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- 20157ES25 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):474更新時間:2022-02-10 11:45:13
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- 網(wǎng)址:
- www.yeasen.com
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 25KU |
---|---|---|---|
貨號 | 20157ES25 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
UCF·METM UltraNuclease GMP-grade全能核酸酶
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 儲存 | 價格(元) |
UCF·METM UltraNuclease GMP-grade全能核酸酶 | 20157ES25 | 25 KU | -20℃ | 1125.00 |
20157ES50 | 50 KU | -20℃ | 1965.00 | |
20157ES60 | 100 KU | -20℃ | 3245.00 | |
20157ES80 | 1 MU (1000 KU) | -20℃ | 27585.00 | |
20157ES90 | 5 MU (5000 KU) | -20℃ | 118655.00 |
產(chǎn)品描述
UltraNuclease(全能核酸酶),又稱非限制性核酸內切酶、廣譜核酸酶;是一種來源于Serratia Marcescen的非特異性核酸內切酶,可在鏈內任意核苷酸間進行切割,將核酸*消化成2-5個堿基長度的5'-單磷酸寡核苷酸,能夠在非常廣泛的條件下(6 M Urea,0.1 M Guanidine HCl,0.4% Triton X100,0.1% SDS,1 mM EDTA,1 mM PMSF)降解各種形式的(雙鏈,單鏈,線狀,環(huán)狀,天然或變性)DNA和RNA,廣泛用于去除生物制品中的核酸。
本品經(jīng)基因工程改造在Escherichia coli (E. coli)中表達純化并在GMP環(huán)境下制備,不僅可在科學研究中降低細胞上清和細胞裂解液的粘度,提高蛋白純化效率及功能研究;還可以應用在病毒純化、疫苗生產(chǎn)、蛋白和多糖類制藥工業(yè)作為宿主殘留核酸去除試劑,將宿主殘留核酸降至皮克(pg)級別從而提高生物制品功效和安全性;并且可以有效防止細胞治療和疫苗研究中人外周血單核細胞(PBMC)的結團。
本品以無菌液體酶的形式提供,儲存于緩沖液(20 mM Tris-HCl pH 8.0,2 mM MgCl2,20 mM NaCl,50%甘油)中,無色透明液體。
產(chǎn)品性質
來源 | E. coli |
生產(chǎn)管理標準 | ISO9001/GMP |
分子量(Molecular Weight) | 26.5 kDa |
等電點 | 6.85 |
純度(Purity) | ≥ 99%(SDS-PAGE) |
酶活(Enzyme Activity) | ≥ 250 U/μL |
比活(Specific Activity) | ≥ 1.5×106 U/mg蛋白 |
最適pH(Optimum pH) | 8.0(工作范圍pH 6-10) |
最適溫度(Optimum Temperature) | 37℃(工作范圍0-42℃) |
輔助因子(Cofactor) | 1-10 mM Mg2+ |
蛋白酶活性(Protease) | Undetected |
無菌檢查(Sterility) | Undetected |
內毒素(Endotoxin) | < 0.25EU/1000U |
宿主蛋白殘留(Host protein) | < 10ppm(μg/mL) |
儲存緩沖液(Storage Buffer) | 20 mM Tris-HCl pH8.0,2 mM MgCl2,20 mM NaCl,50%甘油 |
活性單位定義(Unit Definition) | 在37℃,pH 8.0反應條件下,2.625 mL反應體系中,在30 min內使△A260吸收值變化1.0(相當于*消化37 μg鮭魚精DNA成為寡核苷酸)所用的酶量定義為一個活性單位(U)。 |
運輸和保存方法
冰袋運輸。-20℃保存,有效期1年。若是打開包裝后并4℃放置超過一周,建議過濾除菌防止微生物污染。
注意事項
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
推薦使用條件
條件參數(shù) | 最///佳條件 | 有效條件 |
Mg2+ | 1-2 mM | 1-10 mM |
pH | 8-9 | 6-10 |
溫度 | 37℃ | 0-42℃ |
DTT | 0-100 mM | >0 mM |
巰基乙醇 | 0-100 mM | >0 mM |
單價陽離子 | 0-20 mM | 0-150 mM |
磷酸根離子 | 0-10 mM | 0-100 mM |
推薦使用量及處理時間
UltraNuclease用量(終濃度) | 處理時間 |
0.25 U/mL | > 1 h |
2.5 U/mL | 15 min |
25 U/mL | 2 min |
使用方法
樣本準備
貼壁細胞:去除培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞,去除上清。
懸浮細胞:離心收集細胞,用PBS清洗細胞,6,000 rpm 離心10 min,收集沉淀。
大腸桿菌:離心收集菌體,用PBS清洗1次,8,000 rpm 離心5 min,收集沉淀。
2、樣品處理
將收集到的細胞沉淀按照質量(g)與體積(mL)比1:(10~20) 的比例進行裂解處理,也可通過在冰上或室溫通過機械或化學方法裂解細胞(1 g細胞約為109個)。
3、酶的添加
按照250 Units消化1 g細胞沉淀的比例添加UltraNuclease,也可以跟據(jù)上表中的推薦使用量自行選定添加方案,在一定范圍內增加酶量,消化所需時間相應減少。
4、上清獲取
以12,000 rpm的轉速離心30min獲得細胞裂解液上清,再進行后續(xù)相關實驗。
【注】若溶液為高鹽溶液,偏酸性或者偏堿性,含有較高濃度的去垢劑、變性劑,應適當增加酶的用量或延長孵育時間。
相關產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
UCF·METM UltraNuclease全能核酸酶 | 20156ES25 | 25 KU |
20156ES50 | 50 KU | |
20156ES60 | 100 KU | |
UCF·METM UltraNuclease(Endotoxin-free)全能核酸酶 | 20125ES25 | 25 KU |
20125ES50 | 50 KU | |
20125ES60 | 100 KU |
HB210326