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參考價(jià): | 面議 |
- 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):565更新時(shí)間:2023-02-27 15:19:44
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100mg |
---|---|---|---|
貨號(hào) | 40903ES01 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
D-Luciferin Firefly, Free Acid D-螢火蟲熒光素,游離酸 | 40903ES01 | 100 mg | 708.00 |
40903ES02 | 500 mg | 2556.00 | |
40903ES03 | 1 g | 2588.00 |
產(chǎn)品描述
D-熒光素(D-Luciferin)是熒光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整個(gè)生物技術(shù)領(lǐng)域,特別是體內(nèi)活體成像技術(shù)。其作用機(jī)制是在ATP和熒光素酶的作用下,熒光素(底物)能夠被氧化發(fā)光。當(dāng)熒光素過量時(shí),產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性(見下圖)。將攜帶熒光素酶編碼基因(Luc)的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入細(xì)胞后,導(dǎo)入研究動(dòng)物如大、小鼠體內(nèi),之后注入熒光素,通過生物發(fā)光成像技術(shù)(BLI)來檢測光強(qiáng)度變化,從而實(shí)時(shí)監(jiān)測疾病發(fā)展?fàn)顟B(tài)或藥物的治療功效等。也可以利用ATP對此反應(yīng)體系的影響,根據(jù)生物發(fā)光強(qiáng)度的變化來指示能量或生命體征。
D-熒光素也常用于體外研究,包括熒光素酶和ATP水平分析、報(bào)告基因分析、高通量測序和各種污染檢測。目前市場上有三種產(chǎn)品形式,D-熒光素(游離酸),D-熒光素-鈉鹽,以及D-熒光素鉀鹽。這三種產(chǎn)品主要的差別在于溶解特性上。D-熒光素(游離酸)水溶性以及緩沖體系的溶解性都很弱,除非溶于弱堿如NaOH和KOH溶液。鈉鹽和鉀鹽形式的D-熒光素能夠非常容易且快速的溶入水或者緩沖液中,使用方便,溶劑無毒性,特別適合體內(nèi)實(shí)驗(yàn)。配成液體后的這三種產(chǎn)品,在絕大多數(shù)的應(yīng)用上都沒有實(shí)質(zhì)性的差別。
產(chǎn)品性質(zhì)
中文別名(Chinese synonym) | D-螢火蟲熒光素,游離酸 |
英文別名(English synonym) | S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid; D-Luciferin Firefly, free acid |
CAS號(hào)(CAS NO.) | 2591-17-5 |
分子式(Formula) | C11H8N2O3S2 |
分子量(Molecular weight) | 280.33 g/mol |
外觀(Appearance) | 類白色至淺黃色粉末 |
溶解性(Solubility) | 本品難溶于水,可加入稀堿促進(jìn)其溶解。 |
純度(Purity)(HPLC) | ≥95% |
運(yùn)輸和保存方法
冰袋運(yùn)輸;-20℃干燥避光保存;有效期一年。
使用方法
1 體外生物發(fā)光檢測
1)用稀堿(如NaOH,KOH溶液)溶解D-熒光素,游離酸,配制成30 mg/mL的儲(chǔ)存液(200×),并調(diào)整pH至7.4?;靹?/span>
后立即使用或分裝于-20℃或-80℃凍存,避免反復(fù)凍融。
【注】:如果有沉淀發(fā)生則需要調(diào)整pH至更高直至*溶解。之后可以重新用酸性溶液來中和,調(diào)整至pH7.4。
2)用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基1:200稀釋儲(chǔ)存液,配制工作液(終濃度150 µg/mL)。
3)去除培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基直至無殘留。
4)待圖像分析前,向細(xì)胞內(nèi)添加1×熒光素工作液,然后進(jìn)行圖像分析(或者細(xì)胞放在37℃短時(shí)間孵育后檢測可增強(qiáng)信號(hào))。
2 活體成像分析
1)用稀堿(如NaOH,KOH溶液)配制D-熒光素工作液(15 mg/mL),并調(diào)節(jié)pH至7.4,0.2µm 濾膜過濾除菌。混勻后立即使用或分裝于-20℃或-80℃凍存,避免反復(fù)凍融。一旦使用,放到4℃解凍,保持冰冷且避光。
2)注射量取決于注射方式,具體如下:
注射方式 | 劑量 |
靜脈注射(25-27gauge 針頭) | 按 10 µL/g 體重濃度,加入相應(yīng)體積的 15 mg/mL 熒光素工作液 |
腹腔注射(25-27gauge 針頭) | 按 10 µL/g 體重濃度,加入相應(yīng)體積的 15 mg/mL 熒光素工作液 |
肌肉注射(27gauge 針頭) | 50 µL,濃度為1-2 mg/mL 熒光素工作液 |
鼻內(nèi)注射(pipette) | 50 µL,濃度為3 mg/mL 熒光素工作液 |
3)注射入體內(nèi)10-20 min(待光信號(hào)達(dá)到*穩(wěn)定平臺(tái)期),再進(jìn)行成像分析。
【注】:建議對每只動(dòng)物模型都需要建立熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線,從而確定最高信號(hào)檢測時(shí)間和信號(hào)平臺(tái)期。
注意事項(xiàng)
1)本品(firefly luciferin)和甲蟲熒光素(beetle luciferin)都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2-thiazoline-4-
carboxylic acid,僅僅是不同公司在命名上的差異。
2)本品保存和操作的過程中都要避光。另外儲(chǔ)存液過濾除菌后,可以-20℃或-80℃分裝凍存,避免反復(fù)凍融。如果有條件,對儲(chǔ)存液充氮?dú)饣驓鍤猓ǚ乐寡趸€(wěn)定性和保存時(shí)間更長,長達(dá)1年。
3)注射方式,動(dòng)物類型以及體重等都會(huì)影響信號(hào)的發(fā)射,因此建議每次實(shí)驗(yàn)都要做熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線,確定最佳信號(hào)平臺(tái)期和最佳的檢測時(shí)間。
4)為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
5)本產(chǎn)品僅作科研用途!
HB220209