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        1. 上海添時(shí)科學(xué)儀器有限公司

          瘦肉精介紹及其檢測(cè)方法

          時(shí)間:2014-9-26 閱讀:2490
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          在我國(guó),通常所說(shuō)的“瘦肉精”則是指克倫特羅。它曾經(jīng)作為藥物用于治療支氣管哮喘,后由于其副作用太大而遭禁用。

              瘦肉精是一類動(dòng)物用藥,有數(shù)種藥物被稱為瘦肉精,例如萊克多巴胺(Ractopamine)及克倫特羅(Clenbuterol)等。將瘦肉精添加于飼料中,可以增加動(dòng)物的瘦肉量、減少飼料使用、使肉品提早上市、降低成本。但因?yàn)榭紤]對(duì)人體會(huì)產(chǎn)生副作用,各國(guó)開放使用的標(biāo)準(zhǔn)不一。

              其它這樣類似藥物還有沙丁胺醇(Salbutamol)和特布他林(Terbutaline)等,同樣能起到“瘦肉”作用、卻對(duì)人體健康危害過(guò)大,因而造成安全隱患。它們也因而在遭到禁用。
            英文名:
            Clenbuterol; Spiropent; Planipart; NAB365;4-Amino-3,5-dichloro-alpha-(((1,1-dimethylethyl)amino)methyl)benzenemethanol
            CAS號(hào):37148-27-9


          鹽酸克倫特羅結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)式
          分子式:C12-H18-Cl2-N2-O
            

          理化特性
            白色或類白色的結(jié)晶粉末,無(wú)臭、味苦,熔點(diǎn)161℃,溶于水、乙醇,微溶于丙酮,不溶于已醚。
           
          檢測(cè)方法
            GB/T 5009.192-2003 動(dòng)物性食品中克倫特羅殘留量的測(cè)定
            氣相色譜-質(zhì)譜法(GC-MS)
            GC-MS法優(yōu)點(diǎn)是把色譜快速的分離效果和質(zhì)譜高靈敏度的定性分析有機(jī)合起來(lái),能在多種殘留物同時(shí)存在的情況下對(duì)某種特定的殘留物進(jìn)行定性、定量分析,而且具更高的檢測(cè)極限。Fente C. A等用GC-MS法檢測(cè)牛毛中CLB的殘留,低檢測(cè)限為5ng/g[6];Pteer Batioens應(yīng)用氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(GC-MS-MS)對(duì)牛、羊、豬組織中的CLB含量進(jìn)行檢測(cè),低檢測(cè)限為2ng/g[7];劉琪等用GC-MS法(EI離子源)檢測(cè)豬尿中的CLB,檢測(cè)限為0.5ng/mL;VanRhijin等用*基硅基或2-二甲基硅基嗎啉衍生物檢測(cè)尿提取物中的CLB,衍生物用電脈沖方式或化學(xué)離子化方式掃描,會(huì)產(chǎn)生更高的靈敏度。另外,GC-MS法與HPLC法相比,檢測(cè)靈敏度更高,假陽(yáng)性率更低。因此,我國(guó)將GC-MS法定為檢測(cè)CL B的確證性方法(NY/T468~2001)。
               液相色譜法(HPLC)
            HPLC適合測(cè)定熱不穩(wěn)定和強(qiáng)極性的β-激動(dòng)劑及其代謝產(chǎn)物,而且,HPLC可以與柱前提取、純化及柱后熒光衍生化反應(yīng)和質(zhì)譜(MS)等系統(tǒng)聯(lián)用,容易實(shí)現(xiàn)分析過(guò)程的自動(dòng)化。黃士新等(1995)應(yīng)用紫外檢測(cè)器,在λ=243nm,色譜柱:shimpackCLC-ODS150×6.0mn,流速:1mL/min,柱溫:室溫30℃的條件下檢測(cè)豬肝臟和豬肉中的CLB殘留,低檢測(cè)限可達(dá)2ng/g[4]。國(guó)外有人應(yīng)用HPLC (二極管陣列檢測(cè)器)測(cè)定動(dòng)物性食品中CLB殘留,測(cè)得低檢測(cè)限為1.26ng/g,回收率達(dá)98.9%[5]。目前,我國(guó)已將HPLC法作為檢測(cè)CLB殘留的半確證性方法,低檢測(cè)限范圍為1~15ng/g,其優(yōu)點(diǎn)是專屬性好、選擇性強(qiáng)、檢測(cè)度較高,而且假陽(yáng)性率低;缺點(diǎn)是樣品處理時(shí)間長(zhǎng),檢測(cè)過(guò)程煩瑣、難于操作,需貴重儀器,在實(shí)際應(yīng)用中受到一定的限制。
            酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA )ThermoMK3 FC 酶標(biāo)儀
            利用免疫學(xué)抗原抗體特異性結(jié)合和酶的催化作用,通過(guò)化學(xué)方法將植物辣根過(guò)氧化物酶(HRP)與克倫特羅(CL)結(jié)合,形成酶偶聯(lián)克倫特羅。將固相載體上已包被的抗體(羊抗兔IgG抗體)與特異性的抗克倫特羅抗體結(jié)合,然后加入待測(cè)克倫特羅和酶偶聯(lián)克倫特羅,它們競(jìng)爭(zhēng)性與克倫特羅抗體結(jié)合,洗滌后加底物,根據(jù)有色物的變化計(jì)量待測(cè)克倫特羅量。若待測(cè)克倫特羅多,則被結(jié)合的酶偶聯(lián)克倫特羅少,有色物量就少。用目測(cè)法或比色法測(cè)定樣品中的克倫特羅含量,比色的佳波長(zhǎng)為450 nm,參比波長(zhǎng)應(yīng)大于600 nm。
            液相色譜—質(zhì)譜/質(zhì)譜法(HPLC-MS/MS)
            參見SN/T 1924—2007 進(jìn)出口動(dòng)物源食品中克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林殘留量的檢測(cè)方法。
            本標(biāo)準(zhǔn)適用于動(dòng)物源性食品肌肉和內(nèi)臟中克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林殘留量的檢測(cè)。
            試樣中的藥物殘留采用pH5.2的乙酸銨緩沖液提取,同時(shí)加入β-鹽酸葡萄糖醛甙酶-芳基硫酯酶進(jìn)行酶解后,提取液經(jīng)C18和SCX雙SPE柱凈化,液相色譜—質(zhì)譜進(jìn)行測(cè)定,內(nèi)標(biāo)法定量。
           
          研究歷史
            克倫特羅是一種β-興奮劑,添加于飼料中能提高幾種家畜包括豬的瘦肉率。
            克倫特羅在家畜和人體內(nèi)吸收好,而且與其它β-興奮劑相比,它的生物利用度高,以至食用了含有克倫特羅的豬肉出現(xiàn)中毒。Zimmer(1976)證實(shí)人內(nèi)服20 μg的14C-鹽酸克倫特羅,峰濃度時(shí) ,血漿中克倫特羅原形藥占總的14C-鹽酸克倫特羅的75%??藗愄亓_內(nèi)服生物利用度高的事實(shí)對(duì)估計(jì)消費(fèi)者食用了含有克倫特羅的組織,從中獲得的克倫特羅的量很重要。引起人中毒的動(dòng)物組織含有克倫特羅原形藥的量差異很大。Martinez-Navarro(1990)報(bào)道犢牛肝中克倫特羅原形藥的殘留量為161~291 ppb,Pulce等(1991)報(bào)道犢牛肝中克倫特羅的殘留量為375~500 ppb,Salleras等(1995)報(bào)道犢牛肝中克倫特羅的殘留量為19~5395 ppb。此外,Maistro等(1995)報(bào)道犢牛肌肉中克倫特羅的殘留量為500 ppb。
            1ppm的克倫特羅添加于豬飼料中用于促生長(zhǎng),人食用豬肝或豬肺足夠引起中毒。世界沒有任何正規(guī)機(jī)構(gòu)批準(zhǔn)克倫特羅作為飼料添加劑用于動(dòng)物促生長(zhǎng)。
           
          毒理簡(jiǎn)介
            克倫特羅能激動(dòng)β2-受體,對(duì)心臟有興奮作用,對(duì)支氣管平滑肌有較強(qiáng)而持久的擴(kuò)張作用。口服后較易經(jīng)胃腸道吸收。作平喘藥口服成人20-40μg/次,3次/日;兒童5歲以上5-20μg/次,3次/日。人(女性)經(jīng)口TDLo: 4600 ng/kg。小鼠靜脈LD50: 27600 ug/kg。
          臨床表現(xiàn)
            1.急性中毒有心悸,面頸、四肢肌肉顫動(dòng),有手抖甚至不能站立,頭暈,乏力,原有心律失常的患者更容易發(fā)生反應(yīng),心動(dòng)過(guò)速,室性早搏,心電圖示S-T段壓低與T波倒置。
            2.原有交感神經(jīng)功能亢進(jìn)的患者,如有高血壓、冠心病、甲狀腺功能亢進(jìn)者上述癥狀更易發(fā)生。
            3.與糖皮質(zhì)激素合用可引起低血鉀,從而導(dǎo)致心律失常。
            4.反復(fù)使用會(huì)產(chǎn)生耐受性,對(duì)支氣管擴(kuò)張作用減弱及持續(xù)時(shí)間縮短。雖然克倫特羅殘留的毒作用為輕度的,但美國(guó)FDA研究表明,應(yīng)用擬交感神經(jīng)藥者或?qū)η八庍^(guò)敏者,對(duì)克倫特羅的反應(yīng)要比正常健康個(gè)體更為嚴(yán)重。
            FDA擔(dān)心非法應(yīng)用克倫特羅可導(dǎo)致此藥的生產(chǎn)工人患病或死亡。FDA指出,職業(yè)性吸入克倫 特羅對(duì)心血管的影響,可能要比經(jīng)食品攝食的危害性更大,但有待于進(jìn)一步的證實(shí)。
          急救治療
            1.口服后即洗胃、輸液,促使毒物排出。
            2.在心電圖監(jiān)測(cè)及電解質(zhì)測(cè)定下,使用保護(hù)心臟藥物如6-二磷酸果糖(FDP)及β1-受體阻滯劑倍他樂克。
           
          識(shí)別和預(yù)防

          識(shí)別方法
          (1)看該豬肉是否具有脂肪(豬油),如該豬肉在皮下就是瘦肉或僅有少量脂肪,則該豬肉就存在含有“ 瘦肉精”的可能。
          (2)喂過(guò)“瘦肉精”的瘦肉外觀特別鮮紅,后臀較大,纖維比較疏松,切成二三指寬的豬肉比較軟,不能立于案,瘦肉與脂肪間有黃色液體流出,脂肪特別?。欢话憬】档氖葚i肉是淡紅色,肉質(zhì)彈性好,瘦肉與脂肪間沒有任何液體流出。
          (3)購(gòu)買時(shí)一定看清該豬肉是否有蓋有檢疫印章和檢疫合格證明。
           
          預(yù)防方法
            1.控制源頭,加強(qiáng)法規(guī)的宣傳,禁止在飼料中摻入瘦肉精。
            2.加強(qiáng)對(duì)上市豬肉的檢驗(yàn)。
            3.消費(fèi)者購(gòu)買豬肉時(shí)要揀帶些肥膘(1-2cm)的肉,顏色不要太鮮紅,豬內(nèi)臟因瘦肉精殘留量多不宜食用。
          其它相關(guān)
          用量規(guī)定
            許多化學(xué)物質(zhì)被稱為瘦肉精,其中培林(雷托巴胺,萊克多巴胺 ,Ractopamine)毒性極低、代謝快速(無(wú)累積性),因此被美國(guó)等國(guó)家允許添加入豬飼料,日本也允許使用培林(Ractopamine)的豬肉進(jìn)口。目前*有美國(guó)等24國(guó)開放使用培林,有160多國(guó)仍禁用。
            

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