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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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14612ESHifair® Super Reverse Transcriptase（200 U/μL）
| 參考價 | ￥1435 |
具體成交價以合同協(xié)議為準
- 14612ES 型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
規(guī)格
| 10000 U | 1435元 | 99 件 可售 |
訪問次數(shù)：149更新時間：2024-05-23 12:43:25
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- 地址：
- 上海市浦東新區(qū)天雄路166弄1號3樓
- 網(wǎng)址：
- www.yeasen.com
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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 兩周 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
|---|
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品簡介
Hifair® Super Reverse Transcriptase是通過ZymeEditor定向進化平臺對M-MLV進行定向改造獲得的新一代逆轉(zhuǎn)錄酶，該酶缺乏RNase H活性，其熱穩(wěn)定性大幅度提高，可耐受高達70℃的反應(yīng)溫度，非常適合具有復雜二級結(jié)構(gòu)的RNA模板的高效逆轉(zhuǎn)錄。
產(chǎn)品信息
貨號 | 14612ES92 / 14612ES93 |
規(guī)格 | 10,000 U / 50,000 U |
單位定義 | 以Poly(A) .Oligo(dT)為模板-引物，在37℃，10 min內(nèi)，將1 nmol的dTTP摻入為酸不溶性物質(zhì)所需要的酶量定義為1個活性單位（U）。 |
組分信息
組分編號 | 組分名稱 | 14612ES92 | 14612ES93 |
14612 | Hifair® Super Reverse Transcriptase (200 U/μL) | 50 μL | 250 μL |
產(chǎn)品應(yīng)用
本產(chǎn)品適用于RT-PCR、RT-qPCR、RT-LAMP、RNA-seq、cDNA合成等實驗，逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)溫度最高可達70℃。
儲存條件
-25~-15℃保存，有效期18個月。
使用說明
第一鏈cDNA合成操作步驟
1. RNA變性（此步為可選步驟，RNA變性有助于打開二級結(jié)構(gòu)，可在很大程度上提高第一鏈cDNA的產(chǎn)量。）
組分 | 使用量 |
RNase free ddH2O | to 13 μL |
Oligo (dT)18 (50 μM) or Random Primers (50 μM) or Gene Specific Primers (2 μM) | 1 μL or 1 μL or 1 μL |
模板RNA | Total RNA: 10 pg - 5 μg或mRNA: 10 pg - 500 ng |
65℃加熱5 min，迅速置于冰上冷卻2 min。簡短離心收集反應(yīng)液后，加入下表中的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液，并輕輕吹打混勻。
2. 逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)體系配制（20 μL體系）
組分 | 使用量 |
上一步的反應(yīng)液 | 13 μL |
5×reaction Buffer | 4 μL |
dNTP Mix (10 mM) | 1 μL |
Hifair® Super Reverse Transcriptase (200 U/μL) | 1 μL |
RNase inhibitor (40 U/µL) | 1 μL |
3. 逆轉(zhuǎn)錄程序設(shè)置
溫度 | 時間 |
25℃* | 5 min |
50-70℃ | 15-30 min |
85℃** | 5 min |
*當使用Random Primers時，需25℃，孵育5 min；若使用Oligo (dT)18或Gene Specific Primers，此步可省略。
**85℃加熱5 min，目的是使逆轉(zhuǎn)錄酶失活，可根據(jù)實際情況進行設(shè)置。
逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物可立即用于后續(xù)PCR或qPCR反應(yīng)，也可-20℃短期保存，若需長期保存，建議分裝后，于-80℃保存，避免反復凍融。
注意事項
1. 請保持實驗區(qū)域潔凈；操作時需穿戴干凈的手套、口罩；實驗所用耗材均需保證RNase free，以防止RNase污染。
2. 所有操作均應(yīng)在冰上進行，防止RNA降解。
3. 為保證高效率逆轉(zhuǎn)錄，建議使用高質(zhì)量的RNA樣本。
4. 本產(chǎn)品僅用作科研用途。
5. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
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