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        1. 翌圣生物科技(上海)股份有限公司

          初級(jí)會(huì)員·12年

          聯(lián)系電話

          400-6111-883

          您現(xiàn)在的位置: 翌圣生物科技(上海)股份有限公司>>分子生物學(xué)>>核酸合成與提取>> 13906ES65RT-LAMP pH Sensitive Dyestuff Kit
          13906ES65RT-LAMP pH Sensitive Dyestuff Kit
          參考價(jià): 面議
          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          • 13906ES65 產(chǎn)品型號(hào)
          • Yeasen/翌圣生物 品牌
          • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
          • 上海市 所在地

          訪問次數(shù):495更新時(shí)間:2022-06-01 11:37:30

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          初級(jí)會(huì)員·12年
          聯(lián)人:
          曹女士
          話:
          400-6111-883
          機(jī):
          后:
          4006-111-883
          真:
          86-21-34615995
          址:
          上海市浦東新區(qū)天雄路166弄1號(hào)3樓
          網(wǎng)址:
          www.yeasen.com

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介
          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100t
          貨號(hào) 13906ES65 應(yīng)用領(lǐng)域 制藥,綜合
          本產(chǎn)品將LAMP可視光染料整合到buffer中,buffer中含dATP、dCTP、dGTP和dUTP等Bst II DNA Polymerase擴(kuò)增必須的組分,同時(shí)包含pH 敏感指示劑
          產(chǎn)品介紹

          • 產(chǎn)品信息

             

            產(chǎn)品名稱

            產(chǎn)品編號(hào)

            規(guī)格

            價(jià)格(元)

            RT-LAMP pH Sensitive Dyestuff Kit

            13906ES65

            100 T

            1,795.00

            13906ES80

            1,000 T

            15,795.00

            13906ES92

            10,000 T

            135,795.00

             

            產(chǎn)品描述

             

            本產(chǎn)品將LAMP可視光染料整合到buffer中,buffer中含dATP、dCTP、dGTP和dUTP等Bst II DNA Polymerase擴(kuò)增必須的組分,同時(shí)包含pH 敏感指示劑,試劑盒含有無(wú)甘油Bst II DNA Polymerase、UDGase、RT enzyme等,可用于凍干反應(yīng)體系的配制;同時(shí)減少了加樣操作,降低操作誤差,在極大程度上抑制假陽(yáng)性反應(yīng),提高檢測(cè)的準(zhǔn)確度。本試劑盒具有較高的擴(kuò)增效率和靈敏度,擴(kuò)增結(jié)果可肉眼判斷,陽(yáng)性反應(yīng)孔為橙黃色,陰性反應(yīng)為洋紅色,反差極大。

             

            產(chǎn)品組分

             

            組分編號(hào)

            組分名稱

            產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格

            13906ES65 (100 T)

            13906ES80 (1,00T)

            13906ES92 (10,000 T)

            13906-A

            2.5×pH Sensitive Reation Buffer

            mL

            10 mL

            100 mL

            13906-B

            無(wú)甘油RT酶Mix

            30 μL

            30μL

            3 mL

            13906-C

            無(wú)甘油Bst酶

            50 μL

            500 μL

            5 mL

             

            運(yùn)輸保存方法

             

            Part I:組分13906-A【2.5×pH Sensitive Reation Buffer】干冰運(yùn)輸,-20°C保存,有效期6個(gè)月。

            Prat II:組分13906-B\C【無(wú)甘油RT酶Mix\Bst酶】冰袋運(yùn)輸,4°C保存,有效期6個(gè)月。

             

            注意事項(xiàng)

             

            1. 使用本試劑前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說明書。

            2整個(gè)實(shí)驗(yàn),應(yīng)規(guī)范操作,包括反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣。

            3為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

             

            使用方法

             

            1. 待檢樣本準(zhǔn)備

            核酸提取后樣本:直接作為模板,加入反應(yīng)體系中。

            煮沸法:臨床采集的拭子樣本直接放入水中,置于95°C水浴鍋或金屬浴中進(jìn)行5 min的熱裂解,釋放核酸,混勻后即可作為模板加入反應(yīng)體系中。

            】:1)處理樣本的試劑不能使用強(qiáng)酸或強(qiáng)堿的核酸釋放劑,若必須使用,則樣本處理完后,需將樣本的pH調(diào)節(jié)至8.0。

            2)加入的樣本中,避免使用Tris-HCl等高濃度的緩沖體系,避免pH指示劑不能發(fā)生變色,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果判讀。

            2. 反應(yīng)體系

            A組分從-20°C取出,溶解后顛倒混勻,瞬時(shí)離心確保所有液體落到管底。根據(jù)待檢測(cè)樣品量,配制如下體系(通常實(shí)驗(yàn)需要設(shè)置陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照):

            組分

            單次反應(yīng)體積μL

            終濃度

            2.5×pH Sensitive Reation Buffer

            10

            1× 

            Bst酶

            0.5

            0.32 U/µL

            RT酶Mix

            0.3

            -

            10×Primers 2

            2.5

            1× 

            模板3

            10 ng-1 µg

            -

            加ddH2O至

            25

            -

            】:

            1)陰性對(duì)照推薦設(shè)置空白(不加模板)對(duì)照以及NTC(一般為水)對(duì)照。

            2)10×Primers16 µM FIP/BIP,2 µM F3/B34 µM Loop F/B each。

            3)模板加入量在1-8 µL內(nèi)調(diào)整;推薦模板RNA溶解于DEPC水中

            3. 加樣

            1如果反應(yīng)是在水浴鍋中進(jìn)行,則每管加入20 μL礦物油(自備),以防止液體蒸發(fā)導(dǎo)致結(jié)果的誤差。如果反應(yīng)是在PCR儀中進(jìn)行,不需要加礦物油(請(qǐng)開啟熱蓋)。

            2)為避免污染,建議用戶在超凈臺(tái)中配制組分,在其他房間的通風(fēng)櫥中加入模板以免出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。

            3由于本試劑使用的是pH指示劑法,該試劑中的緩沖液能力較弱,試劑不可長(zhǎng)期接觸空氣,否則會(huì)吸附空氣中的二氧化碳致使試劑變酸,導(dǎo)致試劑顏色變淺,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果判讀。

            4. 反應(yīng)條件

            溫度

            時(shí)間

            作用

            25-37°C

            2-5 min

            降解含U模板

            60-65°C

            30 min

            恒溫?cái)U(kuò)增

            85°C

            5 min

            失活

            】:

            1)本試劑盒所用酶對(duì)溫度非常敏感,強(qiáng)烈建議使用PCR儀操作;如用水浴鍋,應(yīng)先加熱使其達(dá)到規(guī)定溫度后再反應(yīng)。溫差超過2°C,將導(dǎo)致擴(kuò)增效率降低,使陽(yáng)性反應(yīng)無(wú)法在說明書規(guī)定的時(shí)間內(nèi)洋紅色變成橙黃色。

            2)反應(yīng)溫度需要根據(jù)引物的Tm值進(jìn)行調(diào)整。

            3)反應(yīng)時(shí)間依據(jù)模板濃度而定,低濃度模板可能需要60 min時(shí)間才能有比較明顯的反應(yīng)。

            5. 結(jié)果判斷

            反應(yīng)30 min后,立刻取出反應(yīng)管,待降溫至室溫后,置于光線良好的環(huán)境中觀察(建議以白紙作為背景)。如反應(yīng)液為洋紅色,則為陰性結(jié)果;如反應(yīng)液為橙黃色則為陽(yáng)性結(jié)果。

            【注】:反應(yīng)的時(shí)間必須準(zhǔn)確計(jì)時(shí),超過說明書規(guī)定的反應(yīng)時(shí)間可能會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性。反應(yīng)管不可開蓋,否則會(huì)污染,影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

             

            HB220518





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