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無(wú)外泌體血清|胎牛血清使用方法
大多數(shù)細(xì)胞的生長(zhǎng)所需的標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基,都需要添加胎牛血清(fetal bovine serum, FBS)作為其生長(zhǎng)所需補(bǔ)充物。但是,F(xiàn)BS 來(lái)源于牛血清,其中天然含有大量的包括外泌體(exosome)在內(nèi)的外源性細(xì)胞外囊泡(extracellular vesicles)。exosome 其內(nèi)含有的蛋白質(zhì)與核酸分子包括 mRNA、miRNA、rRNA 和 snoRNA 等,exosome 所含成份與其細(xì)胞來(lái)源密切相關(guān),這也決定了 exosome 的功能特異性。但是,F(xiàn)BS 相關(guān)的 RNA 會(huì)在分離細(xì)胞外膜泡 RNA(exRNA)時(shí)一同被分離出來(lái),這會(huì)對(duì)下游 RNA 分析造成干擾。因此,實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)過(guò)程中采取減少 FBS 源 RNA 干擾的預(yù)防措施是非常必要的。
無(wú)外泌體血清適用外泌體研究。
其實(shí)無(wú)外泌體血清的使用方法和常規(guī)血清的使用方法一樣,根據(jù)細(xì)胞的難易程度加5%,10%或者20%的量。保存方法也和常規(guī)血清一樣,-20度儲(chǔ)存,融化的溫度是放在4°C冰箱慢慢融化,化開(kāi)之后可能會(huì)有少許沉淀,也是正常的物理特性。特別是無(wú)外泌體血清是經(jīng)過(guò)特殊處理后的,沉淀有可能比常規(guī)血清要多一些,不用害怕,正常使用就可以。如沉淀過(guò)多可聯(lián)系技術(shù)部。
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