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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 24 T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 12805ES24 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產業(yè) |
產品介紹
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規(guī)格 | 價格 |
Hieff NGS® Novel DNA Ligation Module for kit 快速 DNA 連接模塊 | 12805ES24 | 24T | 3265 |
12805ES96 | 96T | 10865 | |
12805ES98 | 1000T | - |
產品描述
Hieff NGS® Novel DNA Ligation Module for kit 是針對 Illumina® & MGI® 高通量測序平臺文庫構建專業(yè)設計的 DNA 連接模塊，其中最大的亮點為本產品采用一款我公司自主研發(fā)的高效連接酶 Novel T4 DNA ligase。本產品可在雙鏈平末端 DNA 片段或雙鏈 3′-dA DNA 片段的兩端連接 Illumina® & MGI® 測序平臺適用的 DNA 接頭，具有連接效率高、簡便、可實現自動 化等優(yōu)勢。本產品中提供的所有試劑組分，都經過嚴格的質量與功能驗證，最高程度保障產品優(yōu)異性能與批間穩(wěn)定性。
產品組分
產品編號 | 組分名稱 | 產品編號/規(guī)格 | ||
12805ES24 | 12805ES96 | 12805ES98 | ||
12805-A | Novel T4 DNA Ligase | 120 μL | 480 μL | 5×1 mL |
12805-B | Ligation Enhancer | 720 μL | 4×720 μL | 30 mL |
運輸與保存方法
冰袋運輸。
-20℃保存，效期一年。
注意事項
1.為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2.本產品僅用作科研用途！
使用方法
1.Adapter 的質量和使用濃度直接影響連接效率及文庫產量。Adapter 用量過高可能會產生較多 Adapter Dimer；用量較低可 能會影響連接效率及文庫產量。表 1 列舉了使用本試劑盒，不同 Input DNA 量推薦的 Adapter 使用量。
表 1 500 pg-1 μg Input DNA 推薦的 Adapter 使用濃度
【注】：Input DNA 摩爾數（pmol）≈ Input DNA 質量(ng)/ [0.66 × Input DNA 平均長度（bp）]。
2.目前主流的合并法 DNA 建庫試劑盒，其末端修復和加 A 處理后一般不純化，直接進行接頭連接。本試劑盒可與主流的 商業(yè)化末端修復/加 A 體系兼容，進行接頭連接。反應體系請參考如下配制，渦旋瞬離后置于 20℃，反應 15 分鐘即可。
表 2 Adapter Ligation 體系
名稱 | 體積（μL） |
dA-tailed DNA | 60 |
Ligation Enhancer | 30* |
Novel T4 DNA Ligase | 5 |
DNA Adapter | 5** |
【注】：*對于 3.3×Fast Ligation Buffer，請上下顛倒、振蕩，充分混勻并瞬時后離心使用。
**根據自身需求加入適量的接頭，本公司接頭濃度與常規(guī)商業(yè)化試劑盒一致，皆為 15 μM。
【接頭添加計算舉例】：當 Input DNA 為 100 ng，Input DNA 長度為 300 bp 時，接頭應該添加多少？
第一步，計算 Input DNA 摩爾數。公式：Input DNA 摩爾數（pmol）≈ Input DNA 質量(ng)/ [0.66 × Input DNA 平均長度（bp）]；
Input DNA 摩爾數（pmol）=100÷（0.66×300）=0.5 pmol；
第二步，計算接頭添加摩爾數。根據注意事項三表 2 查詢接頭添加比例；
根據表 2，查得 Input DNA 100ng 時接頭添加比例 100:1，則接頭添加摩爾數=100×0.5 pmol=50 pmol；
第三步，計算接頭添加體積。接頭濃度=15 μmol/L（如使用其他接頭，濃度需要依據其他接頭濃度參數）；
接頭添加體積=接頭添加摩爾數（50 pmol）÷接頭濃度（15 μmol/L）=3.34 μL（注：15 μmol/L=15 pmol/μL）；
綜上，接頭可添加 3.4 μL，加 1.6 μL 水補齊至 5 μL。（注：接頭最大加入體積不超過 5 μL。
HB220118
