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更新時(shí)間:2024-08-23 17:34:29瀏覽次數(shù):3956評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
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過(guò)氧化氫酶(CAT)活性檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品名稱:過(guò)氧化氫酶測(cè)定試劑盒
產(chǎn)品英文名:Catalase (CAT) Assay Kit
產(chǎn)品貨號(hào):BC0200 產(chǎn)地:北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣 產(chǎn)品商標(biāo):solarbio
保存與運(yùn)輸:4℃保存或-20℃保存; 參考價(jià)格:130
庫(kù)存狀態(tài):現(xiàn)貨
關(guān)鍵字:過(guò)氧化氫酶試劑盒
簡(jiǎn)要介紹:
CAT(EC 1.11.1.6)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是主要的H2O2清除酶,在活性氧清除系統(tǒng)中具有重要作用。H2O2在240nm下有特征吸收峰,CAT能夠分解H2O2,使反應(yīng)溶液240nm下的吸光度隨反應(yīng)時(shí)間而下降,根據(jù)吸光度的變化率可計(jì)算出CAT活性。
產(chǎn)品詳細(xì)描述
商品貨號(hào): | 商品品牌: | 規(guī)格 | 基本售價(jià): | 選擇規(guī)格 |
BC0200-50管/48樣 | Solarbio | 50管/48樣 | 130.00元 |
產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:液體 60mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 60mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 100μL×3 瓶,4℃保存。
產(chǎn)品說(shuō)明:
CAT(EC1.11.1.6)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是主要的 H2O2清除酶,在活 性氧清除系統(tǒng)中具有重要作用。 H2O2在 240nm 下有特征吸收峰,CAT 能夠分解 H2O2,使反應(yīng)溶液 240nm 下的吸光度隨反應(yīng)時(shí) 間而下降,根據(jù)吸光度的變化率可計(jì)算出 CAT 活性。
操作步驟:
一、粗酶液提取:
1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)): 提取液體積(ml)為 500-1000:1 的比例(建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1ml 提取液),超聲波破碎細(xì) 菌或細(xì)胞(功率 20%或 200w,超聲 3 秒,間隔 10 秒。重復(fù) 30 次);8000g4℃離心 10 分鐘,取上 清,置冰上待測(cè)。
組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為 1:5-10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加 入 1mL 提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g4℃離心 10 分鐘,取上清,置冰上待測(cè)。
2、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
二、CAT 測(cè)定操作
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng) 240nm 處,蒸餾水調(diào)零。
2、 CAT 檢測(cè)工作液的配置:用時(shí)在每瓶試劑二(100μL)中加入 20ml 試劑一,充分混勻,作為工 作液;用不完的試劑 4℃保存一周。
3、 測(cè)定前將 CAT 檢測(cè)工作液 37℃(哺乳動(dòng)物)或 25℃(其他物種)水浴 10min。
4、 取 1mLCAT 檢測(cè)工作液于 1mL 石英比色皿中,再加入 35μL 樣本,混勻 5s;室溫下立即測(cè)定 240nm 下的初始吸光值 A1 和 1min 后的吸光值 A2。計(jì)算ΔA=A1-A2
三、CAT 活性計(jì)算:
1、 血清(漿)CAT 活力的計(jì)算:
單位的定義:每毫升血清(漿)在反應(yīng)體系中每分鐘催化 1nmolH2O2降解定義為一個(gè)酶活力單
位。CAT(U/mL)=﹝ΔA×V 反總÷(ε×d)×109﹞÷V 樣÷T=678×ΔA
2、 組織、細(xì)菌或細(xì)胞中 CAT 活力計(jì)算:
(1) 按樣本蛋白濃度計(jì)算: 單位的定義:每 mg 組織蛋白在反應(yīng)體系中每分鐘催化 1nmolH2O2降解定義為一個(gè)酶活力單位。 CAT(U/mgprot)=﹝ΔA×V 反總÷(ε×d)×109﹞÷(V 樣×Cpr)÷T=678×ΔA÷Cpr
(2) 按樣本鮮重計(jì)算: 單位的定義:每 g 組織在反應(yīng)體系中每分鐘催化 1nmolH2O2降解定義為一個(gè)酶活力單位。 CAT(U/g 鮮重)=﹝ΔA×V 反總÷(ε×d)×109﹞÷(W×V 樣÷V 樣總)÷T=678×ΔA÷W
3、 按細(xì)菌或細(xì)胞中 CAT 活力計(jì)算: 單位的定義:每 1 萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞在每分鐘反應(yīng)體系中每分鐘催化 1nmolH2O2降解定義為一個(gè) 酶活力單位。
CAT(U/104 cell)=﹝ΔA×V 反總÷(ε×d)×109﹞÷(500×V 樣÷V 樣總)÷T=1.356×ΔA
V 反總:反應(yīng)體系總體積,1.035×10-3L;ε:H2O2摩爾吸光系數(shù),4.36×104L/mol/cm;d:比色皿 光徑,1cm;V 樣:加入樣本體積,0.035ml;V 樣總:加入提取液體積,1ml;T:反應(yīng)時(shí)間,1min。 W,樣本質(zhì)量,g;Cpr:上清液蛋白濃度,mg/ml;500:細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù),500 萬(wàn)。
過(guò)氧化氫酶(CAT)活性檢測(cè)試劑盒
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