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參考價(jià): | 面議 |
- 11810ES80 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問(wèn)次數(shù):847更新時(shí)間:2022-03-21 16:25:53
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
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產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 儲(chǔ)存 | 價(jià)格(元) |
XL10-Gold Chemically Competent Cell XL10-Gold化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 | 11810ES80 | 100 μl×10管 | -80℃ | 287 |
產(chǎn)品描述
XL10-Gold化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞是經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞,特別適合于大分子量DNA的高效轉(zhuǎn)化。具有四環(huán)素和氯霉素抗性,使用Puc19質(zhì)粒測(cè)得其轉(zhuǎn)化效率達(dá)108cfu/μg,主要具有如下特點(diǎn):
① Hte表型可增強(qiáng)較大分子量質(zhì)粒和連接產(chǎn)物的高效轉(zhuǎn)化;
② 具有限制性內(nèi)切酶缺陷性,更利于克隆 DNA 的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒 DNA 的提?。?/span>
③ 更適于質(zhì)粒文庫(kù)的構(gòu)建;
④ 具有lacIqZΔM15,可用于藍(lán)、白斑篩選。
本品基因型:
TetrΔ(mcrA)183Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac Hte [F′proAB lacIqZΔM15 Tn10 (Tetr) Amy Camr]。
產(chǎn)品組分
編號(hào) | 組分 | 規(guī)格 | 保存溫度 |
11810-A | XL10-Gold化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 | 100 μl × 10 | -80℃ |
11810-B | pUC19(10pg/μl) | 10 μl × 1 | -20℃ |
運(yùn)輸與保存方法
干冰運(yùn)輸。
XL10-Gold化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞-80℃保存,pUC19質(zhì)粒-20℃保存。有效期半年。不能保存于液氮!
注意事項(xiàng)
1)感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)保存在-80℃,不可反復(fù)凍融和放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),以免降低感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率。
2)整個(gè)轉(zhuǎn)化操作,嚴(yán)格根據(jù)相應(yīng)溫度及無(wú)菌條件要求進(jìn)行。
3)為確保zui高轉(zhuǎn)化效率,整個(gè)操作過(guò)程應(yīng)盡量輕柔,并保持低溫,且每次轉(zhuǎn)化感受態(tài)使用量,不低于100μl。
4)為防止轉(zhuǎn)化不成功,可以保留部分連接反應(yīng)液,以重新轉(zhuǎn)化,zui低化實(shí)驗(yàn)可能遇到的風(fēng)險(xiǎn)。
使用方法
1)取100 μl感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中融化。
2)向100μl感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入0.1-50ng(<10μl /100μl感受態(tài))目的DNA或2μl連接產(chǎn)物,輕輕旋轉(zhuǎn)離心管以混勻內(nèi)容物,在冰浴中靜置30min。
3)置于42℃水浴中熱激30s,然后快速將管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冷卻2-3min,該過(guò)程不要搖動(dòng)離心管,否則會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
4)向離心管中加入900μl 42℃預(yù)熱的無(wú)菌NZY+培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床振蕩培養(yǎng)1h(225-250rpm),目的是促使菌體復(fù)蘇。
【注】:此步也可用LB培養(yǎng)基(不含抗生素)進(jìn)行菌體復(fù)蘇。
5)取上述≤200μl轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂至含有相應(yīng)抗生素的LB固體平板上,將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)一個(gè)晚上。
【注】:如需做藍(lán)白斑篩選,需至少孵育17h,以充分顯色。
附錄一:常用抗生素工作濃度
抗生素 | 翊圣貨號(hào) | 常用工作濃度 |
Ampicillin 氨芐青霉素 | 60203ES10 | 100 μg/ml |
Carbenicillin羧芐青霉素 | 60202ES08 | 100 μg/ml |
Chloramphenicol 氯霉素 | 60205ES10 | 33 μg/ml |
Kanamycin 卡那霉素 | 60206ES10 | 30 μg/ml |
Streptomycin 鏈霉親和素 | 60211ES60 | 25 μg/ml |
Tetracycline 四環(huán)素 | 60212ES25 | 15 μg/ml |
附錄二 NZY+培養(yǎng)基配方
10 g of NZ amine (casein hydrolysate)
5 g of yeast extract
5 g of NaCl
Add deionized H2O to a final volume of 1 liter
Adjust to pH 7.5 using NaOH and then autoclave
Add the following filer-sterilized supplements prior to use:
12.5 ml of 1 M MgCl2
12.5 ml of 1 M MgSO4
20 ml of 20% (w/v) glucose (or 10 ml of 2 M glucose)
相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
11801ES80 | *0 Chemically Competent Cell *0化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 | 10×100 μl | 180 |
11802ES80 | DH5α Chemically Competent Cell DH5α化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 | 10×100 μl | 180 |
11803ES80 | XL10 Chemically Competent Cell XL10化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 | 10×100 μl | 265 |
11804ES80 | BL21 (DE3) Chemically Competent Cell BL21 (DE3)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 | 10×100 μl | 280 |
11805ES80 | BL21 (DE3) pLysS化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 | 10×100 μl | 280 |
11806ES80 | Rosetta(DE3) Competent Cell Rosseta(DE3)感受態(tài)細(xì)胞 | 10×100 μl | 280 |
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11808ES80 | DH10B Chemically Competent Cell DH10B化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 | 10×100 μl | 189 |
11810ES80 | XL10-Gold Chemically Competent Cell XL10-Gold化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 | 10×100 μl | 287 |
11811ES80 | Stbl2 Chemically Competent Cell Stbl2 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 | 10×100 μl | 288 |