一、試劑盒性能:
(1)準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
(2)靈敏度:zui低檢測(cè)濃度小于0.25 ppb。
(3) 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
(4)重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
(5)貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
(6)有效期:6個(gè)月
二、自備物品:
(1)酶標(biāo)儀(450nm)
(2)高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
(3)37℃恒溫箱
三、操作注意事項(xiàng):
(1) 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。
(2)濃度為0的S0號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對(duì)照或者空白;按照說明書操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋5倍,最終結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。
(3) 所有液體組分使用前充分搖勻。
四、檢測(cè)原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被嘔吐毒素(DON)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的嘔吐毒素(DON)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。