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參考價(jià): | 面議 |
- 19001ES50 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):358更新時間:2022-02-10 11:27:52
- 聯(lián)系人:
- 曹女士
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- 地址:
- 上海市浦東新區(qū)天雄路166弄1號3樓
- 網(wǎng)址:
- www.yeasen.com
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
---|---|---|---|
貨號 | 19001ES50 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品貨號 | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
MolPure® Plasmid Mini Kit 質(zhì)粒小量提取試劑盒 | 19001ES08 | 5T | 詢價(jià) |
19001ES50 | 50T | 183.00 | |
19001ES70 | 200T | 573.00 |
產(chǎn)品描述
MolPure® Plasmid Mini Kit 采用 MolPure® DNA Column P3 和新型的溶液體系,使用常規(guī)堿裂解法分離質(zhì)粒 DNA。提取過程中不需要用到有毒的酚等有機(jī)物抽提,也不需要用到耗時的異丙醇或乙醇沉淀。試劑盒內(nèi)的 MolPure® DNA Column P3 可 特異性吸附質(zhì)粒 DNA,不吸附蛋白質(zhì)、多糖和其它非核酸類物質(zhì),具有高效、快速、方便等特點(diǎn)。提取到的質(zhì)粒 DNA 純度高, 可直接用于后續(xù)酶切、轉(zhuǎn)化、測序等實(shí)驗(yàn)。
試劑盒組分
類別 | 編號 | 組分名稱 | 19001ES08 (5 T) | 19001ES50 (50 T) | 19001ES70 (200 T) |
Part I | 19001-A | RNase A (10 mg/mL) | 15 µL | 125 µL | 500 µL |
Part II | 19001-B | 緩沖液 RS* (RS Buffer P3*) | 1.5 mL | 12.5 mL | 50 mL |
19001-C | 緩沖液 AC (AC Buffer P3) | 500 µL | 5 mL | 20 mL | |
19001-D | DNA 吸附柱 P3 (MolPure® DNA Column P3) | 5 個 | 50 個 | 200 個 | |
19001-E | 2 mL 收集管 (2 mL Collection Tube P3) | 5 個 | 50 個 | 200 個 | |
19001-F | 裂解液 LB (LB Buffer P3) | 1.5 mL | 12.5 mL | 50 mL | |
19001-G | 結(jié)合液 BD (BD Buffer P3) | 1.8 mL | 17.5 mL | 70 mL | |
19001-H | 去蛋白液 PL* (PL Buffer P3* ) | 1.6 mL | 16 mL | 63 mL | |
19001-I | 漂洗液 W* (Wash Buffer*) | 1.3 mL | 13 mL | 50 mL | |
19001-J | 洗脫液 (Elution Buffer) | 1 mL | 10 mL | 20 mL |
運(yùn)輸和保存方法
Part I 組分冰袋運(yùn)輸,-20℃保存;Part II 組分常溫運(yùn)輸,室溫保存。產(chǎn)品有效期 12 個月。
注意事項(xiàng)
避免試劑長時間暴露于空氣中產(chǎn)生揮發(fā)、氧化、pH 值變化,各溶液使用后應(yīng)及時蓋緊蓋子。
注意觀察各溶液是否有析出或渾濁(尤其冬季等室溫為低溫環(huán)境時),可 37℃溫浴復(fù)溶至溶液澄清,避免影響使用效果。
為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
本產(chǎn)品僅作科研用途!
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
自備設(shè)備和試劑:臺式離心機(jī)、振蕩儀、水浴鍋或金屬浴,無水乙醇,離心管等。
除特殊指明外,所有的離心步驟均在室溫完成,使用可以達(dá)到 13,000 rpm 轉(zhuǎn)速的傳統(tǒng)臺式離心機(jī)。
使用前,將 RNase A (10 mg/mL) (19001-A)加入緩沖液 RS*(19001-B)瓶中,充分混勻后使用,并做好標(biāo)記。每次使用后置于 4℃保存。若長期不用,置于-20℃保存。
使用前,須在漂洗液 W*(19001-I)瓶和去蛋白液 PL*(19001-H)中加入量的無水乙醇(規(guī)格:5T加1mL,50T
加10mL,200T加40mL),充分混勻后使用,并做好標(biāo)記。
操作方法
一、樣本預(yù)處理:
取 1.5-4.5 mL 過夜培養(yǎng)的菌液,12,000 rpm 離心 30 s,棄掉上清液,收集菌體。
【注】:對于低拷貝質(zhì)?;颍?/span>10 kb 的質(zhì)粒,建議適當(dāng)加大菌體量,并等比例增加緩沖液 RS*、裂解液 LB 及結(jié)合液 BD 用量。
加入 250 µL 緩沖液 RS*,吹打或渦旋重懸菌體沉淀。
【注】:確保菌體*重懸。
【注】:確保緩沖液 RS*中已添加 RNase A。
加入 250 µL 裂解液 LB,溫和上下翻轉(zhuǎn) 6-8 次以充分裂解菌體,室溫放置 4 min。
【注】:此步驟不宜超過 5 min。
【注】:菌體裂解應(yīng)溫和進(jìn)行,避免造成基因組 DNA 剪切斷裂。
【注】:裂解后的菌液應(yīng)清亮粘稠。若出現(xiàn)渾濁,可能為菌體裂解不*,可考慮減少菌體使用量。
加入 350 µL 結(jié)合液 BD,立即溫和上下翻轉(zhuǎn) 6-8 次充分混勻。室溫放置 2 min。13,000 rpm 離心 10 min,小心收集上清。
【注】:加入結(jié)合液 BD 后立即混勻,以免出現(xiàn)局部沉淀。
二、質(zhì)粒 DNA 提?。?/span>
向 DNA 吸附柱P3 中加入 100 µL 緩沖液 AC,13,000 rpm 離心 1 min,棄掉廢液。
【注】:處理后的 DNA 吸附柱 P3 僅限當(dāng)天使用。
將 DNA 吸附柱P3 套入 2 mL 收集管中,備用。
將上述上清液加入到 DNA 吸附柱 P3 中,12,000 rpm 離心 1 min,棄掉廢液。
【注】:混合液每次最大加入體積 700 µL,可分多次離心。
4.(選做) 加入 500 µL 去蛋白液 PL*,12,000 rpm 離心 1 min,棄廢液。
【注】:確保去蛋白液PL*已添加無水乙醇。
【注】:此步驟為了去除痕量核酸酶等雜質(zhì)。
將 DNA 吸附柱P3 放回收集管,加入 600 µL 漂洗液 W*,12,000 rpm 室溫離心 30 s,棄廢液。
【注】:確保漂洗液 W*已添加無水乙醇。
重復(fù)一遍步驟 5。
將 DNA 吸附柱P3 放回收集管,空柱 13,000 rpm 室溫離心 2 min,以除去殘留的漂洗液 W*。
將 DNA 吸附柱P3 放入新的 1.5 mL 離心管中(自備),在DNA 吸附柱P3 中央加入 50-100 µL 洗脫液,室溫放置 2 min。然后 12,000 rpm 離心 1 min。收集濾液,即為質(zhì)粒DNA 溶液。
【注】:可通過以下方式提高回收產(chǎn)量:①70℃預(yù)熱洗脫液;②將 DNA 濾液再次上柱,室溫放置 2 min 后,洗脫。
質(zhì)粒 DNA 溶液可置于-20℃長期保存。
HB220117