詳細(xì)介紹
豬胰蛋白酶(trypsin)ELISA試劑盒免費(fèi)代測
l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中豬胰蛋白酶(trypsin)的含量。
l 有效期:6個(gè)月
l 保存條件:2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷
實(shí)驗(yàn)原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被豬胰蛋白酶(trypsin)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的豬胰蛋白酶(trypsin)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
豬胰蛋白酶(trypsin)ELISA試劑盒免費(fèi)代測主要優(yōu)點(diǎn)
1.高效、靈敏、特異的抗體;
2. 穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
3. 吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
4. 適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
5. zui大限度的節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
常用的使用方法
一、雙抗體夾心法測定抗原
將抗原免疫*種動(dòng)物獲得的抗體吸附于固相表面;
加抗原,形成抗原-抗體復(fù)合物;
加抗原免疫第二種動(dòng)物獲得的抗體,形成抗體抗原抗體復(fù)合物;
加酶標(biāo)抗抗體(第二種動(dòng)物抗體的抗體);
加底物。底物的降解量=抗原量。
二、直接法測定抗原
將抗原吸附在載體表面;
加酶標(biāo)抗體,形成抗原—抗體復(fù)合物;
加底物。底物的降解量=抗原量。
三、間接法測定抗體
將抗原吸附于固相載體表面;
加抗體, 形成抗原-抗體復(fù)合物;
加酶標(biāo)抗體;
加底物。 測定底物的降解量=抗體量。
問題解答
靈敏度是什么意思?
根據(jù)我司多年來的銷售經(jīng)驗(yàn),我司了解到客戶針對(duì)購買Elisa試劑盒時(shí),靈敏度要求非常高。這是為什么呢?為您解析Elisa試劑盒靈敏度。Elisa試劑盒靈敏度高能使產(chǎn)品達(dá)到一定的數(shù)值,對(duì)產(chǎn)品試驗(yàn)有著非常大利益,它能檢測到的分析物的zui小量,表示檢測下限的能力。
相對(duì)靈敏度=真陽性/(真陽性+假陰性)×100%
測定方法及表示方法:靈敏度標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控血清、陽性標(biāo)本稀釋終點(diǎn)、血清盤(pannel)及臨床標(biāo)本陽性率。
靈敏度標(biāo)準(zhǔn)品可以從衛(wèi)生部臨檢中心購買,質(zhì)控血清可以從衛(wèi)生部臨檢中心購買,也可以自己配制。因?yàn)橘|(zhì)控血清不一定是原倍血清,或由于片段、亞型、位點(diǎn)等原因,評(píng)定試劑盒的靈敏度都帶有一定的片面性。
陽性標(biāo)本稀釋終點(diǎn)的方法常用于不同試劑盒的比較,但也有上述的片面性。陽性pannel有些可以從衛(wèi)生部臨檢中心購買,如HBsAg陽性pannel,也可以自己配制。臨床標(biāo)本陽性率,是一種粗略的估計(jì),但對(duì)臨床很實(shí)用。
注意事項(xiàng)
1. 由于產(chǎn)品底物顯色劑對(duì)光及其敏感,因此要避光保存。
2. 檢測吸光度前應(yīng)將酶標(biāo)儀打開,將其預(yù)熱30min以上。
3. 孵育的時(shí)間應(yīng)該嚴(yán)格按照試劑盒說明書上的時(shí)間為準(zhǔn)。
4. 要盡量做雙孔實(shí)驗(yàn),這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,又能反映出試劑盒的精密度。
5. 對(duì)樣本的結(jié)果有疑問時(shí)需要使用其他檢測方法進(jìn)行驗(yàn)證。
結(jié)果計(jì)算:
在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為X軸,相應(yīng)的OD值為Y軸,用四參數(shù)或?qū)?shù)-對(duì)數(shù)法繪制zui合適的標(biāo)準(zhǔn)曲線。濃度與OD值成反比關(guān)系,隨著標(biāo)準(zhǔn)品濃度的增加,黃色強(qiáng)度就減少,即OD值減少樣本濃度可直接從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取。如果樣本實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行了稀釋,則試劑盒zui后結(jié)果應(yīng)乘以相應(yīng)的稀釋因子標(biāo)準(zhǔn)曲線為逆向S型曲線。
附:采用全自動(dòng)酶標(biāo)儀檢測,只需檢測前設(shè)置好酶標(biāo)儀的相關(guān)參數(shù),如坐標(biāo)參數(shù)(線性,半對(duì)數(shù))和計(jì)算方式參數(shù)(三次回歸、四參數(shù)或雙對(duì)數(shù)曲線方程),即可直接得到結(jié)果。
產(chǎn)品名稱存放:收到貨后貯存于4℃,強(qiáng)烈建議盡快使用配制的試劑1X緩沖液貯存于4℃,將不用的微孔板放回至密封袋內(nèi)密封起來,貯存于4℃,已稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品,生物標(biāo)記物,抗體和HRP貯存于4℃。