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人抗鼠抗體的綜合操作方法
閱讀：2565 發(fā)布時間：2013-7-11人抗鼠抗體的綜合操作方法
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（一）研究簡史
采用單克隆抗體的治療和基于單克隆抗體的治療手段已經(jīng)越來越多地被運用到腫瘤患者、器官移植、自身免疫?。ㄌ貏e是類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎）等各方面。研究發(fā)現(xiàn)人抗鼠抗體，對于臨床診斷和治療應(yīng)用及體外特殊的免疫分析都是至關(guān)重要的。用人抗鼠抗體在體外進行免疫分析主要用于檢測血清中的激素、瘤細胞化生和腫瘤相關(guān)性抗原。
使用鼠單克隆抗體會產(chǎn)生強烈的免疫反應(yīng)并產(chǎn)生HAMA，因此限制了鼠單克隆抗體在診斷和治療上的進一步應(yīng)用，克服這種免疫排斥的方法主要是使用人源化的鼠單克隆抗體和免疫抑制劑。
（二）自身抗原
1．定義 病人在接受鼠單克隆抗體7-15d后可以產(chǎn)生人抗鼠抗體，接受這種治療方式的患者體內(nèi)，可以產(chǎn)生出HAMA的IgM和IgG片段。
2．特性 HAMA可以與抗原特異性的結(jié)合。有兩種類型：抗*型抗體、抗同種型抗體?？?型HAMA即使在人源化的鼠單克隆抗體使用時也可產(chǎn)生，在卵巢腫瘤和類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的患者中，都曾發(fā)現(xiàn)抗*型HAMA與具有生物特異性的鼠單克隆抗體產(chǎn)生反應(yīng)。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，骨髓抑制治療，可以有效抑制HAMA以及IV級神經(jīng)母細胞瘤患者體內(nèi)抗*型抗體對鼠單克隆抗體的反應(yīng)。對那些已產(chǎn)生HAMA IgG和IgM片段的所有患者在使用帶有17-lA的鼠單克隆抗體，發(fā)現(xiàn)43名患者中有41名產(chǎn)生抗*型抗體，20名產(chǎn)生抗*型抗體的抗體。
（三）自身抗體
1．檢測方法 ELISA法可以檢測出抗鼠免疫球蛋白抗體，無論是用完整的抗體分子還是用F（ab）2片段包被反應(yīng)孔。人抗鼠抗體的IgM片段與類風(fēng)濕因子的滴度有關(guān)，而抗鼠抗體的IgG則與RF無關(guān)。
研究還發(fā)現(xiàn)檢測抗鼠抗體還存在類風(fēng)濕因子樣活性，因為血清中含有類風(fēng)濕因子的患者體內(nèi)均可以產(chǎn)生人抗鼠免疫球蛋白抗體，但是這種情況不僅出現(xiàn)于自身免疫病患者，還出現(xiàn)于感染性疾病和腫瘤患者中。
使用含有F（ab）2片段的ELISA法來進行檢測，不僅可以避免預(yù)先存在的HA-MA的干擾，還可以有效的監(jiān)測使用鼠單克隆抗體治療的患者。盡管這種檢測方法的敏感性降低，但由于FC段是重要的免疫調(diào)控區(qū)，這種方法的特異性大大提高，特別是對于那些有著高活性類風(fēng)濕因子的患者而言。
除了ELISA法外，血細胞計數(shù)法也是對HAMA進行定量的一種方法，其精度可達到lng／m1，其檢測結(jié)果與ELISA的結(jié)果是一致的。
放射性免疫分析技術(shù)也可以用來檢測特異性和非特異性HAMA。對非特異性HA-MA的分析可以區(qū)分出預(yù)先存在HAMA和單克隆抗體誘導(dǎo)的HAMA~而對特異性HAMA的分析則可以區(qū)分出機體在注射不同的單克隆抗體所產(chǎn)生的特異性的免疫反應(yīng)。
2．臨床意義 反復(fù)應(yīng)用鼠單克隆抗體的主要問題是誘發(fā)人抗鼠抗體的產(chǎn)生，為克服這一問題，人們設(shè)計出許多不同的方法。如，使用具有免疫抑制潛能的抗體。在動物模型上，使用抗-CD4的單克隆抗體后可以產(chǎn)生持久的免疫耐受，且它比抗-CD3單克隆抗體能更有效地抑制HAMA的產(chǎn)生。運用環(huán)孢霉素A也可以抑制：HAMA的產(chǎn)生。在診斷和治療中使用單克隆抗體還必須考慮到不同抗原的各自復(fù)雜的構(gòu)型，如針對結(jié)直腸腫瘤的CEA，就需要使用高親和力的抗-CEA單克隆抗體，而不是低親和力抗體。
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