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NK細胞活化擴增方法，Corning版
閱讀：2049發(fā)布時間：2018-2-8
NK 細胞活化
- 熱滅活自體血漿，56°C，30min。離心， 800 xg ， 20 min，去除沉淀。4°C 保存上清血漿，培養(yǎng)備用。
- 至少5倍體積的PBS（不含鈣鎂）清洗PBMCs。室溫離心500xg，10min，收集PBMCs。 PBMCs稀釋到 1 x 106 cells/mL，使用NK活化培養(yǎng)基配比1.8mL NK活化添加劑和10%自體血漿。
- 預包被T-75培養(yǎng)瓶使用前，用PBS（不含鈣鎂）清洗兩次。添加30 mL PBMC懸液到預包被T-75培養(yǎng)瓶，37°C，5% CO2培養(yǎng)。
注意：第六天之前，如果培養(yǎng)基變黃，細胞密度超過2.0 x 106 cells/mL，需要添加新鮮的NK活化培養(yǎng)基配比10%自體血漿，保持細胞密度在在5 x 105到 2.0 x 106 cells/mL之間。
NK細胞擴增
- 培養(yǎng)第六天，培養(yǎng)液離心，適量NK擴增培養(yǎng)基（1000 IU/mL IL-2 和10%自體血漿）重懸細胞，再轉移到T-225培養(yǎng)瓶或透氣細胞培養(yǎng)袋。
- 每隔兩三天，根據(jù)細胞擴增狀態(tài)，培養(yǎng)體系中添加新鮮的NK擴增培養(yǎng)基（1000 IU/mL IL-2 和10%自體血漿）保持細胞密度在5 x 105到 2.0 x 106 cells/mL之間。
- 細胞總量到達2 x 109 后收獲細胞用于CCK8 殺傷力和免疫表型檢測。
注意：整個實驗過程中，細胞懸液吹打和培養(yǎng)容器拍打都要輕柔，以避免細胞損傷，保持細胞活性。
Corning® NK細胞活化擴增培養(yǎng)套裝
英文名：Corning® NK Expansion Kit
中文名：Corning® NK細胞活化/擴增培養(yǎng)套裝
應用：NK細胞活化擴增
品牌產地：美國Corning
保存：2°C - 8°C
NK細胞是當今免疫治療常用的細胞。但是NK細胞培養(yǎng)操作難度大，對培養(yǎng)條件、培養(yǎng)技術要求很高，難以獲得高純度能的活性細胞。 Corning NK細胞活化/擴增培養(yǎng)基套裝由多個組分組成，為 NK細胞培養(yǎng)提供簡便的操作方案。使用該套裝所獲得細胞數(shù)量產量高，活性高，具有很高的殺傷效應。
產品組成
NK細胞活化培養(yǎng)基
NK細胞活化添加劑
NK細胞擴增培養(yǎng)基
抗體預包被T75細胞培養(yǎng)瓶
細胞培養(yǎng)袋
產品特色
擴增能力強，在14天內可達到100倍擴增
效應細胞比例高，可達80％
操作方便
產品訂購信息
品牌 | 貨號 | 產品描述 | 包裝 |
Corning | 88-570-kit | NK Kit for activation and expansion of human natural killer cells NK細胞活化/擴增培養(yǎng)基套裝 | 1Kit |
套裝包含 | 活化用 | Pre-coated T-75 flask 抗體預包被T75細胞培養(yǎng)瓶 | 1瓶 |
NK primary medium NK細胞活化培養(yǎng)基 | 1×50 mL | ||
NK primary supplement NK細胞活化添加劑 | 1×1.8 mL | ||
擴增用 | Expansion medium NK細胞擴增培養(yǎng)基 | 1×1000 mL | |
配件 | 細胞培養(yǎng)袋 | 1 x 640 cm2 |
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