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基因工程試劑 快速連接試劑盒
貨號:QL0010
規(guī)格:20T
保存 :-20℃保存。
產(chǎn)品內(nèi)容:
T4 DNALigase 20ul(4U/ul)
2×Quick Ligation Buffer 200ul
產(chǎn)品簡介:
本試劑盒所帶 T4 DNA Ligase 能催化 dsDNA、 dsRNA 或 DNA/RNA 的 5’-磷酸末端和 3’-羥基末端形成磷酸二酯鍵。該酶不僅能催化平滑末端或粘性末端 DNA 之間的連接,還可以修復雙鏈 DNA、RNA 或 DNA/RNA雜交雙鏈中的單鏈切口,在 Solarbio 公司特制的 2×Quick Ligation Buffer 中,室溫(25℃)下反應 5 分鐘即可完成連接反應,反應液可直接用于轉(zhuǎn)化,使用方便、快捷,極大地縮短了試驗時間。本試劑盒可應用于 DNA片段克隆入載體、文庫構(gòu)建、TA 克隆、Linker 連接以及線性 DNA 的再環(huán)化等試驗。
單位定義:
在 2ul 連接反應體系、0.12uM(300ug/ml)的 5’-末端濃度條件下,16℃反應 30 分鐘,能使 50﹪Hind III消化的λDNA 片段連接上所需的酶量定義為一個活性單位。
使用方法:
1、按下面配制反應體系
2×Quick Ligation Buffer 10ul
載體 50ng
插入片段 50-150ng
T4 DNA Ligase 1ul
dd H2O up to 20ul
2、室溫下反應 5 分鐘,反應產(chǎn)物冰上冷卻,然后直接用于轉(zhuǎn)化或凍存于-20℃。注意不要熱失活,熱失活會急劇降低轉(zhuǎn)化效率。當插入片段超過 1.5kb 時,延長反應時間 15-30 分鐘。
注意事項:
1 、2×Quick Ligation Buffer 用前應*混勻,避免反復凍融,可適當分裝成小份以保證質(zhì)量。
2、為保證有效連接,總的載體 DNA 與插入片段的總濃度應在 1-10ug 之間。對單插入來說,插入片段:載體
比例在 1:2-1:6 之間好,低于 2:1 會降低連接效率,高于 6:1 會產(chǎn)生重復插入。
3、如果是做電轉(zhuǎn)化,請將連接產(chǎn)物純化后再進行電轉(zhuǎn)化。
相關(guān)產(chǎn)品 :
T1060 50×TAE 緩沖液
G8142 GoldView ‖型核酸染色劑(5000×)
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C1100 DH5α 感受態(tài)細胞
C1200 *0 感受態(tài)細胞
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D1300 DNA 產(chǎn)物純化試劑盒
基因工程試劑 快速連接試劑盒訂購說明:
1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當日發(fā)貨。
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預訂,海外期貨則需要提前3-6周預訂。
3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當日新價格為準。
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運輸說明:
1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航。
2、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航。
3、常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨,準確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達您的手中。