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產品名稱: LysoTracker Green DND-26 溶酶體綠色熒光探針
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規(guī)格 | 儲存 | 價格(元) |
LysoTracker Green DND-26 溶酶體綠色熒光探針 | 40738ES50 | 50µl | -20℃避光保存 | 359.00 |
產品描述
LysoTracker®系列探針是對活細胞中的酸性區(qū)室進行選擇性染色的一類熒光染料,該類探針具有幾大重要的特點,1)選擇性標記酸性細胞器;2)納摩爾級(nM)濃度即可有效標記活細胞;3)具有多色探針提供,可根據情況對樣品進行多標實驗。LysoTracker®結構上由一個熒光基團和相連的弱堿基構成,可自由穿過細胞膜,一般聚集在球形細胞器上,適用于觀察溶酶體內部生物合成及相關發(fā)病機理。Lysotracker中性pH下僅僅發(fā)生部分質子化,因此該探針標記細胞器的原理可能與其*質子化并滯留在細胞器膜上有關。
本品LysoTracker® Green DND-26為綠色熒光標記的溶酶體探針,具有504/511nm的zui大激發(fā)/發(fā)射波長。本品以溶于無水DMSO的1mM儲存液形式提供。
產品性質
CAS號(CAS NO.) | N/A |
分子式(Formula) | C18H26BClF2N4O |
分子量(Molecular Weight) | 398.6894 |
Ex/Em(nm) | 504/511 |
外觀(Appearance) | 黃色溶液 |
結構式(Structure) |
運輸和保存方法
室溫運輸。-20℃避光保存,避免反復凍融。
注意事項
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法
使用前,先將本品取出回溫至室溫,并對其進行簡短離心使DMSO溶液集中于管底。*工作濃度需根據不同的實驗要求、細胞類型、細胞或組織的膜通透性等進行優(yōu)化。
1.工作液的配制
利用培養(yǎng)基或合適的緩沖液將1mM 儲存液稀釋至工作濃度,推薦工作液濃度為50-75nM;
【注意】:1)為了降低探針加載過度可能引起的假陽性,建議在不影響染色效果的情況下盡量使用低濃度。2)若細胞在染色后于不含染料的培養(yǎng)基中孵育,會觀察到熒光信號的衰減和細胞的空泡化現象。
2.染色
2.1 對于貼壁細胞
1)將細胞置于培養(yǎng)皿中的蓋玻片上,加入合適培養(yǎng)基,使其爬片生長。
2)待細胞生長到合適豐度,吸除培養(yǎng)液,加入適量37℃預熱的含探針工作液。于生長狀態(tài)下孵育30min~2h(具體孵育時間需根據細胞類型而定)?!咀⒁狻浚簩ysotracker Green DND-26內化過程的動力學研究表明,活細胞攝取此染料僅需數秒即可。缺點在于此探針可能引起溶酶體產生“堿性效應Alkalizing effect”,也就是說過長孵育時間會誘導溶酶體pH值提高。建議僅當該探針于37℃孵育細胞1-5min才可用作pH指示劑。
3)利用新鮮培養(yǎng)基替換上述染色液并在熒光顯微鏡(含合適濾片)下觀察。若染色不夠充分,建議增加染料濃度或延長染色時間。
2.2 對于懸浮細胞
1)離心,吸除上清。
2)利用37℃預熱的探針工作液重懸細胞,于生長狀態(tài)下孵育30min~2h(具體時間需根據細胞類型而定)。
3)離心,吸除染色液,加入新鮮培養(yǎng)液重懸細胞。
4)置于熒光鏡下觀察。若染色不夠充分,建議增加染料濃度或加長染色時間。
【注意】:對于懸浮細胞,也可將細胞貼附于經BD Cell-Tak處理過的蓋玻片上,然后使用類似于貼壁細胞的方法進行染色。
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