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13775ES60Lyo-nCoV Multiplex One Step RT-qPCR Kit (with MgCl
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 13775ES60 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：285更新時(shí)間：2023-03-15 08:57:54
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | 13775ES60 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） | *（元） |
Hieff Unicon® V Lyo-nCoV Multiplex One Step RT-qPCR Kit (with MgCl2) | 13775ES60 | 100 T | 3565.00 | 1100.00 |
13775ES80 | 1000 T | 28515.00 | 9800.00 | |
13775ES92 | 10000 T | 228115.00 | 78400.00 |
產(chǎn)品描述
Hieff Unicon® V Lyo-nCoV Multiplex One Step RT-qPCR Kit (with MgCl2) 是以RNA為模板進(jìn)行多重定量PCR反應(yīng)的試劑盒。在實(shí)驗(yàn)的過程中，逆轉(zhuǎn)錄和定量PCR在同一反應(yīng)管中進(jìn)行，簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作，降低了污染的風(fēng)險(xiǎn)。*的Buffer和酶的設(shè)計(jì)，可用于一步法RT-qPCR凍干反應(yīng)體系的配制和產(chǎn)品設(shè)計(jì)。
本試劑盒利用耐熱Hifair® V Reverse Transcriptase高效合成第一鏈cDNA，并利用UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase進(jìn)行定量擴(kuò)增。本試劑盒主要包含優(yōu)化的凍干Buffer，Enzymes Mix等，并添加了有效抑制非特異性PCR擴(kuò)增的因子和提升多重qPCR反應(yīng)擴(kuò)增效率的因子，能夠在保證引物擴(kuò)增效率的同時(shí)，進(jìn)行多重?zé)晒舛繑U(kuò)增反應(yīng)。
本試劑盒酶mix中匹配凍干保護(hù)劑，可以直接用于凍干。
產(chǎn)品組分
組分編號(hào) | 組分名稱 | 產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格 | ||
13775ES60 (100 T) | 13775ES80 (1000 T) | 13775ES92 (10000 T) | ||
13775-A | 4×Hifair® V Lyo-Buffer | 600 μL | 6 mL | 60 mL |
13775-B | MgCl2 (25 mM) | 500 μL | 5 mL | 50 mL |
13775-C | 10×Hifair® V Lyo-Enzyme Mix | 240 μL | 2.4 mL | 24 mL |
【注】：1) 4×Hifair® V Lyo-Buffer為Lyo-nCoV Multiplex One Step RT-qPCR Probe Buffer的簡(jiǎn)寫。
2) 10×Hifair® V Lyo-Enzyme Mix主要包含有耐熱Hifair® V Reverse Transcriptase和UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase。
適用機(jī)型
ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™，ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 and 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex，Stratagene MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™，Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™，Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s; Qiagen Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000，Roche Applied Science LightCycler® 480, LightCycler® 2.0; Lightcycler® 96，Thermo Scientific PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler®; Illumina Eco qPCR
運(yùn)輸與保存方法
冰袋運(yùn)輸。-20°C保存，有效期9個(gè)月。本品避免反復(fù)凍融。建議分裝保存。
注意事項(xiàng)
實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)使用RNase free耗材。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
反應(yīng)體系（以25 μL為例）
組分 | 體積（μL） | 終濃度 |
4×Hifair® V Lyo-Buffer | 6 | 1× |
10×Hifair® V Lyo-Enzyme Mix | 2.4 | - |
MgCl2 (25 mM) | 3 | |
Primer Mix (10 μM) | 各0.4 | 0.16 μM |
Probe Mix (10 μM) | 各0.2 | 0.08 μM |
模板 RNA | 1-5 | - |
RNase Free H2O | to 25 | - |
【注】：使用前務(wù)必充分混勻，避免劇烈震蕩產(chǎn)生過多氣泡。
a) 引物濃度：Primer Mix中包含多對(duì)引物，通常每條引物終濃度可以根據(jù)情況在0.1-1.0 μM間進(jìn)行調(diào)整。
b) 探針濃度：Probe Mix中包含多條不同熒光信號(hào)的探針，每條探針的濃度可根據(jù)具體情況在50-300 nM間調(diào)整。
c) 模板稀釋：qPCR靈敏度*，建議將模板進(jìn)行稀釋使用，控制Ct值在20-35之間適宜。
d) 反應(yīng)體系：推薦使用25 μL或50 μL，以保證目的基因擴(kuò)增的有效性和重復(fù)性。
e) 體系配制：請(qǐng)于超凈工作臺(tái)內(nèi)配制，并使用無核酸酶殘留的槍頭、反應(yīng)管；推薦使用帶濾芯的槍頭。避免交叉污染和氣溶膠污染。
標(biāo)準(zhǔn)擴(kuò)增程序
反應(yīng)階段 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) | |
1 | 逆轉(zhuǎn)錄 | 50°Ca | 10 min | 1 |
2 | 預(yù)變性 | 95°C | 5 min | 1 |
3 | 擴(kuò)增反應(yīng) | 95°C | 15 sec | 45 |
60°Cb | 30 secc |
【注】：
a) 逆轉(zhuǎn)錄：42°C或者50°C均可，時(shí)間 10-15 min。
b) 擴(kuò)增反應(yīng)：擴(kuò)增反應(yīng)溫度根據(jù)設(shè)計(jì)的引物Tm值進(jìn)行調(diào)整。CDC*推薦的ORF1ab和N引物，退火溫度建議≥60°C。
c) 熒光信號(hào)采集：不同的qPCR檢測(cè)儀器所需的熒光信號(hào)采集時(shí)間不同，請(qǐng)根據(jù)最短時(shí)間限制進(jìn)行設(shè)置。
本試劑可以直接用于凍干，也可以進(jìn)一步在此基礎(chǔ)上針對(duì)不同引物，進(jìn)一步摸索輔料，本試劑的標(biāo)準(zhǔn)凍干程序如下：
溫度 | 斜率時(shí)間 | 時(shí)間 | 真空 mbar | 備注 | ||
預(yù)凍 | 1 | -45°C | —— | 4 h | —— | 常溫最快速率降溫 |
2 | -45°C | —— | —— | 保持，根據(jù)包材驗(yàn)證保持時(shí)間 | ||
真空 | 3 | -45°C | —— | 0.01 | ||
升華階段 | 4 | -40°C | 1 h | 10 h | 0.01 | 無斜率控制型凍干機(jī)，可分6個(gè)階段升溫 |
5 | 0°C | 1 h | 10 h | 0.01 | ||
6 | 0.01 | 無斜率控制型凍干機(jī)，可分6個(gè)階段升溫 | ||||
解析干燥 | 7 | 25°C | 1 h | 4 h | 0 | |
含水量控制 | 8 | 壓升測(cè)試重試時(shí)間：30 min | 壓升測(cè)試：2 min<5 Pa | |||
制品保存溫度 | 9 | 0°C | 1 | X | 0 | |
注意事項(xiàng)：
1. 輔料配方發(fā)生微量的變化，需重新測(cè)定凍干參數(shù)，并做相應(yīng)調(diào)整。
2. 凍干設(shè)備要求：
冷阱盤管表面溫度≤ -60°C
板層溫度≤-45°C，溫度均一性±1°C
可做壓升測(cè)試（凍干生產(chǎn)前，做泄漏率測(cè)試）
3. 環(huán)境要求：
溶液分裝及配置盡量在萬級(jí)層流保護(hù)下進(jìn)行，環(huán)境空間塵埃掉落進(jìn)溶液中成為凍干過程的晶核，影響溶液的結(jié)晶的過冷度，導(dǎo)致產(chǎn)品質(zhì)量不一致性。
4. 真空控制
摻氣方式：建議摻入氣體為高純氮?dú)?/span>
5. 凍干試劑MIX工藝參數(shù)設(shè)定參考（凍干設(shè)備升華效率≥1 mm/小時(shí)）。
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13743ES92 | 10000 T | 13555.00 | |
13743ES98 | 100000 T | 95885.00 |
HB220113
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