二抗是在其它宿主體內(nèi)制備的能與一抗或一抗片段結(jié)合的抗體，通常偶聯(lián)有酶、熒光素或生物素等。二抗針對(duì)某一特定物種（如小鼠）的所有抗體（如IgG、IgM或IgA等）均具有反應(yīng)性，因而使用標(biāo)記的二抗可以免去對(duì)每個(gè)一抗進(jìn)行標(biāo)記，大大節(jié)省了時(shí)間和費(fèi)用；此外，一個(gè)一抗分子可以同時(shí)結(jié)合幾個(gè)二抗分子，從而使信號(hào)大大增強(qiáng)，提高了實(shí)驗(yàn)靈敏度。通常情況下，某一特定的實(shí)驗(yàn)中可能同時(shí)有幾種二抗可供選擇，如何能選擇到適合該實(shí)驗(yàn)的二抗，需要綜合以下幾個(gè)方面進(jìn)行考慮：
1.選擇全IgG形式還是F(ab’)2片段，或者Fab片段二抗
全IgG形式的二抗是從抗血清中分離出來(lái)的完整的分子；這些抗體有一個(gè)Fc部分和兩個(gè)與抗原結(jié)合的Fab部分，因此是二價(jià)的，也是性價(jià)比較高的。 F(ab’)2片段形式的二抗是用胃蛋白酶消化IgG去除Fc部分，剩下兩個(gè)靠二硫鍵連接的結(jié)合抗原的Fab部分，依然是二價(jià)的；該抗體可避免與Protein A /G或與Fc受體的結(jié)合， 還由于其分子本身比較好，更容易滲透入細(xì)胞組織結(jié)構(gòu)內(nèi)而靈敏度更高 。Fab片段形式的二抗是用木瓜蛋白酶消化IgG后得到的；Fab片段抗體由于只含有一個(gè)結(jié)合位點(diǎn)，可用來(lái)封閉內(nèi)源性的免疫球蛋白。
2. 根據(jù)一抗的種屬來(lái)源和類型選擇二抗
二抗應(yīng)選用抗一抗種屬來(lái)源的抗體，例如：如果一抗是小鼠源的抗體，二抗則選抗小鼠的二抗；如果一抗是從兔血清里制備的兔源抗體，則相應(yīng)的二抗需要選擇抗兔的二抗。另外，二抗需與一抗的類別或亞類相匹配。這通常是針對(duì)單克隆抗體而言。其中單克隆抗體的類別及亞類通常會(huì)在產(chǎn)品說(shuō)明書中都會(huì)有描述，如果一抗是小鼠IgM，那么相應(yīng)的二抗就應(yīng)當(dāng)是抗小鼠IgM。如果一抗是小鼠IgG的某一亞類（IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3），那么幾乎所有的抗小鼠IgG都可以與之結(jié)合，或者也可以選擇專門針對(duì)這一亞類的二抗，例如，如果一抗是小鼠IgG1，那么可以選擇抗IgG1的二抗。至于二抗本身是在什么動(dòng)物中制備的對(duì)二抗的質(zhì)量并無(wú)明顯的影響。Southern Biotech為您提供全種屬的二抗產(chǎn)品。
3.根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求的特異性進(jìn)一步篩選二抗
Anti-IgG (H+L)是較常用也是性價(jià)比較高的二抗形式，這類抗體和IgG分子的重鏈和輕鏈都可以反應(yīng)，也可以和其他的免疫球蛋白家族（IgM，IgA，IgD,IgE）和亞家族反應(yīng)，因?yàn)樗械拿庖咔虻鞍锥加邢嗤妮p鏈。 Anti-IgG，Fc fragment specific這類抗體和IgG重鏈的Fc部分反應(yīng)，與F(ab’)2或Fab無(wú)交叉反應(yīng)，但可能與IgM或IgA有交叉反應(yīng)；而抗IgG，Fcγ fragment specific則只與IgG重鏈反應(yīng)，通常不能和IgA或IgM任何表位反應(yīng)。 Anti-IgG，F(ab’)2 fragment specific則正好相反。
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：
※全種屬亞型覆蓋廣
※無(wú)交叉反應(yīng)
※高特異
※批次穩(wěn)定
※多種偶聯(lián)
為什么選擇亞型特異性的單克隆二抗？
在IF,IHC,FCM多重標(biāo)記的實(shí)驗(yàn)中，研究者感興趣的2-3個(gè)靶標(biāo)蛋白的一抗往往是同一種屬（不同亞型）的情況，比如：都是小鼠單克隆抗體。為了消除費(fèi)異性的交叉反應(yīng)，研究者一般有2種選擇：
1.重新購(gòu)買不同種屬來(lái)源的多種一抗，再選擇經(jīng)過(guò)多種種屬血清吸附后的二抗，進(jìn)行試驗(yàn)。
2.使用多種帶熒光的Fab片段單價(jià)二抗，在加入地中一抗后，加入過(guò)量的帶熒光標(biāo)記的Fab片段單價(jià)二抗，*結(jié)合后，經(jīng)過(guò)充分洗滌，再加入第二種一抗與對(duì)應(yīng)Fab二抗；如此重復(fù)，再加入第三種一抗與對(duì)應(yīng)的Fab片段二抗。
以上2種方案，不僅需要購(gòu)買更多的一抗與二抗，而且導(dǎo)致了額外的操作步驟，還會(huì)增加非特異性的可能性。但如果研究者的三種一抗是不同的亞型，比如：IgG1,IgG2a和IgG2b，或者其它，那么客戶準(zhǔn)備針對(duì)這3種亞型的特異性二抗，經(jīng)過(guò)加入3種一抗，加入3種二抗，兩步即可獲得理想結(jié)果。
訂購(gòu)信息：
反應(yīng)種屬 | 產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 標(biāo)記 |
小鼠（Mouse） | Rat Anti-Mouse IgA | 1165 | □FTIC □AP □APC□ □Biotin □HRP □PE□UNLB |
Rat Anti-Mouse IgD | 1120 | □AlexaFluor® 488□AlexaFluor® 647□Biotin□LE-AF □FITC□Pacific Blue□PE□ UNLB | |
Rat Anti-Mouse IgE | 1130 | □AP□Biotin□FITC□HRP□LE-AF□PE□UNLB | |
Rat Anti-Mouse IgG1 | 1144 | □AlexaFluor® 488□Alexa Fluor® 555□ Alexa Fluor® 647□ AP□ Biotin□ FITC□HRP□UNLB | |
Rat Anti-Mouse IgG2a | 1155 | □AlexaFluor® 488□Alexa Fluor® 555□ Alexa Fluor® 647□ AP□ Biotin□FITC□PE□HRP□UNLB | |
Rat Anti-Mouse IgG2b | 1186 | □AP□Biotin□FITC□HRP□PE□UNLB | |
Rat Anti-Mouse IgG3 | 1191 | □AP□Biotin□FITC□HRP□PE□UNLB | |
Rat Anti-Mouse IgM | 1140 | □Alexa Fluor® 555□AP□APC□Biotin□FITC□HRP□PE/CY7□PE□UNLB | |
Rat F(ab')2 Anti-Mouse IgM | 1142 | □UNLB | |
Rat Anti-Mouse Kappa | 1170 | □AP□Biotin□FITC□HRP□PE□UNLB | |
Rat Anti-Mouse Lambda | 1175 | □AP□Biotin□FITC□HRP□PE□UNLB | |
人（Human） | Mouse Anti-Human IgA1 | 9130 | □AlexaFluor® 488□Alexa Fluor® 647□AP□Biotin□FITC□PE□HRP□UNLB |
Mouse Anti-Human IgA2 | 9140 | □AlexaFluor® 488□Alexa Fluor® 647□AP□Biotin□FITC□PE□HRP□UNLB | |
Mouse Anti-Human IgD | 9030 | □AlexaFluor® 488□Alexa Fluor® 647□AP□Biotin□FITC□PE□HRP□UNLB | |
Mouse Anti-Human IgE Fc | 9240 | □UNLB | |
Mouse Anti-Human IgE Fc | 9160 | □Alexa Fluor® 488□Alexa Fluor® 647□AP□Biotin□ HRP□UNLB | |
Mouse Anti-Human IgG Fc | 9040 | □Alexa Fluor® 488□ Alexa Fluor® 647□ AP□ FITC □Biotin □HRP□UNLB | |
Mouse Anti-Human IgG Fc | 9042 | □Alexa Fluor® 488□Alexa Fluor® 555 □ Alexa Fluor® 647□ AP□APC□Biotin □CY5□FTIC□HRP□LE/AF □SPRD□UNLB | |
Mouse Anti-Human IgG1 Fc | 9054 | □AP□BIMA□HRP□PE□UNLB | |
Mouse Anti-Human IgG1 Hinge | 9052 | □Alexa Fluor® 488□Alexa Fluor® 555 □ Alexa Fluor® 647□AP□ FITC □PE□Biotin □HRP□UNLB | |
Mouse Anti-Human IgG2 Fc | 9060 | □AP□Biotin□FITC□HRP□PE□UNLB | |
Mouse Anti-Human IgG2 Fd | 9080 | □Alexa Fluor® 488 □Alexa Fluor® 647□AP□FITC □PE□Biotin □HRP□UNLB | |
Mouse Anti-Human IgG3 Hinge | 9210 | □Alexa Fluor® 488□Alexa Fluor® 555 □ Alexa Fluor® 647□AP□ FITC □PE□Biotin □HRP□UNLB | |
Mouse Anti-Human IgG4 Fc | 9200 | □Alexa Fluor® 488□Alexa Fluor® 555 □Alexa Fluor® 647□AP□ FITC □PE□Biotin □HRP□UNLB | |
Mouse Anti-Human IgM | 9020 | □Alexa Fluor® 488□Alexa Fluor® 555 □Alexa Fluor® 647□AP□ FITC □PE□Biotin □HRP□UNLB | |
Mouse F(ab')2 Anti-Human IgM | 9023 | □UNLB | |
Mouse Anti-Human Kappa | 9230 | □Alexa Fluor® 488□Alexa Fluor® 555 □Alexa Fluor® 647□AP□ APC□ FITC □PE□Biotin □HRP□UNLB | |
Mouse Anti-Human Lambda | 9180 | □Alexa Fluor® 488□AP□FITC□PE□Biotin□HRP□UNLB | |
兔（Rabbit） | Rat Anti-Rabbit Ig | 4065 | □Biotin □HRP□PE□SPRD□UNLB |
Mouse Anti-Rabbit IgG | 4090 | □Alexa Fluor® 555□AP□APC□FITC□PE□SPRD□Biotin □HRP□UNLB | |
Mouse Anti-Rabbit Light Chain | 4060 | □AP□HRP□ UNLB | |
山羊（Goat） | Mouse Anti-Goat IgG Fc | 6157 | □Biotin □HRP□PE□UNLB |
Mouse Anti-Goat IgG Fc | 6158 | □Alexa Fluor® 488□Alexa Fluor® 555□Alexa Fluor® 647□Biotin □HRP□UNLB | |
大鼠（Rat） | Mouse Anti-Rat IgG1 | 3061 | □Alexa Fluor® 488□Alexa Fluor® 555□Alexa Fluor® 647□AP □Biotin□CY5□FITC□HRP□PE□UNLB |
Mouse Anti-Rat IgG2a | 3065 | □Alexa Fluor® 488□Alexa Fluor® 555□Alexa Fluor® 647□AP □Biotin□CY5□FITC□HRP□PE□UNLB | |
Mouse Anti-Rat IgG2b | 3070 | □Alexa Fluor® 488□Alexa Fluor® 555□Alexa Fluor® 647□AP□BIMA□CY5□FITC□HRP□PE□UNLB | |
Mouse Anti-Rat IgG2c | 3075 | □AP□Biotin□CY5□FITC□HRP□PE□UNLB | |
Mouse Anti-Rat IgM | 3080 | □Alexa Fluor® 488□Alexa Fluor® 555□Alexa Fluor® 647□Biotin□CY5□FITC□HRP□PE□UNLB | |
Mouse F(ab')2 Anti-Rat IgM | 3082 | □LE/AF□UNLB | |
Mouse Anti-Rat Kappa | 3090 | □AP□Biotin□FITC□HRP□PE□UNLB | |
倉(cāng)鼠（Hamster） | Mouse Anti-Hamster IgG1 | 1940 | □Biotin□FITC□HRP□PE□UNLB |
Mouse Anti-Hamster IgG2/IgG3 | 1935 | □Biotin□FITC□HRP□PE□UNLB | |
Mouse Anti-Hamster IgG3 | 1930 | □Biotin□HRP□UNLB | |
雞（Chicken） | Mouse Anti-Chicken IgA | 8330 | □Biotin□FITC□HRP□PE□UNLB |
Mouse Anti-Chicken IgM | 8300 | □Biotin□UNLB | |
Mouse Anti-Chicken IgM | 8310 | □Alexa Fluor® 647□APC□Biotin□FITC□SPRD□PE□UNLB | |
Mouse Anti-Chicken IgY | 8320 | □Alexa Fluor® 647□Biotin□FITC□PE□UNLB | |
Mouse Anti-Chicken Lambda | 8340 | □Biotin□FITC□PE□UNLB | |
猴（Monkey） | Mouse Anti-Monkey IgG | 4700 | □Alexa Fluor® 488□Alexa Fluor® 555□Alexa Fluor® 647□AP□Biotin□FITC□HRP□PE□UNLB |
Southern Biotech 公司提供常規(guī)的熒光和酶標(biāo)抗體，常用的抗小鼠、大鼠、兔和山羊的IgG(H+L)二抗，可用于ELISA、免疫熒光、免疫組化、流式檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 標(biāo)記 |
Goat Anti-Mouse IgG(H+L) | 1031 | □FITC□TRITC□AP□HRP□TXRD□PE□Biotin□HRP□APC□CY5□Alexa Fluor® 488□Alexa Fluor® 647□Alexa Fluor® 555□UNLB |
Goat Anti-Rabbit IgG(H+L) | 4050 | □FITC□TRITC□AP□HRP□TXRD□PE□Biotin□HRP□APC□SPRD□Alexa Fluor® 488□Alexa Fluor® 647□Alexa Fluor® 555□UNLB |
Goat Anti-Rat IgG(H+L), | 3050 | □FITC□TRITC□AP□HRP□BGAL□TXRD□PE□Biotin □HRP□Alexa Fluor® 488□Alexa Fluor® 647□Alexa Fluor® 555□UNLB |
Donkey Anti-Goat IgG(H+L) | 6420 | □FITC□AP□HRP□PE□Biotin□Alexa Fluor® 488□Alexa Fluor® 647□Alexa Fluor® 555□UNLB |
Rabbit Anti-Goat IgG(H+L) | 6160 | □FITC□AP□HRP□Biotin□TRITC□UNLB |
IgG是血清中含量較高的免疫球蛋白，也是重要抗感染分子，根據(jù)其分子主鏈（γ鏈）抗原性差別及二硫鍵數(shù)目與位置的不同，分為4個(gè)亞型，分別是IgG1,IgG2, IgG3,IgG4。各種亞型都有各自特性和不同的功能。IgG1具有很強(qiáng)的激活補(bǔ)體和結(jié)合吞噬細(xì)胞的能力。IgG2在多糖抗原的免疫應(yīng)答中占優(yōu)勢(shì)。IgG3在對(duì)蛋白及多肽類抗原產(chǎn)生的免疫應(yīng)答中表現(xiàn)出比IgG1更高的親和力。IgG4主要參與過(guò)敏反應(yīng)。有文獻(xiàn)報(bào)道，IgG亞型的分布與一些疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，比如：1）膜性腎病檢測(cè)2）抗腎小球基底膜抗體疾病3）新生兒溶血病4）血管炎等。
Southern Biotech公司IgG亞型檢測(cè)抗體常被用于免疫熒光或免疫組化檢測(cè)不同IgG亞型抗體在檢測(cè)組織中的沉積強(qiáng)度的差異，從而反映相關(guān)疾病的不同階段的發(fā)展差異，是疾病鑒別診斷的有效工具。
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 標(biāo)記 |
Mouse Anti-Human IgG1 Hinge | 9052 | □FITC□AP□HRP□Biotin□PE□Alexa Fluor® 488□Alexa Fluor® 647□Alexa Fluor® 555□UNLB |
Mouse Anti-Human IgG2 Fc | 9060 | □FITC□AP□HRP□Biotin□PE□□UNLB |
Mouse Anti-Human IgG2 Fc | 9070 | □FITC□AP□Biotin□PE□Alexa Fluor® 488□Alexa Fluor® 647□Alexa Fluor® 555□UNLB |
Mouse Anti-Human IgG2 Fd | 9080 | □FITC□AP□Biotin□PE□HRP□Alexa Fluor® 488□Alexa Fluor® 647□UNLB |
Mouse Anti-Human IgG3 Hinge | 9210 | □FITC□AP□Biotin□PE□HRP□Alexa Fluor® 488□Alexa Fluor® 647□Alexa Fluor® 555□UNLB |
Mouse Anti-Human IgG4 Fc | 9200 | □FITC□AP□Biotin□PE□Alexa Fluor® 488□Alexa Fluor® 647□Alexa Fluor® 555□UNLB |
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