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小鼠免疫球蛋白M(IgM) 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
檢測(cè)原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用小鼠免疫球蛋白M(IgM)抗體包被于酶標(biāo)板上,實(shí)驗(yàn)時(shí)標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品中的IGG會(huì)與包被抗體結(jié)合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠IGM抗體和辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素。小鼠IGM抗體與結(jié)合在包被抗體上的小鼠免疫球蛋白M(IgM)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物,TMB在辣根過(guò)氧化物酶的催化下現(xiàn)藍(lán)色,加終止液后變黃。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)處測(cè)OD值,小鼠免疫球蛋白M(IgM)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒濃度與OD450值之間呈正比,通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中小鼠免疫球蛋白M(IgM)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒的濃度。
標(biāo)本收集:
血清:全血標(biāo)本于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)一夜后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),收集血液的試管應(yīng)為一次性的無(wú)熱原,無(wú)內(nèi)毒素試管。
血漿:抗凝劑推薦使用EDTA,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測(cè)。避免使用溶血,高血脂標(biāo)本。
其它生物標(biāo)本:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè)
標(biāo)本應(yīng)清澈透明,懸浮物應(yīng)離心去除。
標(biāo)本收集后若不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次使用量分裝,凍存于-20℃/-80℃電冰箱內(nèi),避免反復(fù)凍融,6個(gè)月內(nèi)進(jìn)行檢測(cè),4℃保存的應(yīng)在1周內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。
如果樣本中檢測(cè)物濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品zui高值,請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況,做適當(dāng)倍數(shù)稀釋(建議先做預(yù)實(shí)驗(yàn),以確定稀釋倍數(shù))。
試驗(yàn)所需自備物品:
酶標(biāo)儀(450nm波長(zhǎng)濾光片)
高精度移液器,EP管及一次性吸頭:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL
37℃恒溫箱, 雙蒸水或去離子水
吸水紙
如果你對(duì)實(shí)驗(yàn)或試劑盒產(chǎn)品有任何疑問(wèn),歡迎郵件、、。
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