化工儀器網(wǎng)
技術(shù)文章
收到細(xì)胞應(yīng)該如何處理呢?
閱讀：734 發(fā)布時(shí)間：2021-3-2細(xì)胞活化︰
1.收到細(xì)胞株包裹時(shí)，請檢查細(xì)胞株冷凍管是否有解凍情形，若有請立即通知。細(xì)胞株請盡速開始培養(yǎng)，或立即冷凍保存(置于–70 °C，隔夜后，移到liq N2)。
2.冷凍細(xì)胞解凍程序:
2.1.依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單zhi定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它zhi定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒?yàn)需要，必須有所不同時(shí)，務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細(xì)胞適應(yīng)后，方進(jìn)行所需之實(shí)驗(yàn)。
2.2.FBS (fetal bovine serum, 胚牛血清), CS (calf serum, 小牛血清)和HS (horse serum, 馬血清)，對細(xì)胞而言差異很大，請務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單zhi定之血清種類培養(yǎng)之。
2.3.將培養(yǎng)基置于37 °C 水槽中回溫，回溫后噴以70 % 酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管，立即放入37 °C 水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化后，以70%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺。
2.4.依據(jù)細(xì)胞種類和濃度，于無菌操作臺內(nèi)取10 ml培養(yǎng)基加至T25 或T75 flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液，緩緩加入T25或T75 flask 內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入37 °C，5 % CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
2.5.對絕大多數(shù)細(xì)胞而言，1 % 以下之冷凍保護(hù)劑DMSO，不會對細(xì)胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍.細(xì)胞中去除，待第二天確定細(xì)胞生長或貼附良好后再去除即可。
惟對極少數(shù)因?qū)MSO 敏感或會造成細(xì)胞分化之細(xì)胞，需立即去除DMSO 者，則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入5 - 10 ml 培養(yǎng)基中，離心300 xg (約1000 rpm)，5 分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細(xì)胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入37 °C，5 % CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
上海滬鼎生物科技有限公司主營：Elisa試劑盒,人Elisa試劑盒,大鼠Elisa試劑盒,小鼠Elisa試劑盒,生物試劑,血清,抗體,培養(yǎng)基,標(biāo)準(zhǔn)品,國產(chǎn)血清、GIBCO胎牛血清等。種屬齊全，*。期待您的咨詢與合作！