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胎牛血清注意事項(xiàng)及有必要做熱滅活嗎?
閱讀:2710 發(fā)布時(shí)間:2015-4-15很多客戶在訂購(gòu)胎牛血清的時(shí)候,都會(huì)問(wèn)到胎牛血清的注意事項(xiàng)及熱滅活,胎牛血清注意事項(xiàng)及熱滅活到底是什么呢?讓我們跟錢一起來(lái)了解胎牛血清。下面是胎牛血清的注意事項(xiàng)及熱滅活:
胎牛血清注意事項(xiàng):
1、解凍血清時(shí),請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-2O。C至4。
C至室溫),若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20。C至37。C),實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。
2、解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生.
3、請(qǐng)勿將血清置于37。C太久。若在37。C放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。
4、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無(wú)須做此步驟。
5、若必須做血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56。C,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖 晃均勻。溫度過(guò)高,時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多。
6、血清解凍后發(fā) 現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理? 欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無(wú)菌離 心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾。但不建議以過(guò)濾的方 法去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞過(guò)濾膜。
何謂熱滅活?
一般是以56C,30分鐘來(lái)處理已解凍的血清,因?yàn)榇思訜岵襟E,可以使補(bǔ)體去活化, 而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有:溶細(xì)胞活性,平滑肌的收縮,肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放,增 強(qiáng)吞噬作用,淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和激活。
有必要做熱滅活嗎?
實(shí)驗(yàn)顯示,經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活血清,對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過(guò)的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn),或*沒(méi)有任何作用,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛?響了血清的質(zhì)量,而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。而經(jīng)過(guò)熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì)顯 著的增多,這些沉淀物在倒立顯微鏡下觀察,像是 "小黑點(diǎn)",常常會(huì)讓研究者誤以為是血 清遭受污染,而把血清放在37C環(huán)境中,又會(huì)使此沉淀物更增多,使研究者誤認(rèn)為是微生 物的分裂擴(kuò)增。
因此我們建議您,若非必須,您可以不需要做熱處理這一步。如此一來(lái),不但節(jié)省您寶貴的時(shí)間,更確保您血清的質(zhì)量!另外,購(gòu)買已滅活成品也不失一個(gè)捷徑,請(qǐng)?jiān)谫?gòu)買的時(shí)候注意詢問(wèn)廠家是否是已滅活血清。