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羊小反芻獸疫抗體(PPR-Ab)ELISA試劑盒實驗操作步驟
閱讀:1380 發(fā)布時間:2015-6-30羊小反芻獸疫抗體(PPR-Ab)ELISA試劑盒,本試劑盒用于測定血清、血漿及相關(guān)液體樣本中的表達(dá)。如需更多ELISA試劑盒產(chǎn)品,請來電詳詢。試劑盒嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試劑不同批號組分不得混用。
規(guī)格:48T/96T
性狀:液體
存儲:4℃保存6個月
運(yùn)輸方式:快遞發(fā)貨
檢測標(biāo)本:血清,血漿,尿液,胸腹水,腦脊液,細(xì)胞培養(yǎng)上清,組織勻漿等
檢測方法:雙抗夾心法
羊小反芻獸疫抗體(PPR-Ab)ELISA試劑盒實驗操作步驟:
1.實驗之前準(zhǔn)備好所有的標(biāo)準(zhǔn)品(見備用試劑)。建議所有的標(biāo)準(zhǔn)和樣本都做復(fù)孔。
2.首先把微孔板固定在支架上,分別設(shè)好相應(yīng)的孔(空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔),然后在包被板上,標(biāo)準(zhǔn)品和代測樣本孔準(zhǔn)確加樣50μl
3.加10 μL的生物素到代測樣本孔中。(標(biāo)準(zhǔn)孔不加)
4.每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,混合,混合在這一步是很重要的。封板后置37℃溫育1個小時。
5.在溫育結(jié)束前15分鐘內(nèi)準(zhǔn)備顯色液。(見備用試劑)
6.用下面的一種方法洗板;
7.手洗:將微孔板中的混合物倒入合適的廢物器皿中,然后每孔注滿稀釋好的洗滌液,再到掉,如此重復(fù)4次,然后倒置微孔板,將其拍到吸水紙上或者紙巾上,直到拍干。、
(注:洗板的時候要緊握微孔板的兩側(cè),以確保所有的板條不脫落)
8.機(jī)洗:吸干所有的孔,然后用洗板機(jī)洗板5次,調(diào)整洗板機(jī)盡可能洗掉所有的液體,設(shè)置填充量在350微升/孔/清洗(范圍:350-400微升),洗板后,倒置微孔板,將其拍到吸水紙上或者紙巾上,直到拍干。建議洗板機(jī)設(shè)置的浸泡時間為10秒,震動時間為5秒。
9.每孔依次加入顯色劑A 50μl,顯色劑B 50μl,封板后置20-25°C顯色15分鐘.
10.每孔加終止液50μl混合
11.在30分鐘以內(nèi)讀酶標(biāo)儀在450nm波長的O.D值
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