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參考價(jià): | 面議 |
- 20324ES62 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):616更新時(shí)間:2022-02-10 11:49:16
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號(hào) | 20324ES62 |
---|---|---|---|
應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
PAGE Gel Quick Preparation Kit (8%)
免封閉PAGE凝膠快速制備試劑盒(8%)
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
PAGE Gel Quick Preparation Kit (8%) PAGE凝膠快速制備試劑盒(8%) | 20324ES62 | 125 mini gels | 312.00 |
產(chǎn)品描述
蛋白電泳經(jīng)常使用聚丙烯酰胺凝膠(PAGE凝膠)來實(shí)現(xiàn)蛋白分離,此類凝膠一般由濃縮膠和分離膠兩部分組成,前者起到將蛋白樣品進(jìn)行濃縮的作用,后者則是根據(jù)凝膠所使用的丙烯酰胺單體和N,N-亞甲基雙丙烯酰胺(甲叉丙烯酰胺)交聯(lián)劑的濃度不同從而分離不同大小范圍的蛋白質(zhì)。
本試劑盒提供了一種快速制備PAGE凝膠所需的各種試劑,用戶只需自備制膠設(shè)備即可配膠,大大簡(jiǎn)化了制膠過程,此外,本品還具有以下特點(diǎn):1)制膠速度快——少僅需2 min即可灌制多塊凝膠,無需計(jì)算所需溶液量,無需稀釋;2)彩色濃縮膠——濃縮膠呈彩色,為點(diǎn)樣提供大便利,所含顏色配方不影響電泳、染色及轉(zhuǎn)膜等后續(xù)應(yīng)用;3)無異味——無需使用TEMED,避免惡臭氣味;4)穩(wěn)定性高——試劑盒配套提供的硫酸銨催化劑溶液屬改良型APS,其穩(wěn)定性和催化效能都得到大大提升。5)新增功能——無需封閉分離膠,直接添加濃縮膠(熟讀配膠步驟)。
本試劑盒所配制凝膠只能用于變性PAGE凝膠電泳,該規(guī)格可配制約125塊mini膠(以0.75 mm厚度膠計(jì)算)。
產(chǎn)品組分
類別 | 組分編號(hào) | 組分名稱 | 產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格 | 保存方式 |
20324ES62(125 gels) | ||||
Part Ⅰ | 20324-A | 8%-分離膠緩沖液 | 250 mL | 4℃ |
20324-B | 8%-分離膠溶液 | 250 mL | 4℃ | |
20324-C | 8%-彩色濃縮膠緩沖液 | 80 mL | 4℃ | |
20324-D | 8%-濃縮膠溶液 | 80 mL | 4℃ | |
20324-E | 制膠杯 | 3個(gè) | 4℃ | |
Part Ⅱ | 20324-F | 改良型過硫酸銨溶液 | 8 mL | -20℃ |
運(yùn)輸與保存方法
冰袋運(yùn)輸, 4℃保存。其中F組分改良型過硫酸銨溶液如果長(zhǎng)時(shí)間不用,需保存于-20℃,有效期12個(gè)月。
注意事項(xiàng)
1)建議電泳時(shí)電壓在100-120V之間,如需要加快電泳速度,可增加至150V。
2)灌膠前,務(wù)必將凝膠溶液平衡到室溫(如放置幾分鐘),可有效避免凝膠中氣泡的形成。
3)過硫酸銨溶液(改良型)的使用量?jī)H作參考,實(shí)際用量可根據(jù)個(gè)人實(shí)驗(yàn)習(xí)慣和經(jīng)驗(yàn)增加或減少。加入較多量的過硫酸銨可加快凝膠速度,反之亦然。PAGE凝膠的凝聚速度與溫度和過硫酸銨的用量密切相關(guān)。
4)本產(chǎn)品已加入適量TEMED的替代品,如需進(jìn)一步加快凝膠速度,臨配膠前可按需補(bǔ)充適量TEMED。
5)膠的凝固與溫度有顯著的正相關(guān)性。同等條件下,溫度越高,凝固速度越快。
6)彩色濃縮膠在儲(chǔ)存過程中可能會(huì)產(chǎn)生少量沉淀,屬正常現(xiàn)象,請(qǐng)放心使用。
7)改良型過硫酸銨溶液保存于-20℃。為方便吸取使用,已開蓋使用中的過硫酸銨溶液可置于4℃保存。
使用方法:建議配膠時(shí)不要一次性配置太多塊膠,避免來不及添加上層液(推薦多2-3塊)
1 根據(jù)目的蛋白的分子量大小選擇合適的凝膠濃度【參考附表1】
2 制膠流程(以一塊0.75/ 1.0/ 1.5 mm的mini膠為例)
1)取等體積分離膠緩沖液和分離膠溶液混勻,即取兩種溶液各2.0/ 2.7/ 4.0 mL。
2)往步驟1中的混合溶液中加入35/ 45/ 70 μL的改良型過硫酸銨溶液(凝固太快可減半過硫酸銨使用量),充分混勻。
3)將步驟2中的溶液注入制膠玻璃板中。注意加入分離膠后要在2 min內(nèi)將濃縮膠注入凝膠模具內(nèi),且在灌注濃縮膠時(shí)要緩慢,防止?jié)饪s膠與分離膠混合在一起。如果個(gè)人覺得配置困難,也可改編為自行用乙醇封閉之后再進(jìn)行配置濃縮膠。
4)濃縮膠的配置:取等體積濃縮膠緩沖液和濃縮膠溶液混勻,即取兩種溶液各0.5/ 0.75/ 1.0 mL,然后加入10/ 13/ 18 μL的改良型過硫酸銨溶液,充分混勻。
5)注入制膠玻璃板中,插入梳齒(插膠梳時(shí)切勿用力過猛,輕輕插入)。
6)待15 min濃縮膠凝固后,拔去梳齒即可用于電泳。注:請(qǐng)盡量使用新鮮配置的電泳緩沖液。
附表1. 不同濃度SDS-PAGE分離膠參考分離范圍
SDS-PAGE分離膠濃度 | 分離范圍(kDa) |
6%凝膠 | 70-300 |
8%凝膠 | 30-200 |
10%凝膠 | 20-80 |
12.5 %凝膠 | 15-60 |
15%凝膠 | 10-45 |
HB200817