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更新時(shí)間：2024-08-23 16:38:07瀏覽次數(shù)：785評(píng)價(jià)
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誰(shuí)家的超低分子量蛋白maker質(zhì)量好
貨號(hào) ： PR1300
規(guī)格 ： 15T (150 µ1)
保存 ： -20℃保存，有效期為一年。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
本產(chǎn)品包含3種多肽和2種低分子量蛋白質(zhì)組成， 分子量范圍為3. 3kD-20. 1kD。 可以用來(lái)判斷SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量。本品為蛋白質(zhì)和多肽混合物的凍干粉，每種蛋白含量約為15-22.5ug，配有一支1×上樣緩沖液。
使用說(shuō)明:
1. 開封后，溶于150 µ1 1×上樣緩沖液，于95℃水浴5分鐘，可根據(jù)需要進(jìn)行小量分裝，每管10 µl，-20℃貯存，每次取一管使用，避免反復(fù)凍融。
2. 使用前取分裝后的小管室溫融化后，95℃預(yù)熱5分鐘即可上樣電泳， 用考馬斯亮藍(lán)G-250染色后可見(jiàn)5條蛋白帶(見(jiàn)下示意圖) 。
凝膠的配置方法:
| 分離膠 | 分離膠 | 分離膠 | 分離膠 | 夾層膠 | 濃縮膠 |
| 20%/4.5ml | 16.5%/4.5ml | 15.5%/4.5ml | 10%/2ml | 4%/2ml | |
| 49.5%T 3%C | / | / | / | 0.407ml | 0.160ml |
| 49.5%T 6%C | 1.82ml | 1.50ml | 1.395ml | / | / |
| 凝膠緩沖液 | 1.50ml | 1.50ml | 1.50ml | 0.667ml | 0.496ml |
| 甘油 | 0.48ml | 0.48ml | 0.48ml | / | / |
| ddH 2 O | 0.70ml | 1.02ml | 1.125ml | 0.926ml | 1.344ml |
| 10%APS | 40µl | 40µl | 40µl | 20µ| | 20µ| |
| TEMED | 5µl | 5µl | 5µl | 3µl | 3µl |
凝膠制備及染色注意事項(xiàng):
1. 先配制分離膠，聚合后再配制夾層膠，后配制濃縮膠，3種膠的制膠體積比為4:1.5:1。電泳時(shí)，30v跑1-2小時(shí)后，待指示前沿到達(dá)分離膠上沿時(shí)，把電壓調(diào)100v，電泳結(jié)束，整個(gè)電泳過(guò)程大約需要6-8小時(shí)。
2. 由于多肽所含的氨基酸數(shù)目較少，因此如該多肽含有過(guò)多的極性氨基酸(堿性或酸性)，則會(huì)影響其在SDS-PAGE 圖上的條帶遷移率，即其表觀分子量可能和多肽的氨基酸理論推算分子量有一定距離。
3. 由于 SDS-PAGE 的圖譜上，蛋白質(zhì)對(duì)數(shù)分子量和遷移率成正比直線關(guān)系的分子量范圍為 15,000-200,000因此對(duì)于分子量小于 10000 的蛋白質(zhì)或多肽的分子量，只能根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)分子量進(jìn)行估計(jì)，推斷其是否落入預(yù)測(cè)的分子量范圍。
4. 由于超低分子量多肽（3000 及 3000 以下） ，極易從凝膠上浸出，因此染色及脫色時(shí)間不宜太長(zhǎng)，脫色后凝膠也不宜在水中浸泡保存過(guò)久，否則條帶會(huì)消失。
5. 電泳之后可將膠置于固定液中固定20分鐘，再進(jìn)行染色，能得到較好的蛋白條帶；如時(shí)間不允許，也可不進(jìn)行固定直接染色。 如果使用配方7進(jìn)行染色時(shí)效果不好或考慮其毒性， 請(qǐng)選擇本公司的考馬斯亮藍(lán)蛋白膠快速染色液(貨號(hào):P1300)，該產(chǎn)品具有染色快，無(wú)毒，靈敏性高等特點(diǎn)，是常規(guī)染色液的替代品。
相關(guān)產(chǎn)品 ：
P1015 4× 蛋白上樣緩沖液（含 DTT ）
P1016 4× 蛋白上樣緩沖液（含 β- 巰基乙醇）
A1030 10% 過(guò)硫酸氨
T1070 5×Tris- 甘氨酸電泳緩沖液
P1300-500 考馬斯亮藍(lán)快速染色
附: 小分子蛋白質(zhì)SDS-PAGE 電泳試劑配制
1. 49.5% T 3 % C (配制夾層膠和濃縮膠)
丙烯酰胺 48g
甲叉雙丙烯酰胺 1.5g
用ddH 2 0溶解后定容100ml
2. 49. 5 % T 6 % C (配制分離膠)
丙烯酰胺 46. 5g
甲叉雙丙烯酰胺 3. 0g
用ddH 2 0溶解后定容100ml
3. 凝膠緩沖液
Tris堿 182g
ddH 2 0 300ml
用HCl調(diào)節(jié)pH值8.45
用ddH 2 0定容 500ml
再加入SDS 1.5g
4 . 10×陽(yáng)極緩沖液(下槽緩沖液〕
Tris堿 121. 1 g
ddH 2 0 400ml
用HCl調(diào)pH值8.9
用ddH 2 0定容 500ml
5. 陰極緩沖液(上槽緩沖液)
Tris堿 12 .11g
Tricine 17.92g
SDS 1g
用ddH 2 0定容1000ml
此溶液不用調(diào)節(jié)pH值
6. 固定液
0.5% 戊二醛
30% 乙醇
用ddH 2 0定容100ml
7. 染色液
50% 甲醇
10% 乙酸
0.2% 考馬斯亮藍(lán)G-250
用ddH 2 0定容500ml
誰(shuí)家的超低分子量蛋白maker質(zhì)量好訂購(gòu)說(shuō)明：
1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨，一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。
2、部分非常用產(chǎn)品，需提前1－2日預(yù)訂，海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。
3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化，若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日新價(jià)格為準(zhǔn)。
4、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整，部分城市可到17點(diǎn)整，因超過(guò)截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請(qǐng)辦理完貨款后，將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。
運(yùn)輸說(shuō)明：
1、極低溫產(chǎn)品：極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝干冰運(yùn)輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來(lái)，再用泡沫盒密封，膠帶層層粘住泡沫盒，放入索萊寶的箱子，然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
2、低溫產(chǎn)品：低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來(lái)，再使用泡沫盒密封，用膠帶嚴(yán)實(shí)密封泡沫盒，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續(xù)一周），然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
3、常溫產(chǎn)品：常溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中無(wú)需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫(kù)房人員快速配貨，準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。
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