一．核磁共振光譜法簡介

   在強(qiáng)磁場的誘導(dǎo)下，一些原子核能發(fā)生核自旋能級裂分，當(dāng)用一定頻率的電磁波照射分子時，便能引起原子核自旋能級的躍遷、這種原子核在磁場中吸收一定頻率的電磁波，而發(fā)生自旋能級躍遷的現(xiàn)象，稱為核磁共振（NMR）。以核磁共振信號強(qiáng)度對照射頻率（或磁場強(qiáng)度）作圖，所得譜圖稱為核磁共振波譜（NMR spectrum）[1]。利用核磁共振波譜來結(jié)構(gòu)測定、定性及定量分析的方法稱為核磁共振光譜法（NMR spectroscopy）。核磁共振以強(qiáng)大的結(jié)構(gòu)解析能力確定了其在現(xiàn)代儀器分析中的地位，而共振譜線強(qiáng)度與譜線誘發(fā)核子個數(shù)成正比是核磁共振實驗設(shè)計和核磁譜學(xué)結(jié)構(gòu)解析的重要依據(jù)之一。藥學(xué)既是推動核磁共振進(jìn)步的推手，更是核磁共振技術(shù)發(fā)展的zui大受益者。

二．核磁共振光譜分析法在藥物分析中的應(yīng)用

1.核磁共振用于藥物鑒定分析具有以下優(yōu)勢[2]：

1.1樣品制備方法簡單：NMR樣品預(yù)處理環(huán)節(jié)少，便于質(zhì)控，因為制樣成本低、樣品污染和丟失的風(fēng)險小；

1.2鑒定和檢測的同步性:在一些常規(guī)藥物分析檢測過程中物質(zhì)的鑒定和定量檢測是兩個分立的環(huán)節(jié)，而NMR實驗可以同時提供物質(zhì)結(jié)構(gòu)和含量信息，制備一個樣品即能完成對樣品中物質(zhì)的鑒別和含量的測定，因而核磁共振技術(shù)是一種快速的檢測手段；

1.3對有機(jī)物的普適性：核磁共振實驗是一種無偏向性的測試方法，可以實現(xiàn)混合物中多個組分的同時鑒定分析，為定量分析中基準(zhǔn)物的選擇提供了較為寬松的空間；

1.4異構(gòu)體分析能力強(qiáng)：核磁共振對異構(gòu)體*的識別能力是許多測試技術(shù)所不能比擬的。此外，作為一種“無損傷"和低消耗的檢測技術(shù)，核磁共振測試過程中除了樣品制備試劑之外，幾乎不需要其他額外耗材，且樣品可以無損回收，因而核磁共振屬經(jīng)濟(jì)型和環(huán)境友好型檢測技術(shù)。

2.定量和定性分析方法：NMR圖譜中，可獲得化學(xué)位移、偶合常數(shù)、共振峰面積或峰高?；瘜W(xué)位移和偶合常數(shù)是結(jié)構(gòu)測定的重要參數(shù)；而共振峰面積或峰高是定量分析的依據(jù)。共振峰面積或峰高直接與被測組分的含量成正比。定量分析時，一般只對該化合物中某一基團(tuán)上質(zhì)子引起的峰面積或峰高與參比標(biāo)準(zhǔn)中某一基團(tuán)上質(zhì)子引起的峰面積進(jìn)行比較，即可求出其含量。當(dāng)分析混合物時，也可采用其各個組分的各自基團(tuán)上質(zhì)子產(chǎn)生的吸收峰強(qiáng)度進(jìn)行相對比較，然后求得相對含量。因此，在測量峰面積或峰高以前，必須了解化合物的各組成基團(tuán)上質(zhì)子所產(chǎn)生共振峰的相應(yīng)位置，也就是它們的化學(xué)位移值（值），并選擇一個合適的峰作為分析測量峰。

3.下面以兩個實例說明NMR spectroscopy在藥物分析中的應(yīng)用：

3.1 核磁共振波譜法測定藥物基準(zhǔn)物質(zhì)的含量[3]：以環(huán)丙沙星、安妥沙星、卡德沙星、加替沙星、左氧氟沙星、氧氟沙星、諾氟沙星、依諾沙星和洛美沙星9 種喹諾酮類抗生素化學(xué)對照品為例，其中安妥沙星和卡德沙星為國家一類新藥，采用重水，氘代二甲基亞砜或氫氧化鈉的重水溶液為溶劑，對苯二酚或順丁烯二酸為內(nèi)標(biāo)，用喹諾酮母核上的質(zhì)子峰進(jìn)行定量，以內(nèi)標(biāo)法和外標(biāo)法計算含量。核磁共振法測定結(jié)果與各對照品標(biāo)簽示值的誤差約為1 % 內(nèi)標(biāo)法和外標(biāo)法的計算結(jié)果一致，該方法專屬、準(zhǔn)確、簡便、快速，適用于對藥物基準(zhǔn)物質(zhì)含的測定。

3.2 核磁共振在天然藥物分析中的應(yīng)用[4]：以8β-甘草次酸為原料，合成了一種新的甘草次酸鹽類衍生物—精氨酸甘草次酸，利用1HNMR、13C NMR、DEPT、1H-1H COSY、HMOC、HMBC 等1D 和2D NMR 技術(shù)對其碳和氫質(zhì)子信號進(jìn)行了全歸屬，并通過與兩種原料化合物核磁共振譜數(shù)據(jù)的對比，揭示了該成鹽反應(yīng)的作用機(jī)制和產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)類型。

3.3 核磁共振技術(shù)在藥物鑒別中的應(yīng)用[5]：USP32中，肝素鈉和肝素鈣用重水作溶劑，采用1H-NMR廣譜，用標(biāo)準(zhǔn)對照法進(jìn)行鑒別；伊諾肝素鈉采用13C-NMR譜進(jìn)行鑒別。BP2009中促性腺激素釋放激素類似物布舍瑞林和戈舍瑞林，以及人工三文魚油均采用NRM方法鑒別。