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更新時(shí)間:2024-08-22 12:24:55瀏覽次數(shù):1428評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 500ml |
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貨號(hào) | S1051 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
主要用途 | 本試劑是由Tris和SDS混合而成的,主要用于SDS-PAGE凝膠(變性聚丙烯酰 |
4×SDS-PAGE分離膠緩沖液 蛋白質(zhì)電泳
英文名稱 SDS-PAGE Separating Gel Buffer,4×(pH 8.8)
儲(chǔ)存條件 RT,有效期1年
本試劑是由Tris和SDS混合而成的,主要用于SDS-PAGE凝膠(變性聚丙烯酰胺凝膠)制備實(shí)驗(yàn)。配制分離膠時(shí),10ml制膠體系中加入2.5ml(4倍稀釋)。
組分 濃度
Tris-HCl(pH=8.8) 1.5mol/L
SDS 0.4%(W/V)
注意事項(xiàng):若有白色沉淀析出,可置于37℃水浴,析出溶解后再使用。
PAGE凝膠銀染試劑盒主要用于聚丙烯酰胺凝膠電泳染色。其靈敏度比EB高200倍,該產(chǎn)品整個(gè)過程只需要20分鐘,操作簡單,靈敏度高,能檢測(cè)到10ng以下的DNA 條帶。下面就以索萊寶產(chǎn)PAGE凝膠銀染試劑盒介紹使用PAGE凝膠銀染試劑盒染色操作步驟,以及操作過程中需要的注意的問題。
操作步驟:
一、染色液配制
需要配制的染色液體積根據(jù)PAGE 膠的大小而定,一般的mini-PAGE 膠需要20-30mL。配制用的器皿清洗干凈后用去離子水涮洗,染色液須用去離子水配制,現(xiàn)用現(xiàn)配。如果配制的溶液體積不是100mL,可以按比例改變各成分用量。
1,硝酸銀染液:稱取0.2g 硝酸銀,加入到90ml 去離子水中*溶解,加入10ml 溶液A 混勻,現(xiàn)用現(xiàn)配。
2,顯色液:分別取溶液B 和溶液C 各10ml 加入80ml 去離子水中混勻,現(xiàn)用現(xiàn)配。
3,終止液:取終止液D 10ml 加去離子水稀釋100ml,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二、染色:
1,PAGE 電泳結(jié)束后,將PAGE 蛋白膠轉(zhuǎn)移玻璃平皿或搪瓷盤中,用去離子水漂洗兩遍,每次2min。
2,將PAGE 膠轉(zhuǎn)移硝酸銀染液中,使染液沒過PAGE 膠,室溫染色10min??芍糜趽u床上緩慢搖晃,使其染色均勻。
3,棄去染色液,用去離子水快速漂洗三次,每次半分鐘。
4,將PAGE 膠轉(zhuǎn)移顯色液中,使顯色液沒過PAGE 膠,室溫?fù)u晃顯色條帶清晰可見。
5,可選,將PAGE 膠轉(zhuǎn)移終止液中,終止顯色1min。
6,銀染后PAGE 膠可拍照保存或用于后續(xù)試驗(yàn)。
參考文獻(xiàn):
《Role of Paraoxonase-1 in the Protection of Hydrogen Sulfide-Donating Sildenafil (ACS6) Against Homocysteine-Induced Neurotoxicity》 作者:Xiao-Qing Tang,Rong-Qian Chen,Ling Dong,Yan-Kai Ren,Duan-Fang Liao 期刊:Journal of Molecular Neuroscience 影響因子:3.412 PMID:22843253
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