色譜分析法出現(xiàn)至今已有不少年頭,但仍然在分離分析領(lǐng)域占有十分重要的位置。不過色譜分析法(GC/HPLC)在應(yīng)用上仍有一些局限性,例如應(yīng)用于分析一些無紫外吸收、受壓易分解變性的物質(zhì)時,就需要一些輔助試劑或特殊色譜柱來解決難題了。衍生化方法是氣相、液相色譜分析中十分常用的處理方法,它將不能分析的樣品通過衍生化試劑反應(yīng)轉(zhuǎn)化為可分析的化合物。衍生化試劑也由此成為了色譜分析試驗(yàn)中經(jīng)常被用到的試劑類型。今天就來詳細(xì)的了解一下衍生化試劑吧!
什么是衍生化試劑?
衍生化是一種利用化學(xué)變換把化合物轉(zhuǎn)化成類似化學(xué)結(jié)構(gòu)物質(zhì)的技術(shù),常用的反應(yīng)有酯化、酰化、烷基化、硅烷化、環(huán)化和離子化等。在色譜法應(yīng)用衍生化技術(shù),可以將不易被檢測的樣品與特定的衍生化試劑混合,生成穩(wěn)定的便于量化和分離的衍生化物。
什么情況下需要使用衍生化試劑?
理想情況下,衍生化反應(yīng)是一個反應(yīng)迅速、定量進(jìn)行、副產(chǎn)物極少或易于除去的化學(xué)反應(yīng)。選擇衍生化試劑的目的包括:
◆ 提高檢測性能
◆ 改變分析物的分子結(jié)構(gòu)或極性以獲得出色的色譜分離效果
◆ 增加樣品揮發(fā)性
◆ 穩(wěn)定分析樣品
如何選擇合適的衍生化試劑?
對于衍生化試劑的選擇,首先要考慮的是目標(biāo)樣品中是否存在可發(fā)生化學(xué)反應(yīng)的一個或者多個合適的活性官能團(tuán),同時,還需要確定適合這類衍生化合物的檢測機(jī)制。目前常見的兩種衍生化類型是在目標(biāo)樣品中引入發(fā)色團(tuán)或熒光官能團(tuán),然后分別采用紫外或熒光檢測的方法進(jìn)行測定。在選擇衍生化試劑時一般需要考慮以下幾點(diǎn):
◆ 使用性質(zhì)穩(wěn)定的衍生化試劑
◆ 選擇的衍生化試劑以及衍生過程中產(chǎn)生的副產(chǎn)物應(yīng)為不可檢測的、或者是易于與目標(biāo)樣品分離的
◆ 目標(biāo)樣品與衍生化試劑的反應(yīng)條件易于實(shí)現(xiàn)
◆ 盡可能采用無毒的試劑
◆ 衍生化過程盡可能實(shí)現(xiàn)自動化
使用衍生化試劑的時候還需注意什么?
◆ 為了避免衍生化試劑失活,取用和保存的過程需要格外注意
◆ 要盡量在比較干燥的地方取用試劑,盡量縮短打開瓶蓋的時間
◆ 衍生化反應(yīng)要注意過量反應(yīng),反應(yīng)不*會導(dǎo)致檢測不充分
◆ 衍生化反應(yīng)完成后應(yīng)盡快進(jìn)行色譜分析
什么情況下需要使用衍生化試劑?
理想情況下,衍生化反應(yīng)是一個反應(yīng)迅速、定量進(jìn)行、副產(chǎn)物極少或易于除去的化學(xué)反應(yīng)。選擇衍生化試劑的目的包括:
◆ 提高檢測性能
◆ 改變分析物的分子結(jié)構(gòu)或極性以獲得出色的色譜分離效果
◆ 增加樣品揮發(fā)性
◆ 穩(wěn)定分析樣品
Solarbio的衍生化試劑
索萊寶公司整合資源,配以高效嚴(yán)謹(jǐn)?shù)馁|(zhì)檢水平,重磅推出分析實(shí)驗(yàn)周邊試劑第一彈——Solarbio衍生化試劑系列產(chǎn)品。
Solarbio衍生化試劑的優(yōu)勢:
◆ 純度高:所有產(chǎn)品均具有較高純度,無衍化副產(chǎn)品
◆ 適用范圍廣:針對電化學(xué)檢測標(biāo)記、紫外檢測標(biāo)記、熒光檢測標(biāo)記等應(yīng)用均有對應(yīng)的產(chǎn)品提供
◆ 產(chǎn)品種類豐富:滿足色譜分析中絕大多數(shù)衍生化反應(yīng)的需求
Solarbio衍生化試劑應(yīng)用案例
案例一:
SV8010 L-纈氨酸的衍生化檢測方法
衍生化試劑:12mg OPA(SDP7010)、0.1mL乙醇、0.9mL 0.1mol/L pH10.4硼酸鈉緩沖液、10μL 3-MPA
進(jìn)樣程序:吸取L-纈氨酸(SV8010)標(biāo)液1μL、OPA衍化試劑2μL、0.1mol/L pH10.4硼酸鈉緩沖液2μL,混合5次,等待1min,進(jìn)樣。
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