為了制造鼠抗地塞米松單克隆抗體,首先將免疫抗原注射到宿主動物中。一旦免疫原引起免疫反應(yīng),就會從脾臟中提取B細(xì)胞并與骨髓瘤細(xì)胞(癌癥B細(xì)胞)融合。健康的脾細(xì)胞不會在細(xì)胞培養(yǎng)中無限期地存活,因此進行這種融合過程以制造永生細(xì)胞系。通過該過程創(chuàng)建了雜交瘤細(xì)胞系。通過將脾臟中的單個B細(xì)胞融合并培養(yǎng)到它們自己的雜交瘤中,可以產(chǎn)生所有產(chǎn)生相同特異性抗體的B細(xì)胞的單一培養(yǎng)物。
特定的克隆號碼被分配給篩選產(chǎn)生單克隆抗體的每個雜交瘤,以便可以識別特定的抗體和它結(jié)合的特定表位。B細(xì)胞將單克隆抗體分泌到細(xì)胞培養(yǎng)基中。在這里,單抗被提取出來用于進一步的測試和純化。單克隆抗體雜交瘤克隆的創(chuàng)建提供了穩(wěn)定的可再生抗體來源,確保每批與前一批相同。為了制造一種分泌富含抗體的液體的腫瘤,稱為腹水,也可以將雜交瘤注射到小鼠的腹腔中用于單抗的產(chǎn)生。
鼠抗地塞米松單克隆抗體的最佳用途:
1、檢測特定抗原
2、檢測蛋白質(zhì)家族的單個成員
3、在實驗/批次之間創(chuàng)建一致的結(jié)果
4、染色背景較少的細(xì)胞——非常適合免疫組織化學(xué)、免疫細(xì)胞化學(xué)和免疫熒光實驗
5、量化蛋白質(zhì)表達(dá)(例如流式細(xì)胞術(shù)或熒光激活細(xì)胞分選)
6、檢測分子構(gòu)象的變化
7、檢測磷酸化狀態(tài)的變化
8、檢測X射線晶體學(xué)的目標(biāo)
9、創(chuàng)建缺乏特定細(xì)胞類型的動物模型
10、免疫療法