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        1. 上海信帆生物科技有限公司
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          RIPA組織/細胞裂解液

          參  考  價面議
          具體成交價以合同協(xié)議為準

          產(chǎn)品型號

          品       牌其他品牌

          廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

          所  在  地上海市

          更新時間:2024-10-06 11:16:27瀏覽次數(shù):881次

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          供貨周期 現(xiàn)貨 應用領(lǐng)域 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè)
          RIPA組織/細胞裂解液,是一種主要用于從動物組織和動物細胞中抽取的可溶性蛋白的試劑。

          RIPA組織/細胞裂解液

          產(chǎn)品名稱 RIPA裂解液(組織/細胞)

          產(chǎn)品規(guī)格】 20ml /100ml

          儲存條件 RIPA裂解液4℃保存,PMSF -20℃保存

          有效期 12個月 

          產(chǎn)品簡介

          RIPA裂解液(組織/細胞)是一種主要用于從動物組織和動物細胞中抽取的可溶性蛋白的試劑。

          RIPA 組織/細胞裂解液是利用表面活性劑等來裂解細胞膜(包括核膜)。本試劑提取的蛋白為可溶性總蛋白。

           

          本產(chǎn)品僅供科研實驗用,不做其它用途!

           

          使用說明

          如發(fā)現(xiàn)RIPA有沉淀,請放室溫半小時或者常溫水浴使沉淀溶解。

          根據(jù)使用量,取每1mL RIPA加入10uL PMSF,使PMSF的最終濃度為1mM,混勻備用(PMSF現(xiàn)用現(xiàn)加)。

          1、樣品前處理:

          a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 μL裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。

          b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,按照6孔板每孔細胞量加入150-250uL裂解液的比例加入裂解液,用手指輕彈懸浮細胞以充分裂解。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成50-100萬細胞/管,然后再裂解。

          c)對于組織樣品:把組織-剪切成細小的碎片。按照每20mg組織加入150-250 μL裂解液的比例加入裂解液(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量) 。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

          2、后處理:

          將裂解后的樣品10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting和免疫沉淀等操作。

          注意事項

          本試劑為強烈型裂解液,可以提取核蛋白,但在提取核蛋白的同時,也會將基因組一并釋放出來,若細胞量多會造成細胞裂解液粘稠:此時可以直接加入蛋白上樣緩沖液,煮沸再離心,離心后直接上樣電泳;若想測定濃度,可加入少量 SDS(1%),煮沸后離心測濃度。本系列蛋白提取試劑所提取的蛋白由于含有去污劑,所以不適合使用Bradford 蛋白濃度測定試劑盒,請選擇BCA法或者Lowry法檢測蛋白濃度。

          如果需要檢測和基因組結(jié)合特別緊密的蛋白,則可以通過超聲處理打碎打散粘稠狀物,隨后離心取上清用于后續(xù)實驗。

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          RIPA組織/細胞裂解液 

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