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參考價: | 面議 |
- 13280ES50 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):371更新時間:2020-05-15 13:27:46
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- www.yeasen.com
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50 T |
---|---|---|---|
貨號 | 13280ES50 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
Hieff® Multiplex PCR Master Mix
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格(元) |
Hieff® Multiplex PCR Master Mix | 13280ES60 | 100 T | 875.00 |
Hieff® Multiplex PCR Master Mix | 13280ES76 | 500 T | 3165.00 |
產(chǎn)品描述
本產(chǎn)品適用于多重PCR實驗。Hieff® Multiplex PCR Master Mix為多重PCR酶制劑與擴(kuò)增緩沖液的2×預(yù)混液,可以快速便捷地用于PCR反應(yīng),具備高均一性、高特異性和高靈敏度的特點,可以對20對及以上的引物進(jìn)行特異、均一地進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)。
產(chǎn)品組分
組分編號 | 組分名稱 | 產(chǎn)品編號/規(guī)格 | |
13280ES60 (100T) | 13280ES76 (500T) | ||
13280-A | Hieff® Multiplex PCR Master Mix | 2×1.25 mL | 10×1.25 mL |
運輸與保存方式
冰袋運輸。-20℃儲存,有效期1年。
反應(yīng)體系
組分 | 體積 μL | 終濃度 |
Hieff® Multiplex PCR Master Mix | 25 | 1× |
Primer mix | x | 0.1 μM-0.5 μM |
模板DNA | DNA總量:1 ng-200 ng | - |
無菌超純水 | up to 50 | - |
【注】: 1)上表中DNA量和引物濃度均為推薦濃度,可根據(jù)具體實驗情況進(jìn)行調(diào)整適濃度。
2)每條引物的濃度可在0.1 μM-0.5 μM范圍內(nèi)進(jìn)行調(diào)整。
3)Hieff® Multiplex PCR Master Mix中已經(jīng)包含擴(kuò)增所需要的酶、dNTP、鹽離子等,無需額外添加。
擴(kuò)增程序
循環(huán)步驟 | 溫度(℃) | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94 | 1 min | 1 |
變性 | 94 | 30 sec | 15-45 |
退火 | 50-60 | 60 sec | |
延伸 | 72 | 60 sec/kb | |
終延伸 | 72 | 10 min | 1 |
【注】: 1)在PCR儀上設(shè)置上表中的反應(yīng)程序進(jìn)行多重PCR反應(yīng)(設(shè)置熱蓋溫度至105℃左右)。
2)使用本產(chǎn)品獲得的擴(kuò)增產(chǎn)物無需添加上樣緩沖液,可直接上樣用于電泳檢測。
3)延伸時間以長擴(kuò)增片段為準(zhǔn),可適當(dāng)延長延伸時間,但要避免過長時間的延伸帶來的非特異性擴(kuò)增。
實驗案例分享
以人基因組DNA為模板,使用10對引物進(jìn)行多重PCR反應(yīng),分別擴(kuò)增97 bp、139 bp、181 bp、212 bp、268 bp、331 bp、415 bp、507 bp、741 bp和1172 bp的目的片段。
反應(yīng)體系配制
組分 | 體積 (μL) | 終濃度 |
Hieff® Multiplex PCR Master Mix | 25 | 1× |
Primer mix | x | 0.1 μM-0.5 μM |
模板DNA | DNA總量:1 ng-200 ng | - |
無菌超純水 | up to 50 | - |
擴(kuò)增程序
循環(huán)步驟 | 溫度(℃) | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94 | 1 min | 1 |
變性 | 94 | 30 sec | 35 |
退火 | 60 | 60 sec | |
延伸 | 72 | 60 sec/kb | |
終延伸 | 72 | 10 min | 1 |
電泳檢測
2%瓊脂糖凝膠;電壓130 V;電泳時間30 min。
實驗結(jié)果
M:100 bp DNA ladder
Lane1-2:10重PCR產(chǎn)物
HB200511