詳細(xì)介紹
人白細(xì)胞介素5(IL-5)ELISA試劑盒
使用手冊(cè)
產(chǎn)品貨號(hào):DB1947-Hu
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【產(chǎn)品名稱】
中文名稱:人白細(xì)胞介素5(IL-5)ELISA試劑盒
【包裝規(guī)格】
96T/盒
【預(yù)期用途】
僅供科研使用,定量檢測(cè)血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液等相關(guān)樣本中人白細(xì)胞介素5(IL-5)的濃度。
【檢測(cè)原理】
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人白細(xì)胞介素5(IL-5)水平。用純化的白細(xì)胞介素5(IL-5)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白細(xì)胞介素5(IL-5),再與HRP標(biāo)記的白細(xì)胞介素5(IL-5)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細(xì)胞介素5(IL-5)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人白細(xì)胞介素5(IL-5)濃度。。
【產(chǎn)品性能】
1、物理性能
試劑盒的各液體組分應(yīng)澄清透明、無沉淀或者絮狀物。微孔板鋁箔袋應(yīng)真空包裝,無破損漏氣(如有漏氣,不影響使用)。
2、劑量反應(yīng)曲線線性
標(biāo)準(zhǔn)品劑量反應(yīng)曲線相關(guān)系數(shù)r值,大于等于0.9900。
3、檢測(cè)范圍
1 ng/L -40 ng/L。
4、靈敏度
di檢出劑量小于0.25 ng/L。
5、精密度
精密度用樣品測(cè)定值的變異系數(shù)CV 表示。CV(%) = SD/mean×100
批內(nèi)差:取同批次試劑盒對(duì)低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量檢測(cè),每份樣本連續(xù)測(cè)定20 次,分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD 值。
批間差:選取3 個(gè)不同批次的試劑盒分別對(duì)低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量測(cè)定,每個(gè)樣本使用同一試劑盒重復(fù)測(cè)定10 次,分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD 值。
批內(nèi)差: CV<5.3%
批間差: CV<7.6%
6、回收率
分別往5個(gè)不同樣本中添加已知濃度的目標(biāo)蛋白,做回收實(shí)驗(yàn),得出回收率范圍和平均回收率。
Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
Tissue Lysates (n=5) | 82-103 | 98 |
Serum (n=5) | 98-105 | 101 |
EDTA plasma (n=5) | 95-109 | 102 |
Cell culture media (n=5) | 87-110 | 99 |
7、線性
分別往5個(gè)樣本中添加已知濃度的目標(biāo)蛋白,做回收實(shí)驗(yàn),得出回收率范圍及平均回收率。將5個(gè)樣本分別稀釋2倍,4倍,8倍,16倍做回收實(shí)驗(yàn),得出回收率范圍及平均回收率。
Sample | 1:2 | 1:4 | 1:8 | 1:16 |
Tissue Lysates (n=5) | 92-105% | 84-95% | 84-102% | 80-93% |
Serum (n=5) | 81-103% | 89-99% | 86-107% | 83-101% |
EDTA plasma (n=5) | 85-97% | 82-101% | 83-96% | 79-91% |
Cell culture media (n=5) | 83-105% | 89-112% | 81-106% | 82-110% |
8、特異性
本試劑盒識(shí)別天然和重組人白細(xì)胞介素5(IL-5),經(jīng)檢測(cè)與其它相似物質(zhì)無明顯交叉反應(yīng)。由于受到技術(shù)及樣本來源的限制,不可能完成所有相關(guān)或相似物質(zhì)交叉反應(yīng)檢測(cè),因此本試劑盒有可能與未經(jīng)檢測(cè)的其它物質(zhì)有交叉反應(yīng)。
9、穩(wěn)定性
經(jīng)測(cè)定,試劑盒在有效期內(nèi)務(wù)必按推薦溫度保存,活性降低率小于5%。為減小外部因素對(duì)試劑盒破壞前后檢測(cè)值的影響,實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實(shí)驗(yàn)員來進(jìn)行操作可減少人為誤差。