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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 500U |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 10611ES76 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè) |
產品介紹
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） |
UCF.ME® Deoxyribonuclease I (DNase I) GMP-grade | 10611ES76 | 500 U | 645 |
10611ES84 | 2000 U | 1965 | |
10611ES92 | 10000 U | 6455 |
產品描述
Deoxyribonuclease I (DNase I) 脫氧核糖核酸酶I是一種核酸內切酶，可消化單鏈及雙鏈DNA產生單脫氧核苷酸或單鏈或雙鏈的寡脫氧核苷酸。它可使磷酸二酯鍵發(fā)生水解從而產生含有5'-磷酸基團和3'-OH基團的單脫氧核苷酸和寡脫氧核苷酸，平均消化產物最小為多聚四核苷酸。DNase I可催化多種形式DNA，如單鏈DNA、雙鏈DNA，甚至染色質（其切割速率受組蛋白影響）。最佳的工作pH范圍是7-8，DNase I的活性依賴于Ca2+，并可被二價金屬離子如Co2+，Mn2+，Zn2+等激活。5 mM Ca2+可保護酶使其不被水解。在Mg2+存在下，該酶可隨機識別和切斷DNA任一條鏈上的任意位點；而在Mn2+存在的條件下，可同時識別DNA的兩條鏈并在幾乎相同的位點進行切割形成平末端，或1-2個核苷酸突出的粘末端。DNase I廣泛應用于不含DNA的RNA制備；去除體外轉錄之后的模板DNA；在RT-PCR及RT-qPCR反應前制備不含DNA的RNA；結合DNA聚合酶I通過切口移位進行DNA標記；DNA片段化文庫構建。
本品是按照 GMP 工藝要求生產，產品以無菌液體形式提供。
產品性質
來源 | 重組E. coli |
最適溫度 | 37℃ |
蛋白純度 | ≥95% |
RNA酶殘留 | 10 U未檢出（陰性） |
宿主蛋白殘留 | <50 ppm |
細胞內毒素 | <0.05 EU/30 U |
儲存緩沖液 | 10 mM Tris-HCl pH 7.6，2 mM CaCl2，50%甘油 |
活性單位定義 | 37℃、10 min內使1 μg的質粒DNA*降解所需要的酶量。 |
【注】：具體產品質檢數據及更多指標請查看批次質檢報告。
產品組分
組分編號 | 組分名稱 | 產品編號/規(guī)格 | ||
10611ES76 (500 U) | 10611ES84 (2000 U) | 10611ES92（10000 U） | ||
10611 | Deoxyribonuclease I (DNase I) | 250 μL | 1 mL | 5 mL |
運輸和保存方法
干冰運輸。-20℃保存，有效期一年。推薦分裝保存，避免反復凍融。
注意事項
1、酶使用時宜存放在冰盒內或冰浴上，使用完畢后宜立即放置于-20℃保存。
2、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
應用實例
反應體系：使用RNase-free離心管及槍頭配制如下反應體系：
組分 | 體積（μL） |
10×DNase I Buffer | 1 μL |
DNase I | 1 μL |
RNA | X |
RNase-free ddH2O | Up to 10 μL |
【注】：10×DNase I Buffer配方為10 mM Tris-HCl, 2.5 mM MgCl2,0.5 mM CaCl2, pH7.6@25℃。
反應條件：37℃，15-30 min后，加入終濃度2.5mM EDTA溶液混勻后65℃ 10 min。處理后的模板可用于后續(xù)RT-PCR等反應。
DNase I失活或抑制：加入EDTA至終濃度為2.5 mM后，65℃加熱10 min可使DNase I失活。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金屬離子螯合劑，達到毫摩爾/升濃度的鋅離子，0.1%的SDS，DTT、巰基乙醇等還原劑，50-100 mM以上鹽濃度均對DNase I有顯著抑制作用。
HB220325
