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        1. 翌圣生物科技(上海)股份有限公司

          初級(jí)會(huì)員·12年

          聯(lián)系電話

          400-6111-883

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          10299ES40Fast T4 DNA Ligase (400 U/µL)
          參考價(jià): 面議
          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          • 10299ES40 產(chǎn)品型號(hào)
          • Yeasen/翌圣生物 品牌
          • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
          • 上海市 所在地

          訪問(wèn)次數(shù):895更新時(shí)間:2022-02-09 15:28:40

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          初級(jí)會(huì)員·12年
          聯(lián)人:
          曹女士
          話:
          400-6111-883
          機(jī):
          后:
          4006-111-883
          真:
          86-21-34615995
          址:
          上海市浦東新區(qū)天雄路166弄1號(hào)3樓
          網(wǎng)址:
          www.yeasen.com

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介
          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 40000 U
          貨號(hào) 10299ES40 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 NGS建庫(kù)
          Hieff® Fast T4 DNA Ligase是一款可用于NGS建庫(kù)過(guò)程中DNA///片段和接頭連接的單酶產(chǎn)品,該產(chǎn)品已經(jīng)過(guò)高通量測(cè)序驗(yàn)證,質(zhì)量?jī)?yōu)異。本酶具有高效的連接能力,非常適合復(fù)雜結(jié)構(gòu)核酸片段的連接,比如華大平臺(tái)的Ω接頭。
          產(chǎn)品介紹

          Hieff® Fast T4 DNA Ligase (400 U/µL)

           

          產(chǎn)品信息

          產(chǎn)品名稱

          產(chǎn)品編號(hào)

          規(guī)格

          價(jià)格(元)

          Hieff® Fast T4 DNA Ligase (400 U/µL)

          10299ES40

          40000 U

          983.00

           

          產(chǎn)品描述

          Hieff® Fast T4 DNA Ligase是一款可用于NGS建庫(kù)過(guò)程中DNA///片段和接頭連接的單酶產(chǎn)品,該產(chǎn)品已經(jīng)過(guò)高通量測(cè)序驗(yàn)證,質(zhì)量?jī)?yōu)異。本酶具有高效的連接能力,非常適合復(fù)雜結(jié)構(gòu)核酸片段的連接,比如華大平臺(tái)的Ω接頭。對(duì)于無(wú)需進(jìn)行體系調(diào)整的客戶,推薦選購(gòu)Hieff NGS® Ultima DNA Ligation Module (Cat#12604),其核心組分即為本品。

           

          產(chǎn)品組分

          組分編號(hào)

          組分名稱

          規(guī)格

          10299-A

          Hieff® Fast T4 DNA Ligase (400 U/µL)

          100 µL

          10299-B

          10 × T4 DNA Ligase Buffer

          250 μL

           

          運(yùn)輸和保存方法

          冰袋運(yùn)輸。-20℃保存,有效期2年。

           

          單位定義

          在20 μL的連接反應(yīng)體系中,6 μg的λDNA-Hind Ⅲ分解物在16℃下反應(yīng)30 min時(shí),催化50%以上的DNA///片段發(fā)生連接所需要的酶量定義為1個(gè)活性單位(U)。

           

          質(zhì)量控制

          核酸外切酶殘留檢測(cè):2000 U的本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在37℃下反應(yīng)4小時(shí),DNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。

          核酸內(nèi)切酶殘留檢測(cè):2000 U的本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在37℃下反應(yīng)4小時(shí),DNA電泳譜帶不發(fā)生變化。

           

          注意事項(xiàng)

          1)Buffer在融解時(shí),如果出現(xiàn)少量沉淀屬正常現(xiàn)象,請(qǐng)顛倒混勻后使用。

          2)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

           

          使用方法

          1. 目前主流的合并法DNA建庫(kù)試劑盒,其末端修復(fù)和加A處理后一般不純化,直接進(jìn)行接頭連接。本試劑盒可與主流的商業(yè)化末端修復(fù)加A體系兼容,進(jìn)行接頭連接。反應(yīng)體系請(qǐng)參考如下配制,渦旋瞬離后置于20℃,反應(yīng)15 min即可。

          表1  Adapter Ligation體系

          名稱

          體積(μL)

          dA-tailed DNA

          60

          10 × T4 DNA Ligase Buffer

          10

          50% PEG 6000

          10*

          DNA Adapter

          X**

          Hieff® Fast T4 DNA Ligase

          1-5***

          ddH2O

          To 100

          【注】:*試劑盒內(nèi)未提供50% PEG 6000,需自行準(zhǔn)備。

          **接頭用量參考表2。

          ***Hieff® Fast T4 DNA Ligase用量可根據(jù)需要添加1-5 μL。

          2. Adapter的質(zhì)量和使用濃度直接影響連接效率及文庫(kù)產(chǎn)量。Adapter用量過(guò)高可能會(huì)產(chǎn)生較多Adapter Dimer;用量較低可能會(huì)影響連接效率及文庫(kù)產(chǎn)量。表2列舉了使用本試劑盒,不同Input DNA量推薦的Adapter使用量。

          表2  500 pg-1 μg Input DNA推薦的Adapter使用濃度

          Input DNA

          Adapter : Input DNA摩爾比

          Input DNA

          Adapter : Input DNA摩爾比

          1 μg

          10:1

          50 ng

          100:1

          500 ng

          20:1

          25 ng

          200:1

          250 ng

          40:1

          1 ng

          200:1

          100 ng

          100:1

          500 pg

          400:1

          【注】:Input DNA摩爾數(shù)(pmol)≈ Input DNA質(zhì)量(ng)/ [0.66 × Input DNA平均長(zhǎng)度(bp)]。

          【接頭添加計(jì)算舉例】當(dāng)Input DNA為100 ng,Input DNA長(zhǎng)度為300 bp時(shí),接頭應(yīng)該添加多少?

          第—,計(jì)算Input DNA摩爾數(shù)。公式:Input DNA摩爾數(shù)(pmol)≈ Input DNA質(zhì)量(ng)/ [0.66 × Input DNA平均長(zhǎng)度(bp)];

          Input DNA摩爾數(shù)(pmol)=100 ÷(0.66×300)=0.5 pmol;

          第二步,計(jì)算接頭添加摩爾數(shù)。根據(jù)表2查詢接頭添加比例;

          根據(jù)表2,查得Input DNA 100ng時(shí)接頭添加比例100:1,則接頭添加摩爾數(shù)=100×0.5 pmol=50 pmol;

          第三步,計(jì)算接頭添加體積。接頭濃度=15 μmol/L(如使用其他接頭,濃度需要依據(jù)其他接頭濃度參數(shù));

          接頭添加體積=接頭添加摩爾數(shù)(50 pmol)÷接頭濃度(15 μmol/L)=3.34 μL(注:15 μmol/L=15 pmol/μL)

          綜上,接頭可添加3.4 μL。(注:接頭大加入體積不超過(guò)5 μL)相關(guān)產(chǎn)品

          產(chǎn)品名稱

          貨號(hào)

          規(guī)格

          價(jià)格(元)

          Hieff NGS® Ultima FR DNA Library Prep Kit for Illumina 

          12199ES08/24/96

          8/24/96 T

          2553/6783/25563

          Hieff NGS® Ultima Endprep Mix

          12605ES24/96

          24/96 T

          4233/14333

          Hieff NGS® Ultima DNA Ligation Module

          12604ES24/96

          24/96 T

          3263/10863

          Hieff NGS® FFPE DNA Repair Reagent

          12606ES24/96

          24/96 T

          2253/7633

          Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 1

          12615ES04/16

          12×4/12×16 T

          1256/4536

          Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 2

          12616ES04/16

          12×4/12×16 T

          1256/4536

          Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 3

          12617ES04/16

          12×4/12×16 T

          1256/4536

          Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 4

          12618ES04/16

          12×4/12×16 T

          1256/4536

          2×Super Canace® Ⅱ High-Fidelity Mix for Library Amplification

          12621ES24/96

          24/96 T

          583/1783

          Hieff NGS® DNA selection Beads(Superior Ampure XP alternative)

          12601ES08/56

          5/60 mL

          986/6286

          dsDNA HS assay kit for Qubit®

          12640ES60/76

          100/500 T

          686/2696

          HB200710



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