產(chǎn)品簡介
詳細介紹
Discovery® 反相酰胺 C16 高效液相色譜柱
SupelcoDiscoveryRP-Amide色譜柱/Discovery反相酰胺C16液相色譜柱
Supelco Discovery 反相酰胺C16液相色譜柱的主要特點:
• 對極性化合物具有出色的保留能力和分離度 與 C18 柱相比具有*的選擇性
柱效高,峰形良好
疏水性比 C18 柱弱
可兼容 * 的含水流動相
Discovery® 反相酰胺 C16 高效液相色譜柱
5 μm L × I.D. 5 cm × 2.1 mm
5 μm L × I.D. 10 cm × 2.1 mm
5 μm L × I.D. 15 cm × 2.1 mm
5 μm L × I.D. 5 cm × 3 mm
5 μm L × I.D. 15 cm × 3 mm
5 μm L × I.D. 25 cm × 3 mm
5 μm L × I.D. 12.5 cm × 4 mm
5 μm L × I.D. 15 cm × 4 mm
5 μm L × I.D. 25 cm × 4 mm
5 μm L × I.D. 5 cm × 4.6 mm
5 μm L × I.D. 10 cm × 4.6 mm
5 μm L × I.D. 15 cm × 4.6 mm
5 μm L × I.D. 25 cm × 4.6 mm
在選擇色譜柱之前,先多了解自己的樣品和雜質(zhì),他們的類型結(jié)構(gòu)、極性、酸堿性、分子量大小等等,
1.樣品是極性的且弱酸性的;就可以選擇C18在*酸性水溶液條件下檢測,即要選擇承受*純水且對極性化合物保留很好的色譜柱
2. 如果樣品極性太強,或酸性太強;可以選擇CN,NH2,或硅膠柱,HILIC(親水色譜),也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱(缺點是離子對試劑平衡時間長,對流動相pH要求比較精密,否 則很難重復(fù)實驗,另外離子對試劑很難洗下來,基本上用了離子對的色譜柱就不能再用于其它實驗)
3. 若樣品是堿性的;可選擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質(zhì),且硅膠端基封尾)或一些經(jīng)過修飾的C18柱(如極性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等),他們都會減少堿性化合物的拖尾,一般會選擇中性或偏堿的條件下做,因為這樣可增加堿性樣品的保留
4.如果堿性化合物的極性太強,或堿性太強;可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測(優(yōu)點是方法開發(fā)簡單,缺點是目前實 現(xiàn)這一技術(shù)的色譜柱品牌比較少,價格也高)或者選用HILIC色譜柱(硅膠柱在反相條件下使用,這也是很經(jīng)典的檢測堿性樣品的方法)選擇強離子交換柱(缺點 是不能用來分析其它樣品,對流動相pH要求比較精密,否則很難重復(fù)實驗)也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱;
液相色譜柱決定終分離效果,所以在選擇色譜柱時候有必要考慮清楚自己的需求。
首先液相色譜柱目前來說分為正反相色譜柱,正相有SI等,反相有C18等。正相主要分離極性物質(zhì),反相主要分離非極性物質(zhì),氨基柱等主要分離二者之間的。
明確了色譜柱大概功能之后,確認下自己樣品信息,基本就有點眉目了,方向?qū)α?,剩下的事情就是細?jié)了如:鍵合相、粒徑、孔徑、碳載量等
鍵合相:確定了正反相后基本就簡單了,正相很簡單,我們重點討論下反相,C18主要分離非極性和弱極性物質(zhì),因為是鍵合硅膠,所以C18也分好幾種有常規(guī)的如C18-A,耐純水的OL Apple C18-AQ、耐酸堿的OL Apple C18-EX等,如果發(fā)現(xiàn)C18保留很弱,調(diào)整流動相也不行,這個時候可以考慮C8甚至C4等。
粒徑:色譜法追求的是高效、高分辨、高速等。目前來說亞2um填料或者2UM核殼填料是很理想的模型,基本具備“三高”特征尤其是高速,線速度不在影響分離度,不過附帶的缺點就是高壓,要升級相應(yīng)的硬件,成本高昂,需要謹慎考慮。
5um填料普遍,目前來說*可以勝任各種日常檢測,即使有特殊要求,3um色譜填料基本上也能全覆蓋,不過該模型下線速度和分離度是成反比的。
孔徑:目前很多60~300A都有,甚至更高或者更低的。開孔的填料多了個類似分子篩功能,所以選擇孔徑一定要關(guān)注分子量,蛋白(分子量5000以上)一般都需要在160A以上,多肽(分子量上限在3000左右)在120A左右,一般快速柱孔徑都很小,可以縮短樣品路徑。所以上還有無孔硅膠柱子,也很適合蛋白分離,*解決蛋白分子量大和太粘稠堵住孔徑問題。
碳載量:快速柱碳載量很低,如A家等,省時間,省溶劑,但分析部分復(fù)雜樣品如中藥等有點力不從心,這個時候可以考慮英國OL Apple色譜柱,碳載量15~23%,碳載量數(shù)值就像河床的水草,越高代表越密集,保留樣品能力越強,越有可能分離開難分離物質(zhì)。