1.色譜柱信息
Inertsil Diol是在高純度硅膠基質(zhì)上鍵合二羥丙基的色譜柱，正相模式下，比單純的硅膠柱對(duì)化合物的選擇性更強(qiáng)，可以實(shí)現(xiàn)極性接近的化合物群的分離，主要用于一些脂溶性、中等極性或者極性較大的非離子性化合物的分離。Inertsil Diol液相色譜柱從硅膠基質(zhì)的合成，到化學(xué)處理和裝填后的性能檢測(cè)，都是在本公司嚴(yán)格的產(chǎn)品控制下進(jìn)行，因此不同批次的柱與柱之間具有優(yōu)異的重現(xiàn)性；通過(guò)獨(dú)有的裝填技術(shù)填裝的氰基柱柱床密度均一穩(wěn)定，從而確保色譜柱具有高柱效。
為了能長(zhǎng)期保持Inertsil® Diol液相色譜柱的優(yōu)越性能和正確的使用色譜柱，在使用色譜柱之前請(qǐng)仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)。
2.使用前的檢查與須知事項(xiàng)
●檢查包裝箱的外觀有無(wú)異常。
●打開(kāi)包裝，檢查色譜柱的填料名稱(chēng)、尺寸規(guī)格、連接形式是否相符。
●色譜柱中封存流動(dòng)相為正己烷/乙醇=98：2，v/v。
3.色譜柱填料規(guī)格
4.色譜柱安裝與操作
色譜柱在運(yùn)輸過(guò)程中，兩端用堵頭密封。當(dāng)將色譜柱接入色譜儀器系統(tǒng)時(shí)，首先請(qǐng)確保系統(tǒng)中的溶劑和液相柱中封存溶劑是互溶的。如果不能互溶，請(qǐng)采用一種能夠與系統(tǒng)及色譜柱都能互溶的溶劑(e.g.異丙醇)對(duì)系統(tǒng)進(jìn)行充分過(guò)渡之后再將色譜柱連接到系統(tǒng)中，并注意流動(dòng)相的方向要與柱上標(biāo)記的方向保持一致。我公司提供的常規(guī)液相色譜柱標(biāo)準(zhǔn)接頭型式為
1/16英寸Waters接頭螺絲型(如下左圖)，同時(shí)還有耐高壓液相系統(tǒng)的UP型(如下右圖)(目前Diol柱暫不提供UPLC柱)。如果需要其他接頭形式請(qǐng)另行咨詢(xún)。
色譜柱連接好之后，請(qǐng)確認(rèn)無(wú)漏液現(xiàn)象之后再進(jìn)行后續(xù)操作。
新的Diol柱是保存在正己烷/乙醇(98：2，v/v)的溶液中，在儲(chǔ)存和運(yùn)輸過(guò)程中，硅膠填料可能會(huì)干涸，用于正相分離模式，正相柱的平衡時(shí)間一般較長(zhǎng)，直接用正己烷/乙醇(98：2，v/v)沖洗至少50倍柱體積活化，流速?gòu)?/span>0.1mL/min緩慢上升到最佳流速，然后用流動(dòng)相平衡之后再進(jìn)樣分析(如果在活化過(guò)程中即發(fā)現(xiàn)壓力和基線(xiàn)不正常時(shí)，請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系我公司工程
師處理。)
5.樣品與流動(dòng)相
為避免色譜柱堵塞，所有樣品及溶劑，包括緩沖溶液在內(nèi)，在使用前必須用0.45μm或者0.22 μm的濾膜過(guò)濾。在正相色譜中，固定相的水分含量常常是影響選擇性的關(guān)鍵因素，大部分溶劑都內(nèi)含有小部分的溶解水分(正己烷20℃水分含量是0.0111% w/w)，如發(fā)現(xiàn)色譜柱保留性能發(fā)生變化，可用流動(dòng)相低流速長(zhǎng)時(shí)間充分平衡。
6.色譜柱的保養(yǎng)
●pH Diol柱可在pH2~7.5范圍內(nèi)使用，為保持色譜柱良好的壽命，請(qǐng)避免較強(qiáng)的酸或堿性樣品或者流動(dòng)相進(jìn)入色譜柱。
●耐壓 常規(guī)柱耐受壓力為20MPa，HP系列耐壓為50MPa，但是正常的壓力建議控制在耐受壓力的2/3以下。長(zhǎng)時(shí)間在高壓下運(yùn)行會(huì)對(duì)色譜柱造成難以修復(fù)的損害，因此系統(tǒng)壓力升高之后，建議盡快排查系統(tǒng)，如果是色譜柱壓力升高，請(qǐng)及時(shí)采用適當(dāng)溶劑沖洗色譜柱。
●溫度 最高操作溫度為60℃，長(zhǎng)時(shí)間在高溫下操作會(huì)顯著降低色譜柱壽命。
●沖洗
正相模式清洗步驟：
1.每次清洗都用低流速起步，當(dāng)檢測(cè)到柱壓穩(wěn)定在一定水平后再增加流速；
2.先用10倍柱體積不含其它添加劑的流動(dòng)相中的弱溶劑，如正己烷、氯仿等沖洗色譜柱；
3.用50柱體積的諸如乙酸乙酯，二氯甲烷或異丙醇等流動(dòng)相中的強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱。
此外，也可以根據(jù)樣品基質(zhì)特點(diǎn)，選擇對(duì)基質(zhì)溶解性較強(qiáng)的溶劑沖洗。
●儲(chǔ)存 色譜柱長(zhǎng)期不用，建議沖洗方法完成之后，正相分離模式保存在與出廠封存溶劑相同的流動(dòng)相中；之后卸掉色譜柱，兩端用堵頭密封，并放在溫度變化小的場(chǎng)所。
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