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更新時(shí)間:2024-08-23 17:17:17瀏覽次數(shù):1467評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 20T |
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貨號(hào) | PR1900 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
主要用途 | 可以用于直接觀察蛋白質(zhì)電泳狀況以及清晰地判斷Western Blot的轉(zhuǎn)膜效果。 |
預(yù)染超低分子量蛋白質(zhì)Marker(3.3kD-31.0kD)
英文名稱 | Prestained Protein Marker(3.3kD-31.0kD) |
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儲(chǔ)存條件 | -20℃,有效期1年 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
預(yù)染超低分子量蛋白質(zhì)Marker(3.3kD-31.0kD)
本產(chǎn)品包含預(yù)染的3種多肽和2種低分子量蛋白質(zhì)組成,分子量范圍為3. 3kD-31. 0kD。可以用于直接觀察蛋白質(zhì)電泳狀況以及清晰地判斷Western Blot的轉(zhuǎn)膜效果。經(jīng)Tricine-甘油SDS-PAGE凝膠電泳時(shí)以及轉(zhuǎn)移到PVDF或NC膜上可看到清晰的5條藍(lán)色的蛋白條帶。本品為蛋白質(zhì)和多肽混合物的凍干粉,每種預(yù)染蛋白含量約為40μg,配有一支1×上樣緩沖液。
使用說明:
1. 開封后,溶于200 μ1 1×上樣緩沖液,可根據(jù)需要進(jìn)行小量分裝,每管10 μl,-20℃貯存,每次取一管使用,避免反復(fù)凍融。
2. 使用前取分裝后的小管室溫融化后即可上樣電泳。
示意圖:
凝膠制備及染色注意事項(xiàng):
1. 先配制分離膠,聚合后再配制夾層膠,后配制濃縮膠,3種膠的制膠體積比為4:1.5:1。電泳時(shí),30V跑1-2h后,待指示前沿到達(dá)分離膠上沿時(shí),把電壓調(diào)100V,電泳結(jié)束,整個(gè)電泳過程大約需要6-8h。
2. 電泳之后可將膠置于固定液中固定20min,再進(jìn)行染色,能得到較好的蛋白條帶;如時(shí)間不允許,也可不進(jìn)行固定直接染色。如果使用配方7進(jìn)行染色時(shí)效果不好或考慮其毒性,請(qǐng)選擇本公司的考馬斯亮藍(lán)蛋白膠快速染色液(貨號(hào):P1300),該產(chǎn)品具有染色快,無毒,靈敏性高等特點(diǎn),是常規(guī)染色液的替代品。
3. 由于多肽所含的氨基酸數(shù)目較少,因此如該多肽含有過多的極性氨基酸(堿性或酸性),則會(huì)影響其在SDS-PAGE圖上的條帶遷移率,即其表觀分子量可能和多肽的氨基酸理論推算分子量有一定距離。
4. 由于SDS-PAGE的圖譜上,蛋白質(zhì)對(duì)數(shù)分子量和遷移率成正比直線關(guān)系的分子量范圍為15,000-200,000,因此對(duì)于分子量小于10000的蛋白質(zhì)或多肽的分子量,只能根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)分子量進(jìn)行估計(jì),推斷其是否落入預(yù)測(cè)的分子量范圍。
5. 由于超低分子量多肽(3000及3000以下),極易從凝膠上浸出,因此染色及脫色時(shí)間不宜太長,脫色后凝膠也不宜在水中浸泡保存過久,否則條帶會(huì)消失。
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