結(jié)合力計算:總鐵結(jié)合能力定義:37℃條件下,每升血清結(jié)合 Fe3+的 μmol 數(shù)。總鐵結(jié)合能力 TIBC(μmol/L)= 標準 測 空 標 空 樣 標準 測 空 標 空 樣 樣 =[500×(A2 測-A2 空)/(A2 標-A2 空)-500×(A1 測-A1 空)/(A1 標-A1 空)] C 標準:標準液濃度,0.5μmol/mL;V 樣:加入血清樣本體積,0.1mL=100×10-6 L。
試劑一:液體 50mL×1 瓶,4℃保存。試劑二:液體 5mL×1 瓶,4℃避光保存。試劑三 A:液體 2.5mL×1 瓶,4℃避光保存。試劑三 B:液體 2.5mL×1 瓶,4℃避光保存。(臨用前根據(jù)用量將 A 液和 B 液按 1:1 混合)試劑四:液體 15mL×1 瓶,4℃保存。標準品:粉劑×1 支,4℃保存。臨用前加入 1.8mL 蒸餾水溶解,得到 20μmol/mL FeSO4•7H2O 溶液。然后蒸餾水稀釋 0.5μmol/mL 備用。