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所有產(chǎn)品僅供科研使用,不能用于食用和醫(yī)療等
產(chǎn)品名稱: | 人補(bǔ)體片段3d(C3d)ELISA試劑盒 | |
樣品形式: | 血清/血漿/細(xì)胞培養(yǎng)上清/其它生物液體/組織等(具體情況請(qǐng)咨詢) | |
品牌: | GENOMIC,R&D,ABCAM,CAYMAN等 | |
有效期: | 六個(gè)月 | |
保存與運(yùn)輸: | 2到8℃ | |
應(yīng)用范圍: | 科研用檢測(cè)試劑 | |
供貨商: | 上海信帆生物科技有限公司 | |
上海信帆銷售ELISA試劑盒,全程提供技術(shù)指導(dǎo),提供售后服務(wù)。
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人補(bǔ)體片段3d(C3d)ELISA試劑盒 | ||
操作步驟 | ||
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 | ||
8 nmol/L 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | ||
4 nmol/L 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | ||
2 nmol/L 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | ||
1 nmol/L 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | ||
0.5 nmol/L 1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | ||
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、 | ||
待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl, | ||
然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡 | ||
量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。 | ||
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。 | ||
4. 配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用 | ||
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒后棄去,如此重復(fù)5 次,拍干。 | ||
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。 | ||
7. 溫育:操作同3。 | ||
8. 洗滌:操作同5。 | ||
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色 | ||
10 分鐘. | ||
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。 | ||
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。 | ||
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人補(bǔ)體片段3d(C3d)ELISA試劑盒 | ||
操作程序總結(jié): | ||
計(jì)算 | ||
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD 值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的 | ||
OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD 值計(jì)算出標(biāo) | ||
準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD 值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù), | ||
即為樣品的實(shí)際濃度。 | ||
注意事項(xiàng) | ||
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未 | ||
用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。 | ||
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。 | ||
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間 | ||
控制在5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。 | ||
4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD 值 | ||
大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD 值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測(cè)定,計(jì) | ||
算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。 | ||
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 | ||
6.底物請(qǐng)避光保存。 | ||
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn). | ||
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。 | ||
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。 | ||
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人補(bǔ)體片段3d(C3d)ELISA試劑盒 | ||
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