實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎模型(EAE模型)
背景簡(jiǎn)介:
多發(fā)性硬化癥(Multiple Sclerosis,MS)是一種發(fā)生于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的炎癥性脫髓鞘疾病。實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎模型(Experimental Autoimmune Encephalomyelitis,EAE)是研究該疾病的基本模型。EAE模型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物通過(guò)神經(jīng)組織(其中的某些成分)或病毒誘導(dǎo)產(chǎn)生的。EAE的誘導(dǎo)有主動(dòng)誘導(dǎo)法和被動(dòng)誘導(dǎo)法兩種。不同的免疫方法,可影響抗原遞呈,激發(fā)不同的免疫反應(yīng),這不但影響EAE的發(fā)生率,還可影響其發(fā)展與轉(zhuǎn)歸。通常采用主動(dòng)誘導(dǎo)法制備EAE模型,將抗原與佐劑的混合乳劑直接注射至動(dòng)物體內(nèi),經(jīng)過(guò)一定時(shí)間的潛伏期,誘導(dǎo)EAE的產(chǎn)生。抗原注射部位的不同,可影響EAE的發(fā)生率、潛伏期、死亡率及復(fù)發(fā)率。常用的注射部位有腳墊、頸部及背部(皮下、皮內(nèi)、肌肉)、腹腔和尾靜脈等多種,其中以皮下多點(diǎn)注射及腳墊注射的發(fā)病率最高,而頸部注射則有較高的復(fù)發(fā)率。 因多次注射易引發(fā)免疫耐受,現(xiàn)在多采用單次注射抗原法。EAE的被動(dòng)轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)是研究其發(fā)病機(jī)制的最直接證據(jù),也是研究EAE的治療及預(yù)防措施的良好模型。
操作流程:
小鼠品系:雌性C57BL/6 小鼠
周齡:6-8周
0天:等體積混合MOG35-55(200ug)和CFA佐劑(CFA,0.5mg)配成乳劑 ,皮下注射100ul/只。
3天:腹腔注射200ng 無(wú)菌PBS溶解的百日咳毒素,100ul/只。
典型的EAE發(fā)病時(shí)間為免疫后9-14天,免疫后3-5天為高峰期,隨后逐漸恢復(fù)。高峰期持續(xù)1-3天。有25%概率的小鼠在免疫恢復(fù)后,疾病復(fù)發(fā),嚴(yán)重程度增加,通常發(fā)生在免疫后的20-27天。小鼠通常觀察4周左右,在此期間,小鼠將保持慢性癱瘓。
此方案源于文獻(xiàn)(PMID: 20811645),具體的免疫劑量我們建議客戶根據(jù)您的實(shí)驗(yàn)需求制定和優(yōu)化實(shí)驗(yàn)方案。以上方案僅供參考。
EAE的神經(jīng)癥狀通常根據(jù)Kono等提出的標(biāo)準(zhǔn)分為5級(jí)。0級(jí):無(wú)任何臨床癥狀;1級(jí):動(dòng)物尾巴無(wú)力,2級(jí):尾部無(wú)力+肢體無(wú)力,3級(jí):肢體輕度麻痹,4級(jí):肢體嚴(yán)重麻痹,被動(dòng)翻身后不能復(fù)原;5級(jí):瀕死狀態(tài)或死亡。
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