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親和柱、免疫親和柱、柱層析之間的聯(lián)系
一、將與純化對象有專一結(jié)合作用的物質(zhì)連接在不溶性載體上，制成親和吸附劑后所裝的柱，多用做親和層析。
二、柱層析技術(shù)(Columnchromatography)又稱柱色譜技術(shù)，主要原理是根據(jù)樣品混合物中各組分在固定相和流動相中分配系數(shù)不同，經(jīng)多次反復(fù)分配將組分分離開來。
三、柱層析操作時，先在圓柱管中填充不溶性基質(zhì)，形成一個固定相。將樣品加到柱子上，用特殊溶劑洗脫，溶劑組成流動相。在樣品從柱子上洗脫下來的過程中，根據(jù)樣品混合物中各組分在固定相和流動相中分配系數(shù)不同，經(jīng)多次反復(fù)分配將組分分離。
四、濕法裝柱是先把硅膠用適當(dāng)?shù)娜軇┌鑴蚝螅偬钊胫又?，然后再加壓用淋洗?ldquo;走柱子”，本法最大的優(yōu)點是一般柱子裝的比較結(jié)實，沒有氣泡。干法裝柱則是直接往柱子里填入硅膠，然后再輕輕敲打柱子兩側(cè)，至硅膠界面不再下降為止，然后再填入硅膠至合適高度，最后再用油泵直接抽，這樣就會使得柱子裝的很結(jié)實。接著是用淋洗劑“走柱子”，一般淋洗劑是采用TLC分析得到的展開劑的比例再稀釋一倍后的溶劑。
五、免疫親和層析(IAFC)免疫親和層析以抗原抗體中的一方作為配基親和吸附另一方的分離系統(tǒng)稱為免疫親和層析。IAC也是色譜技術(shù)的一種,可稱為免疫色譜技術(shù),是一種利用抗原抗體特異性可逆結(jié)合特性的SPE技術(shù),根據(jù)抗原抗體的高選擇性,從復(fù)雜的待測樣品中提取目標(biāo)化合物。主要原理是將抗體與惰性微珠共價結(jié)合,然后裝柱,將抗原溶液過免疫親和柱,而非目標(biāo)化合物則沿柱流下,最后用洗脫緩沖液洗脫抗原,從而得到純化的抗原,用適當(dāng)?shù)木彌_液和合適的保存方法,柱可以再生備用。