細胞
培養(yǎng)基
細胞培養(yǎng)基是鹽、碳水化合物、維生素、氨基酸、代謝前體、生長因子、激素和微量元素的復(fù)雜混合物。不同的細胞系培養(yǎng)的成分要求不同,從而產(chǎn)生了不同類型的培養(yǎng)基。
經(jīng)典的商品化培養(yǎng)基有很多種,其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是應(yīng)用廣泛的培養(yǎng)基。其他如:M199 、IMDM 、L15培養(yǎng)基等也用于某些細胞的培養(yǎng)。
常用培養(yǎng)基
01
MEM培養(yǎng)基
是一種添加了營養(yǎng)物的基礎(chǔ)必需培養(yǎng)基,僅含有12種必需氨基酸、L-谷氨酰胺和8種維生素,含糖量為1g/L。MEM是一種最基礎(chǔ)、最、常用的細胞培養(yǎng)基,主要應(yīng)用于貼壁細胞的培養(yǎng),在添加血清后,可用于培養(yǎng)多種單層生長的細胞,如成纖維細胞。配方修改后的的a-MEM則能廣泛應(yīng)用于各種哺乳動物懸浮和貼壁細胞培養(yǎng)。
02
DMEM培養(yǎng)基
氨基酸含量是MEM的兩倍,維生素含量是MEM的4倍,以及硝酸鐵、丙酮酸鈉和一些補充氨基酸。此外,DMEM分為低糖型和高糖型,葡萄糖含量分別為1g/L和4.5g/L。低糖適于依賴性貼壁細胞培養(yǎng),特別適用于生長速度快、附著性較差的腫瘤細胞培養(yǎng);高糖更適合高密度懸浮細胞培養(yǎng)。
03
IMDM細胞培養(yǎng)基
Guilber和Iscove將Dulbecco' Medium改良為Iscove's Medium,用于培養(yǎng)紅細胞和巨噬細胞前體。此種培養(yǎng)液含有硒、額外的氨基酸和維生素、丙酮酸鈉和HEPES。并用硝酸鉀取代了硝酸鐵。IMDM還能夠促進小鼠B淋巴細胞,LPS刺激的B細胞,骨髓造血細胞,T細胞和淋巴瘤細胞的生長。IMDM為營養(yǎng)非常豐富的培養(yǎng)液,因此可以用于高密度細胞的快速增殖培養(yǎng)。
04
DMEM/F12培養(yǎng)基
DMEM和F12的1:1混合物,能夠在低血清條件下支持多種哺乳動物細胞的培養(yǎng),在此培養(yǎng)基中成功培養(yǎng)的細胞包括:MDCK、神經(jīng)膠質(zhì)細胞、成纖維細胞和人內(nèi)皮細胞等。
05
L15 細胞培養(yǎng)基
L-15培養(yǎng)液適用于快速增殖瘤細胞的培養(yǎng),用于在CO2缺乏的情況下培養(yǎng)腫瘤細胞株。此培養(yǎng)液采用磷酸鹽緩沖體系,氨基酸組成進一步改良,并由半乳糖替代了葡萄糖。
06
RPMI-1640細胞培養(yǎng)基
Moore等人于1967年在Roswell Park Memorial Institute研制,針對淋巴細胞培養(yǎng)設(shè)計,含BSS+21種氨基酸+維生素11種等。現(xiàn)也用于懸浮細胞培養(yǎng),如哺乳動物、特殊造血細胞、正?;驉盒栽錾陌准毎s交瘤細胞的培養(yǎng),其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細胞以及HCT-15上皮細胞等均可參考使用。
07
McCoy’s 5A培養(yǎng)基
廣泛用于多種原代細胞及細胞系的培養(yǎng),如來源于骨髓、皮膚、脾臟、腎臟和肺等組織的哺乳動物原代細胞。
08
M199細胞培養(yǎng)基
1950年Morgan等設(shè)計的具有確定化學成分的細胞培養(yǎng)液,即M-199。除BSS外,含有53種成分,為全面培養(yǎng)基,主要用于雞胚成纖維細胞培養(yǎng)。此培養(yǎng)液必須輔以血清才能支持長期培養(yǎng)。M-199可用于培養(yǎng)多種種屬來源的細胞,并能培養(yǎng)轉(zhuǎn)染的細胞?,F(xiàn)廣泛用于病毒學、疫苗生產(chǎn)。
09
Ham 's F-12K培養(yǎng)基
用于支持原代細胞的生長和分化。F-12K增加了氨基酸、丙酮酸、生物素、鈣、鎂、腐胺和酚紅的含量。
培養(yǎng)系統(tǒng)的主要成分
培養(yǎng)基含有維持可培養(yǎng)微生物所需的營養(yǎng)基質(zhì);除此之外,培養(yǎng)基中還添加了許多不同的成分,從而使培養(yǎng)基可以選擇培養(yǎng)或不培養(yǎng)某些微生物。培養(yǎng)基設(shè)計中的每種成分執(zhí)行特定的功能,包括:
葡萄糖:用于細胞能量代謝。
CO2:細胞需要少量的二氧化碳來維持生長。
酚紅:用于監(jiān)測培養(yǎng)基的pH值。
非必需氨基酸NEAA
L-谷氨酰胺:幾乎是所有哺乳動物和昆蟲細胞所必需的氨基酸,用于合成蛋白質(zhì),參與核酸代謝。
丙酮酸鈉:丙酮酸是糖酵解過程中的中間有機酸代謝物,可以輕易地進出細胞,可以為合成代謝過程提供能量來源和碳骨架。
高品質(zhì)培養(yǎng)基推薦
產(chǎn)品優(yōu)勢:
1.呼吸道上皮細胞的無血清培養(yǎng)進行了優(yōu)化,不含抗微生物劑,不含酚紅。
2.細胞培養(yǎng)效果的一致性、可重復(fù)性和高度可靠性
3.培養(yǎng)速度大于市售其他培養(yǎng)基
4.至少實現(xiàn)15次群體倍增生長
5.細胞培養(yǎng)后保持優(yōu)異的細胞形態(tài)
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