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抗體特別的保存方法介紹
閱讀:1081 發(fā)布時間:2013-9-6抗體特別的保存方法介紹:
抗體保存得當(dāng)與否,直接決定了抗體的活性和使用效果!如果抗體保存得當(dāng),大部分抗體活性都可以維持?jǐn)?shù)月甚至數(shù)年。對于我們的很多抗體而言,分裝成小等份并凍存于 -20oC 或 -80oC 是*保存條件。分裝成小等份可zui大程度減少由凍融造成的損傷,以及從單個試劑瓶中多次吸取而引入的污染。小等份只需凍融一次,如有剩余,可將剩余物保存于 4oC. 在收到抗體時,在 10,000 × g 下離心 20 秒以沉積截留于試劑瓶螺紋的溶液,并以小等份轉(zhuǎn)移至低蛋白結(jié)合微量離心管中。小等份的量取決于實(shí)驗(yàn)人員在實(shí)驗(yàn)中通常采用的量。小等份應(yīng)不小于10 μl; 等份越小,儲液濃度因抗體蒸發(fā)及吸附于保存瓶表面而受到的影響越大。
在大多數(shù)情況下,收到抗體時在 4oC 下保存一至兩周,然后再冷凍進(jìn)行長期保存是可接受的,但也許腹水液是例外,它可能包含蛋白酶,因而應(yīng)該盡快凍存。同樣,遵照數(shù)據(jù)表上的建議是重要的。
。這些都是正常保存抗體的方法,以下是有些特別抗體需要加入一定的其他試劑的保存方法介紹:
關(guān)于加入甘油保存:
有些人會加50%的甘油到抗體中來避免反復(fù)凍融,甘油在-20℃ 會降低冰點(diǎn)。這對很多抗體可能是可行的。但是abcam僅對非常小的一部分抗體檢測過其在這種條件下的穩(wěn)定性;而Abcam只對按照推薦條件保存的抗體提供質(zhì)量保證!加入甘油的溶液不建議在-80℃保存,因?yàn)檫@已經(jīng)超過了甘油的冰點(diǎn)。如果您要加入甘油來保存抗體的話,請謹(jǐn)慎注意無菌操作,避免污染!
關(guān)于蛋白保護(hù)劑:
蛋白在高濃度時更不容易降解(1 mg/ml 或者更高),這就是為什么在抗體中加入A之類作為穩(wěn)定劑的原因了;另一方面,加入的蛋白也可以減少抗體由于管壁吸附所造成的損失。但是如果抗體要用來標(biāo)記的話,則不能加入蛋白穩(wěn)定劑,因?yàn)檫@些穩(wěn)定劑會和抗體一起競爭結(jié)合標(biāo)記物。
關(guān)于*(sodium azide)的使用:
為了防止微生物污染,*經(jīng)常被加入到抗體中(終濃度0.02% (w/v))。Abcam的很多抗體已經(jīng)含有了0.02%-0.05%的*,在說明書的“Storage buffer”中有標(biāo)明的。
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