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1、石蠟切片置于67℃烘箱中,烘片2小時,脫蠟至水,用pH7.4的PBS沖洗三次,每次3分鐘(3×3’)。2、取一定量pH=6.0檸檬酸鹽緩沖液,加入微波盒中,微波加熱至沸騰,將脫蠟水化后的組織切片置于耐高溫塑料切片架上,放入已沸騰的緩沖液中,中檔微波處理10分鐘,取出微波盒流水自然泠卻,從緩沖液中取出玻片,先用蒸餾水沖洗兩次,之后用PBS沖洗2×3’。(注:不是所有的抗體都需要微波修復(fù)的,視具體情況而定)3、每張切片加1滴3%H2O2,室溫下孵育10分鐘,以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶的活性。PBS沖
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細(xì)胞技術(shù)專題:原代胚胎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)
實驗器材手術(shù)小直剪刀三把、眼科直鑷子三把、眼科彎鑷子兩把、玻璃平皿三套、200目尼龍濾網(wǎng)、50ML、15ML離心管和手術(shù)刀片。以上物品均需要高壓滅菌消毒處理。實驗試劑無Ca2+和Mg2+的PBS、0.05%胰酶0.53mmol/LEDTA溶液、小鼠胚成纖維細(xì)胞(MEF)生長培養(yǎng)基:高糖DMEM加10%FCS。實驗動物孕期14至16天的孕鼠實驗步驟1.處死孕鼠,置于75%酒精里全身浸泡,然后在超凈臺中用一把剪刀和一把鑷子把孕鼠外皮剪開,用另外一把剪刀和一把鑷子把內(nèi)皮剪開,露出子宮,zui后用第三把 -
細(xì)胞技術(shù)專題:補(bǔ)體介導(dǎo)的細(xì)胞毒試驗
1、實驗原理帶有特異抗原的靶細(xì)胞(如正常細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、病毒感染細(xì)胞)與相應(yīng)抗體結(jié)合后,在補(bǔ)體的參與下,引起靶細(xì)胞膜損傷,導(dǎo)致細(xì)胞膜的通透性增加、細(xì)胞死亡。染料(例如:伊紅-Y、臺盼藍(lán))可通過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)使細(xì)胞著色,故可用于指示死細(xì)胞或瀕死細(xì)胞,而活細(xì)胞不著色。此即補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒試驗,利用細(xì)胞毒試驗可以檢查細(xì)胞膜抗原,亦可鑒定抗體的特異性。本實驗中,Thy-1抗原是小鼠胸腺T細(xì)胞特異的表面抗原,在體外利用抗小鼠Thy-1的單克隆抗體通過補(bǔ)體的協(xié)同作用,可殺傷95%以上的胸腺細(xì)胞。2、實驗材 -
標(biāo)簽:細(xì)胞生長曲線細(xì)胞生長曲線是測定細(xì)胞生長數(shù)的常用方法,是判定細(xì)胞活力的重要指標(biāo)。一般細(xì)胞傳代之后,經(jīng)過短暫的懸浮然后貼壁,隨后度過長短不同的潛伏期,即進(jìn)入大量分裂的指數(shù)生長期。為了準(zhǔn)確描述整個過程中細(xì)胞數(shù)目的動態(tài)變化,典型的生長曲線可分為生長緩慢的潛伏期,斜率較大的指數(shù)生長期,呈平臺狀的平頂期及退化衰亡4個部分。實驗方法細(xì)胞生長曲線實驗方法原理細(xì)胞生長曲線是觀察細(xì)胞生長基本規(guī)律的重要方法。只有具備自身穩(wěn)定生長特性的細(xì)胞才適合在觀察細(xì)胞生長變化的實驗中應(yīng)用。因而在細(xì)胞系細(xì)胞和非建系細(xì)胞生長特性
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細(xì)胞技術(shù)專題:小鼠腹腔巨噬細(xì)胞培養(yǎng)實驗
標(biāo)簽:小鼠腹腔巨噬細(xì)胞培養(yǎng)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞培可以:(1)吞噬與清除異物;(2)分泌生物活性物質(zhì);(3)對仿生全降解材料,降解后的無機(jī)產(chǎn)物與生命過程中有機(jī)物的合成作用。實驗方法細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)實驗方法原理取小鼠腹腔巨噬細(xì)胞與乳膠顆粒在不同培養(yǎng)條件下混合后定量加入24孔板,37℃,5%CO2培養(yǎng)箱中孵育后,熒光顯微鏡下計數(shù)吞噬百分率和吞噬指數(shù)。實驗材料小鼠試劑、試劑盒1640培養(yǎng)基小牛血清雙抗臺盼蘭儀器、耗材手術(shù)器械一次性注射器眼科鑷眼科剪96孔板CO2培養(yǎng)箱實驗步驟一、實驗步驟1.如果采用刺激物,則可 -
亞諾法生技公司是*一家結(jié)合中國臺灣IT產(chǎn)業(yè)之生產(chǎn)管理、自動化及量化的精華及其概念,將人類重要基因有計劃性的快速大量生產(chǎn),利用快速有效的抗體生產(chǎn)平臺,建立起zui大的蛋白質(zhì)及抗體銀行。亞諾法使用的體外小麥胚無細(xì)胞蛋白表達(dá)系統(tǒng),此小麥胚屬于真核生物,故生產(chǎn)出來的蛋白較E.coli制成的蛋白更似天然人源蛋白的結(jié)構(gòu)和正確的折疊,加上*的全自動化的生產(chǎn)設(shè)備,亞諾法生產(chǎn)出的重組蛋白產(chǎn)品是率、高產(chǎn)量、*,目前已擁有超過22,000種重組蛋白,其中包括全長及部分序列人源重組蛋白,還有各類針對哺乳動物細(xì)胞和昆蟲細(xì)
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Abnova無內(nèi)毒素生長因子-您干細(xì)胞研究的Z佳幫手
內(nèi)毒素(Endotoxin),也被稱為脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS),會干擾細(xì)胞之功能和生長等,特別是以干細(xì)胞zui易受影響。目前可接受的內(nèi)毒素濃度水平為小于1EU/μg(≈0.1ng/μg)(1),這是目前大多數(shù)生長因子產(chǎn)品的上限。但是,在體外干細(xì)胞的研究顯示,0.005ng/ml的內(nèi)毒素可抑制中胚層的形成,并導(dǎo)致胚狀體(EmbryoidBodies,EBs)無法分化成為成骨細(xì)胞(2)。0.005ng/ml此一濃度就相當(dāng)于將5個濃度為10ng/ml的生長因子(每個含接 -
InvivoGen,為您提供更專業(yè)的天然免疫系統(tǒng)研究工具
InvivoGen致力于天然免疫系統(tǒng)相關(guān)產(chǎn)品的研發(fā)和生產(chǎn)。天然免疫系統(tǒng)在抵抗病毒感染方面發(fā)揮著重要作用,在天然免疫過程中識別特定的病原體相關(guān)的分子模式(pathogen-associatedmolecularpatterns,PAMPs)需要依賴于有限的一組模式識別受體(patternrecognitionreceptors,PRRs),這些PRRs能夠觸發(fā)炎癥反應(yīng)并能有效地將入侵病原體清除。PRRs包含有四大類:Toll樣受體(Toll-LikeReceptors,TLRs);NOD樣受體(N